简介:【目的】研究新型拓扑异构酶Ⅱ抑制剂PPO-1对多种肿瘤细胞株的抑制作用,并初步探讨其作用机制。[方法]MTY法检测PPO-1的体外抗肿瘤活性;光学显微镜观察PPO-1作用后肿瘤细胞形态结构的变化;琼脂糖凝胶电泳分析PPO-1对K562细胞染色体DNA断裂的影响;RT—PCR法检测不同浓度PPO-1(1.0,2.0,4.0μmol/L)对K562细胞caspase-3、topoⅡα/、topoⅡβmRNA表达的影响。【结果】MTT法检测发现PPO-1对多种肿瘤细胞均有较好的活性,IC50为1.41—5.96μmol/L,Giemsa染色发现其出现了典型的凋亡现象,提取总DNA进行琼脂糖凝胶电泳,呈现显著“DNA梯子”,RT—PCR结果显示PPO-1可上调caspase-3及topoⅡdmRNA的表达。【结论】与阳性对照药依托泊苷相比,PPO-1在体外能够抑制多种人源性肿瘤细胞,其抗肿瘤作用机制可能与(1)caspase途径:上调caspase-3基因表达;(2)上调topoⅡα基因表达,抑制topoⅡα催化活性有关。
简介:目的:为了探讨心律平(PPF)旋光异构体在人体内是否存在立体选择性相互作用及其作用规律。方法:以2,3-二对甲苯甲酰酒石酸为拆分试剂,得到单纯旋光异构体(R)-PPF和(S)-PPF;建立以GITC柱前衍生化反相HPLC测定血浆中两旋光异构体浓度的方法。随机双盲,交叉给药,测定8名健康受试者多次口服等剂量的(R/S)-PPF·HCI,(S)-PPF·HCI,(R)-PPF·HCI及安慰剂片达稳态后的一个给药间隔的药时数值,计算药代动力学参数,比较以消旋体和以单纯旋光异构体给药的药动学参数差异。结果:以消旋体给药,(R)-PPF竞争性抑制(S)-PPF体内消除,使两旋光异构体C1,AUC和CSS/D值与以单纯旋光异构体给药的值相比,有显著性改变。结论:心律平旋光异构体在人体内存在立体选择性相互作用,为临床合理应用手性药物提供新的理论依据。
简介:摘要:采用手性高效液相色谱法建立了一种测定伊德利塞对映异构体的方法,用于S-构型伊德利塞光学纯度的分析研究。检测方法采用硅胶表面共价键合直链淀粉-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯)填料(CHIRALPAK IA)为固定相,以正己烷-甲醇-乙醇(80:10:10)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长270 nm,柱温25℃。该方法下S-伊德利塞与R-伊德利塞之间的分离度为6.15;R-伊德利塞质量浓度在0.50~9.96 μg·mL-1范围内线性关系良好,线性方程为y=38.122 x-6.397,r=0.999;R-伊德利塞的定量限和检测限浓度分别为0.25 μg/mL和0.09 μg/mL;低、中、高3个浓度的R-伊德利塞回收率(n=3)分别为100.3%、104.7%、103.2%,RSD(n=9)为2.7%;供试溶液在室温放置8小时内稳定性良好。经检测,多批次S-伊德利塞中R-伊德利塞的含量为0.15%~0.20%。结果表明,所建立的方法经方法验证可准确可靠的测定伊德利塞中的对映异构体。
简介:目的:探讨盐酸普罗帕酮(PPF)旋光异构体在人体内是否存在立体选择性相互作用及其作用规律。方法:以2、3-二对甲苯甲酰酒石酸为拆分试剂,得到单纯旋光异构体(R)-PPF和(S)-PPF;建立以GITC柱前衍生化反相HPLC测定血浆中两旋光异构体浓度的方法。随机双盲,交叉给药,测定8名健康受试者多次口服等剂量的(R/S)-PPF.HCl、(S)-PPF.HCl、(R)-PPF。HCl及安慰片达稳态后
简介:摘要目的探讨在乳腺癌中人类表皮生长因子受体HER-2/neu和拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)之间的关系,及其与临床病理因素之间的相关性.方法利用实时定量聚合酶链式反应(RQ-PCR)对96例患者进行检测来评估基因扩增水平,采用免疫组织化学(IHC)微阵列(n=76)来检查基因扩增和蛋白质表达水平之间是否存在相互关系.结果根据RQ-PCR或IHC微阵列取得的HER-2/neu基因状态,TOP2A基因的扩增水平并不存在显著差异.结论我们的研究结果表明乳腺癌中TOP2A基因的扩增并不局限于带有HER-2/neu+基因型的人,并且表明很大比例的HER-2/neu-基因型患者表现出具有高水平的TOP2A基因.关键词乳腺癌;拓扑异构酶;表皮生长因子;TOP2A;HER-2/neu中图分类号R737文献标识码B文章编号1008-6315(2015)12-1256-01
