简介：作为一种新型分子标记，表达序列标签一简单重复序列（EST—SSR）来自表达基因，因此除具备来源于传统基因组的SSR标记的所有优势外，还与基因功能表达具有直接或间接的关系，从而强化了SSR标记在遗传研究中的应用。我们简要介绍了EST-SSR标记的开发策略、方法及其应用进展，总结了其中存在的一些问题，目的是为今后该领域的研究提供一定的参考。

简介：目的：利用磁珠富集法分离北柴胡微卫星序列，以开发北柴胡微卫星引物，获得有多态性的简单序列重复（SSR）标记。方法：用生物素标记的混合探针（AC）15、（AG）15、（MAB）12：和两端连接已知序列人工接头的北柴胡基因组DNA酶切片段混和后与磁珠杂交，构建微卫星序列富集的小片段插入文库；利用接头引物分别与生物素探针引物Biotin-（Ac）15、Biotin-（AG）15、Biontin-（MAB）。2形成3个组合，用PCR方法对文库进行初步筛选；对可能的阳性克隆子进行测序复筛，选取微卫星侧翼序列足够长的序列设计引物，用荧光标记的基因分型技术以栽培柴胡种质为材料分析其多态性。结果：开发了5对多态性SSR标记，它们在5份柴胡栽培种质中共扩增出30．70个多态性等位基因，平均每条引物可以扩增出6．14个多态性等位基因；观察等位基因数最多13个，最少3个；有效等位基因数最多11．4个，最少1．6个。同时分析了4对EST-SSR引物，比较了2种SSR标记扩增结果。结论：磁珠富集法是开发柴胡多态性SSR标记的有效方法。

简介：身体装饰是身体的文化表达的重要方式之一。一个特定群体的身体装饰的文化表达至少包含四个层面：社会身份标记、族群文化记忆的身体再现、个体情感和自我的经验表述、历史和身体政治的折射。就第一个层面而言，红瑶“通过仪式”中的换装有着标记社会身份，进而建立起文化赋予的身份认同的重要意义，并成为红瑶集体意识的来源之一。

简介：夸张作为一种主观性表达的标记形式是主观化的结果。读者在面对夸张时不仅不会拘泥于字面的意义而信以为真,而且还会通过字面意义去推导夸张建构者要表现的＂自我＂。夸张表达主观性的机制就是通过建构主观大量或主观小量,或者建构时间顺序的颠倒表达说话人特定状态下的强烈情感或有效传递说话人的意图。决定夸张＂度＂的关键因素是其必须出自表达说话人＂自我＂之需要。

简介：语气副词“简直”是学界语法研究的重点。但近年在年轻群体中，“简直了”的使用频率也很高。本文通过对当代年轻人熟知的微博以及日常交际的语料进行分析，具体探析“简直了”的表达功能，进而指出其得以广泛流传的原因。

简介：目前，在铁皮石斛多糖的研究主要集中在多糖的结构、生物活性等方面，对多糖合成相关基因研究较少，本研究通过对‘红鑫1号’铁皮石斛幼苗期和二年生植株以及‘红鑫6号’铁皮石斛二年生植株叶、茎、根三部位蔗糖合成酶基因进行RT-PCR扩增与测序，发现‘红鑫1号’与‘红鑫6号’铁皮石斛的蔗糖合成酶前体mRNA存在拼接差异的现象，主要形成三种不同的mRNA转录本，其翻译得到的蔗糖合成酶，结构功能没有改变；分析序列的可变剪切的差异；同时对铁皮石斛叶、茎、根嬲的表达量进行半定量RT-PCR检测，蔗糖合成酶基因在植株中不同部位表达量不同，其表达模式表现为茎〉叶〉根。本研究为铁皮石斛蔗糖合成酶基因功能研究提供了科学依据。

