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  • 简介:目的牛骨胶原蛋白肽(collagenpeptides,CP)化合物能够显著增加股骨骨密度,并改善股骨的微结构,在骨质疏松症的预防和治疗中发挥重要的作用,它通过口服给的形式吸收入肠.然而,此过程的分子机制尚不清楚.因此,本研究以阐明牛骨CP化合物血清对成骨细胞增殖与分化的影响.方法制备牛骨CP化合物大鼠血清,牛骨CP化合物处理的实验组和未经处理的对照组大鼠血清浓度为3%、6%、10%,加到无血清的DMEM溶液中,用MTT法和流式细胞术分别检测牛骨CP血清对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响.茜素红矿化染色检测牛骨CP血清对成骨细胞矿化,用ProPlus6图像软件定量分析茜素红染色的含量.结果MTT结果表明,3%、6%及10%的CP化合物血清与对照组相比,能够显著促进MC3T3-E1细胞增殖(P〈0.05).然后将3%CP化合物血清,对照组(control,CN)血清分别作用于MC3T3成骨细胞,培养3d,流式细胞术测定细胞周期.结果表明,与3%CN血清相比,3%CP血清组G1期比例显著减少,G2/S期比例显著增加(P〈0.01),表明牛骨CP通过促进G2/S期的百分含量而促进细胞的增殖.矿化染色结果表明CP血清处理21d后能显著促进成骨细胞的矿化(P〈0.05).结论牛骨CP血清在成骨细胞增殖与分化中起重要作用,为骨质疏松症的防治提供了理论依据.

  • 标签: 胶原蛋白肽含药血清 成骨细胞 增殖 分化 骨质疏松 动物实验
  • 简介:目的:研究降糖复方血清对H2O2诱导的血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用H2O2诱导人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)氧化损伤模型,观察细胞形态学变化并测定细胞活力、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,NO含量以及内皮素(ET-1)含量。结果:降糖复方血清可明显改善氧化损伤的ECV304细胞形态学变化,提高细胞存活率,降低MDA含量、提高SOD活力、增加NO释放、减少ET-1释放。结论:降糖复方血清能对抗H2O2对血管内皮细胞的氧化损伤,起到保护血管内皮细胞的作用。

  • 标签: 降糖复方 含药血清 血管内皮细胞 氧化损伤
  • 简介:疾病的急性发作常使患者措手不及,特别是心脏病、结石等症,让人不知如何是好。如果你在到医院前能采取适当地自我治疗,既能减轻疾病的痛苦,又可收到良好的疗效。

  • 标签: 舌下含药 急症 急性发作 自我治疗 心脏病 疾病
  • 简介:以MTT法观察补肾和柔肝中药血清对体外软骨细胞的影响。结果:在两次连续灌胃3h后所取血清浓度为5%和10%时,对软骨细胞有促进增殖的作用;血清浓度为5%时,两之间作用无差异,而10%时,补肾方作用优于柔肝方。为便于以下比较,将血清浓度定在5%;长时间(8d)灌胃和短时间(1d)所取血清对软骨细胞的增殖作用无差异;以0.5、1、5倍等效剂量灌胃所取务清对软骨细胞的增殖作用未呈量效依赖关系,其中

  • 标签: 软骨细胞 MTT法 中药 含药血清
  • 简介:目的:通过观察冠心康血清对RAW264.7巨噬细胞Mer受体酪氨酸激酶(Mertyrosinekinase,MerTK)表达的影响,探讨冠心康抗动脉粥样硬化的可能作用机制。方法:SD大鼠给予冠心康灌胃,2次/d,连续给5d后制备冠心康血清。体外常规培养RAW264.7巨噬细胞,实验分为空白对照组(加10%浓度的正常血清)、模型组[加10%浓度的正常血清+20mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)]、冠心康组(加10%浓度的冠心康血清+20mg/Lox-LDL)。干预12h后采用RT-qPCR检测各组巨噬细胞的MerTKmRNA表达;干预24h后采用Westernblot法检测各组巨噬细胞的MerTK蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组MerTKmRNA和蛋白的表达水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,冠心康组MerTKmRNA和蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01)。结论:冠心康抗动脉粥样硬化的作用可能与上调巨噬细胞MerTK的mRNA和蛋白表达有关。

  • 标签: Mer受体酪氨酸激酶 冠心康 动脉粥样硬化 巨噬细胞
  • 简介:摘要目的探讨当归补血汤血清对人宫颈癌细胞Hela增殖、凋亡的影响。方法当归补血汤灌胃Wistar大鼠3日,无菌条件下取血,制备血清用于体外培养Hela细胞,MTT法检测Hela细胞活性,单细胞电泳法检测Hela细胞调亡。结果不同浓度的当归补血汤血清均能抑制Hela细胞活性,并且呈现明显的剂量、时间依赖性。血清对Hela细胞有明显的凋亡阳性反应。结论一定浓度的当归补血汤血清能够显著抑制Hela细胞生长,并诱导其凋亡。

