简介:摘要:某地区公司110 kt/a 硝铵磷装置是在原 110 kt/a 农用硝酸铵装置基础上改造而成,在原硝酸铵中加入磷元素生产 N-P 2 O 5 (30-10-0)二元复合肥。原农用硝酸铵工艺流程为二次熔融法,后在原工艺流程上新增熔融控制工序,在塔下和塔上分 2 次加入磷酸一铵后加热熔融,制得合格的硝铵磷料浆后通过高
简介:摘要:本研究采用聚合酶链反应 ( PCR)扩增出乙型脑炎病毒 ( JEV) E蛋白基因 , 并进一步克隆入原核表达载体 pMBP-C, 经测序验证无误后转化大肠杆菌 BL21 Gold表达乙型脑炎病毒 E 蛋白。经异丙基巯基半乳糖 ( IPTG)诱导表达后 , 采用十二烷基硫酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)和蛋白免疫印迹 (Western blotting)分析表达产物,表达量约占菌体上清液总蛋白的 40 %,分析证实确为乙型脑炎病毒 E蛋白且有生物学活性。本研究为实验室制备乙型脑炎病毒 E蛋白诊断抗原和为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗打下了基础。
简介:摘要目的构建雌激素受体α配体结合域(ERα-LBD)表达载体,优化表达条件得到可溶性ERα-LBD蛋白。方法在Addgene网站检索关键词ESR(雌激素受体,estrogen receptor),选择符合条件的质粒载体pcDNA-HA-ER WT(Addgene plasmid # 49498; http://n2t.net/addgene:49498; RRID:Addgene_49498),设计引物并扩增得到目的片段ERα-LBD,分别构建蛋白表达载体pET-28a-LBD和pGEX-4T1-LBD,改变诱导温度、异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)浓度以及诱导时间对表达条件优化。待细菌裂解并提取蛋白后进行凝胶电泳,可在细菌上清的泳道中观察到明显的紫色蛋白表达条带,即为可溶性ERα-LBD蛋白。结果pET-28a-LBD重组质粒未能表达重组蛋白ERα-LBD,重组质粒pGEX-4T1-LBD在Rosetta和BL21(DE3)感受态中以1 mmol/L IPTG诱导仅能得到包涵体;以0.2 mmol/L IPTG 16 ℃过夜诱导培养,则可得到可溶性ERα-LBD蛋白。结论成功构建ERα-LBD表达载体并优化诱导表达条件,获得可溶性ERα-LBD蛋白。
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