简介：在网页上．META标记用于描述不包含在标准HTML里的一些文档信息．通过这些文档信息．可以演化出一些网页META的基本功能。

简介：稻瘟病菌基因组测序的完成有助于全新效应蛋白的挖掘和功能鉴定,而未知功能的蛋白生物信息学预测为这些蛋白的生物学功能鉴定提供了重要的理论参考。本研究利用生物信息学分析对蛋白理化性质分析及其二级结构等进行预测,并构建这四个基因与绿色荧光蛋白（GFP）融合的过表达载体。从稻瘟病数据库中下载MoS4、MoS74、MoS997、MoS1460基因序列,通过分析得到MoS4、MoS74、MoS997和MoS1460基因的ORF分别为281bp、251bp、267bp和240bp;预测MoS997蛋白属于稳定性较好的亲水蛋白,MoS4、MoS74属于不稳定的疏水蛋白,且MoS74还是一个跨膜蛋白,而MoS1460蛋白则属于不稳定的亲水性蛋白,并且获得了四个基因与绿色荧光蛋白（GFP）融合的过表达载体,并经过测序验证。研究结果为进一步探究稻瘟病菌效应蛋白基因的功能及亚细胞定位等提供科学依据。

简介：为制备可视化的转移消失蛋白（MIM）的I-BAR结构域重组体,克隆了顺联绿色荧光蛋白（GFP）探针编码序列的MIM-I-BAR基因.在6xHis标签原核表达质粒上成功构建了DNA序列.同时,实现了未标记荧光探针基因的MIM-I-BAR质粒的构建以作实验对照.成功转染至BL21（DE3）大肠杆菌细胞后,GFP偶联的MIM-I-BAR（MIM-I-BAR-GFP）蛋白表现出很强的可视荧光,该表达产物可方便的通过目测、荧光显微镜、免疫印迹和紫外可见分光光度计等多种手段进行检测.此外,在考察不同条件下的蛋白表达效率过程中发现,带有GFP探针的MIM-I-BAR重组蛋白在温度为10℃时产率最高,而并非37℃.这一特征与非荧光标记的MIM-I-BAR明显不同.研究证实该最佳表达温度条件适用于重组蛋白产品中量制备.所开发的带有荧光探针的MIM-I-BAR蛋白产品及其制备工艺在科学研究、生物医学应用以及药物开发过程中均有较高的应用价值。

简介：摘要目的探讨绿色荧光蛋白作为标记蛋白其荧光强度与胰岛素表达量的相关性。方法构建重组质粒prIns1EGFP，转染HIT-T15仓鼠胰岛瘤细胞，随机分为3组，低糖组（LG）、中糖组（MG），高糖组（HG）,检测基线0小时及葡萄糖刺激后4小时内胰岛素分泌量及单个胰岛β细胞荧光强度。结果HG组单个胰岛β细胞荧光强度，胰岛素分泌量较LG组明显增强（P＜0.05），在一定葡萄糖浓度范围内，绿色荧光蛋白其荧光强度随着葡萄糖浓度的升高而升高，并与细胞胰岛素分泌量呈明显的正相关，相关系数R为0.896。（P＜0.05）结论绿色荧光蛋白作为分子标记物其荧光强度与胰岛素分泌量有正相关性。

简介：目的:检测30例不同病理级别星形细胞瘤中p53基因的表达状况及肿瘤其它生物学特性.方法:采用常规HE染色及免疫组织化学技术检测30例标本中p53、PCNA、GFAP、VIM、S-100的表达.结果:P53免疫组化染色阳性率随病理级别增高而增高,Ⅳ级阳性率83.3%,Ⅰ、Ⅱ级15.4%,且不同级别染色程度也有差异;PCNA均呈阳性,Ⅳ级病例染色阳性强度大于Ⅰ级.GFAP、S-100随病理级别升高而阳性率降低,VIM却随级别升高而升高.结论:检测P53基因突变产物,可判断星形细胞瘤恶性程度与预后,P53基因在星形细胞瘤发展、演化中有重要作用.PCNA可反映星形细胞瘤增殖活性及恶性程度,GFAP、VIM、S-100的测定也可了解其分化程度,三者结合,可增加判断的准确性.