简介:摘要:建立了一种测定酒石酸阿福特罗对映异构体的手性高效液相色谱法,用于R,R-构型阿福特罗光学纯度的分析研究。采用α1-酸性糖蛋白键合手性柱(CHIRALPAK®AGP,4.0 mm×100 mm,5 μm)为色谱柱,以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠2.34 g和磷酸氢二钠4.33 g,加1000 ml水使溶解)-10%异丙醇(95:5)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为210 nm,柱温为25℃。该方法下S,S-阿福特罗与R,R-阿福特罗之间的分离度大于3.0;S,S-阿福特罗质量浓度在0.10~2.52 μg/ml范围内线性关系良好,线性方程为y=1.3587x+0.0146,r=0.999;S,S-阿福特罗的定量限和检测限浓度分别为0.10 μg/ml和0.05 μg/ml;低、中、高3个浓度的S,S-阿福特罗回收率(n=3)分别为92.2%、95.5%、100.0%,RSD(n=9)为3.7%;供试溶液在室温放置24小时内稳定性良好。经检测,四批酒石酸阿福特罗中仅一批检出S,S-阿福特罗0.02%,其余三批均未检出。结果表明,所建立的方法经方法验证可准确可靠地测定酒石酸阿福特罗中的对映异构体。
简介:目的探讨P53蛋白、Ⅱ型拓扑异构酶(TopoⅡ)及多重耐药相关蛋白(MRP)在合并慢性血吸虫病与非血吸虫病结直肠癌患者中的表达。方法采用回顾性病例对照研究方法。收集2008年1月至2010年12月浙江省肿瘤医院收治的338例结直肠癌患者的临床病理资料。收集患者手术切除的结直肠癌组织。338例患者中,80例合并慢性血吸虫病,258例不合并慢性血吸虫病。采用免疫组织化学染色检测结直肠癌组织中P53、TopoⅡ、MRP蛋白表达。等级资料以百分比表示,采用非参数检验。结果P53蛋白阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达率在合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为5.00%(4/80)、87.50%(70/80)、3.75%(3/80)、3.75%(3/80),在不合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为28.68%(74/258)、19.38%(50/258)、16.67%(43/258)、35.27%(91/258),两者比较,差异有统计学意义(Z=-2.962,P〈0.05)。TopoⅡ蛋白阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达率在合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为8.75%(7/80)、51.25%(41/80)、22.50%(18/80)、17.50%(14/80),在不合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为12.01%(31/258)、55.43%(143/258)、22.48%(58/258)、10.08%(26/258),两者比较,差异无统计学意义(Z=-1.551,P〉0.05)。MRP蛋白阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达率在合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为7.50%(6/80)、40.00%(32/80)、28.75%(23/80)、23.75%(19/80),在不合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为24.42%(63/258)、38.37%(99/258)、24.03%(62/258)、13.18%(34/258),两者比较,差异有统计学意义(Z=-3.408,P〈0.05)。结论P53蛋白和MRP蛋白在合并慢性血