简介：十二音体系的建立,对传统的旋律组织法作了彻底的变革,在音乐中奠定了序列主义的基础。但作曲家们并没有满足于“音高”的序列化,为了创造全新的音乐语言,他们的下一个目标是彻底改革传统的“节奏”组织法。

简介：摘要目的观察96序列相似的家庭成员B(FAM96B)在肝癌组织及癌旁组织中的表达，并探讨其临床意义。方法收集2012年1月至2013年12月期间在中国人民解放军中部战区总医院接受手术治疗的肝癌患者的组织标本及临床病例资料。采用免疫组织化学技术(IHC)、蛋白质印迹法(Western blot)检测FAM96B在96例肝癌组织及配对癌旁组织中的表达，分析其表达差异与肝癌临床病理特征及预后的关系。组间均数比较采用t检验。相关率的比较采用χ2检验，运用Kaplan-Meier法计算生存率并绘制生存曲线，单因素和多因素分析采用Cox比例风险回归模型。结果IHC检测结果显示，FAM96B在癌旁组织阳性表达率高于肝癌组织[72.9%(70/96)比37.5%(36/96)]，差异有统计学意义(χ2＝12.174，P<0.01)。Western blot检测结果显示FAM96B在肝癌组织中的表达量显著低于癌旁组织(0.703±0.136比1.617±0.248，t＝31.733，P<0.01)，且该表达差异与肿瘤直径(t＝8.575，P<0.01)、甲胎蛋白(AFP，t＝7.828，P<0.01)、脉管癌栓(t＝-6.836，P<0.01)及肝癌分化程度(t＝6.892，P<0.01)显著相关，与性别(t＝0.119，P>0.05)、年龄(t＝0.073，P>0.05)、乙肝抗原(t＝-1.920，P>0.05)、肝硬化(t＝-1.508，P>0.05)无明显相关。单因素分析结果表明肿瘤直径(χ2＝7.458，P<0.05)、AFP(χ2＝32.993，P<0.05)、脉管癌栓(χ2＝35.764，P<0.05)、肝癌分化程度(χ2＝5.041，P<0.05)、FAM96B表达水平(χ2＝3.937，P<0.05)与肝癌患者的生存时间显著相关。FAM96B高表达组肝癌患者的生存时间显著长于低表达组肝癌患者(中位生存时间38个月比24个月，χ2＝3.937，P<0.05)。多因素分析结果显示肿瘤直径[风险比(HR)＝0.304，95%可信区间(CI) 0.121～0.764，P<0.05]、AFP(HR＝0.366，95%CI 0.142～0.943，P<0.05)、脉管癌栓(HR＝0.453，95%CI 0.228～0.903，P<0.05)、FAM96B表达量(HR＝4.625，95%CI 1.654～13.003，P<0.05)是肝癌患者独立的预后因素。结论肿瘤直径、AFP、脉管癌栓、FAM96B表达水平是影响肝癌患者生存时间的独立因素。FAM96B表达水平与肝癌恶性程度及不良预后明显相关。

简介：2003年初,我从美资软件公司辞职加入一家高科技民营企业.当时吸引我加入企业的原因有两个,一是自2000年起就对企业ERP不断进行的跟踪与钻研,使我对企业信息管理工作有了浓厚的兴趣,二是这家公司正亟需一名职业的ERP规划、组织与实施者.我感到这里有自己兴趣与事业的平台,同时能够很好地发挥自己在软件公司从事项目管理的工作经验.由此也就有了一个历经4个多月,融杂激情、兴奋和苦恼的ERP招标过程.

简介：人们在阅读书籍时，为了增加思维能力，常常在一些重要地方标上记号。这样做，一是醒目，能使书本文字和语句更好地保持在记忆里，二是做过标记的书一般是经过深思熟虑的。常见的读书标记有：

简介：中华饕餮公司是20世纪末叶驰誉地球村一隅的赝品生产大户。该公司恪守“祸国殃民”的宗旨;拥有一流的“敬业”精神,一流的高新科技;一本万利,日进“斛”金(保守评估)。产品应有尽有:假烟、假酒、假药、假钞、假裘衣、假皮鞋、假项链、假钻石、假文物、假艺术、假化肥、假种于、假仪表、假机床、假公章、假文件、假文凭、假护照、假新闻、假广告、假评审、假鉴定、假奖杯、假发票、假公仆、假钦差、假“廉洁牌坊”、假洋鬼子……还有玄而又

简介：摘要目的通过非标记蛋白质组学技术研究肺腺癌中蛋白质表达。方法选取北京大学人民医院5例未经治疗的肺腺癌患者，提取肿瘤组织和配对癌旁组织的总蛋白，通过高效液相色谱-质谱联用技术进行质谱分析。质谱原始数据使用Maxquant软件进行查库和非标记定量分析。Maxquant所得的查库文件使用Perseus软件进行分析。肺腺癌肿瘤组织与配对癌旁组织进行配对t检验，筛选出差异表达蛋白后并对差异蛋白进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析，以P<0.05为差异有统计学意义。结果通过数据库比对获得11 295条多肽，分别对应于908个蛋白，其中312个蛋白在肺腺癌中存在显著差异表达，110个蛋白表达上调，212个蛋白表达下调。肺癌中上调倍数最高的为铁蛋白，下调倍数最高的为COL6A3。GO分析提示肺腺癌中差异表达的蛋白主要富集的分子功能为RNA binding。KEGG通路分析也证实剪接体通路在差异表达蛋白中显著富集。结论通过非标记蛋白质组学技术发现312个在肺腺癌中显著差异表达的蛋白质。

简介：

简介：摘要：现代社会发展对具备综合素质的人才提出迫切需求，而想要更好地融入社会、促进发展，良好的口语交际是必备能力。在高中语文课上利用课前演讲环节给学生创造自我发展、自我表现的机会，同学之间交流思想、传递信息，综合锻炼创新思维及语用能力，真正做到“讲而演之，自信表达”。以往语文课上，“说”是最容易被忽视的环节，所以很多学生说话表达能力差，缺乏逻辑性、条理性与缜密性。结合高中语文核心素养的教育目标，课前演讲环节的重要性不言而喻，但是什么样的演讲选题才更受学生欢迎？如何设计课前演讲活动才能达到理想效果？本文将围绕“课前演讲”序列化微课程选题策略展开详细讨论。

简介：摘要目的构建miR-7-1启动子核心序列的真核表达载体，并初步探讨其意义。方法根据5’端缺失实验原理，设计引物，PCR法分别扩增含不同长度启动子序列和相同miR-7-1成熟体序列的产物；纯化、经KPNI和XHOI双酶切后将它们分别亚克隆入pGL3.0-Basic真核表达载体，并进行酶切及测序鉴定；将三个构建成功的pGL3.0-miR-7载体（分别命名为p-1189-miR-7，p-1731-miR-7，p-2192-miR-7）体外瞬时转染小鼠乳腺癌4T1细胞；用Real-timePCR检测各组中miR-7成熟体的表达水平；CCK-8法检测细胞生长的变化；最后，利用TRANSFAC数据库预测结合miR-7-1启动子核心序列的潜在转录因子。结果酶切和测序验证成功构建了p-1189-miR-7、p-1731-miR-7、p-2192-miR-7三个miR-7-1启动子真核表达载体；与表达载体p-1189-miR-7、p-1731-miR-7转染组相比，表达载体p-2192-miR-7瞬时转染4T1细胞后可有效表达miR-7成熟体，并显著抑制4T1细胞的体外生长（p＜0.05），提示miR-7启动子序列-1593位点到-2024位点为核心序列；最后，预测结果显示NK2-同源盒-5（NK2-Homebox-5，NKX2-5）和肝细胞核因子4（hepatocytenuclearfactor4homeobox，HNF-4）可能是结合该核心序列的转录因子。结论成功构建了p-1189-miR-7，p-1731-miR-7，p-2192-miR-7三个miR-7-1启动子真核表达载体，并筛选到miR-7-1启动子的核心序列（-1593位点到-2024位点），为后续深入研究miR-7-1在乳腺癌发生中的作用及机制提供了前期实验基础。