  • 标签: 当归补血汤 含药血清 人宫颈癌细胞株Hela
  • 简介:目的了解炒麦芽血清对体外培养的MMQ大鼠垂体瘤细胞神经生长因子(NGF)、催乳素(PRL)分泌表达的影响。方法应用血清药理学的方法,以不同剂量、15%给比例的家兔炒麦芽血清和阳性对照药物溴隐停血清及正常血清对体外培养的MMQ大鼠垂体瘤细胞进行干预,连续检测4d,以放射免疫法检测细胞培养液上清中NGF和PRL分泌量,并对实验结果进行统计分析。结果炒麦芽各剂量血清组、溴隐停组与空白对照组相比培养液中NGF和PRL含量具有显著性差异(P〈0.05),其中,正常血清组和空白对照组之间无统计学意义(P〉0.05)。随炒麦芽血清剂量的增加,MMQ垂体瘤细胞NGF分泌量逐渐升高,并伴随着PRL分泌量逐渐下降,炒麦芽剂量、NGF、PRL分泌量三者间呈显著相关(P〈0.05);阳性对照药物溴隐停血清对NGF和PRL的分泌均具有抑制作用(P〈0.01)。结论低剂量炒麦芽促进PRL分泌和高剂量炒麦芽抑制PRL分泌的双向调控机制可能是通过影响NGF分泌实现的.溴隐停抑制PRL激素分泌的原因可能与NGF分泌无关。

  • 标签: 炒麦芽 血清药理 MMQ细胞系 垂体瘤 催乳素 神经生长因子
  • 简介:目的:研究平目汤血清对前脂肪细胞及成熟脂肪细胞的作用,探讨其治疗Graves眼病的机制。方法:采用组织块法将人Graves眼病眼眶前脂肪细胞原代培养并传代,选用间接免疫荧光技术鉴定;用平目汤药液灌胃SD大鼠制备平目汤血清,并配成低(5%)、中(10%)、高(20%)三个剂量组;油红O染色观察前脂肪细胞的诱导分化作用;MTT法检测平目汤对前脂肪细胞增殖的影响;流式细胞术检测平目汤对成熟脂肪细胞凋亡率的影响。结果:(1)通过组织块法成功培养出梭形细胞,间接免疫荧光检测为前脂肪细胞。(2)成功诱导前脂肪细胞分化,油红O染色证实为成熟脂肪细胞。(3)平目汤各组均可显著抑制前脂肪细胞的分化,与空白对照组及地塞米松组比较差异明显。(4)平目汤各组均可下调前脂肪细胞增殖活性,以平目汤中剂量组、干预96h效果最佳,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(5)平目汤各组成熟脂肪细胞凋亡率明显高于空白对照组(P<0.05),以平目汤中剂量组效果最佳。结论:平目汤血清可抑制人Graves眼病眼眶前脂肪细胞增殖、促进眼眶成熟脂肪细胞凋亡、减少眼眶脂肪细胞的数量,从而减少眼眶脂肪容积、改善Graves突眼症状。

  • 标签: 平目汤 含药血清 眼眶脂肪细胞 细胞增殖 诱导分化 细胞凋亡
  • 简介:目的观察芪地合剂血清对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖的影响,探讨其在糖尿病肾病(DN)防治中的可能机制。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞株,利用噻唑蓝(MTT)比色法动态观察各组血清作用下各组GMcs不同时间点的增殖情况。结果与正常组相比,高糖+LPS能明显刺激体外培养的GMCs增殖,而与模型组相比,芪地合剂血清能明显抑制GMCs增殖。结论高糖+LPS可促进GMCs增殖,芪地合剂血清能明显抑制高糖+LPS条件下GMCs增殖,从而发挥预防和治疗肾小球硬化,进而延缓DN的进展。

  • 标签: 黄芪 肾小球系膜细胞
  • 简介:目的:观察龟鹿二仙胶汤对骨髓基质干细胞(BMSCs)增殖的影响,确定影响BMSCs增殖的最佳中药血清浓度。方法:经前期体外分离、纯化、培养获得兔BMSCs,运用不同浓度的龟鹿二仙胶汤中药血清对获得的兔BMSCs进行药物干预24、48、72h后,采用MTT、免疫组化、流式细胞仪等方法,研究龟鹿二仙胶汤对BMSCs增殖的影响。结果:MTT比色实验显示,龟鹿二仙胶各浓度组均能不同程度地促进BMSCs的能量代谢,促进BMSCs增殖,与空白对照组相比有显著差异(P〈0.01),而且以15倍药物浓度组为最佳。免疫组化结果证实,龟鹿二仙胶汤血清可通过促进PCNA表达来控制DNA复制,以15倍龟鹿二仙胶汤药物浓度血清培养时BMSCs表达致密的棕褐色颗粒最多,其他浓度组及TGF—β3组较多,空白对照组则最少。FCM结果显示,二仙胶汤药物血清能显著提高BMSCs增殖指数,且以15倍药物浓度龟鹿血清培养时最明显。结论:龟鹿二仙胶汤刺激BMSCs增值与药物浓度有关,低浓度龟鹿二仙胶汤就能显著刺激BMSCs增殖,无论是48h、72h测验均为15倍药物浓度时具有显著的增值作用,而更高浓度龟鹿二仙胶汤则表现为促进BMSCs增殖作用减弱。

  • 标签: 龟鹿二仙胶汤 骨髓基质干细胞 转化生长因子-Β3 含药血清 细胞增殖
  • 简介:目的探讨麝香对外源性骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)增殖和迁移的影响。方法将60只SD大鼠随机分为麝香高、中、低剂量组及空白对照组,制备麝香血清及生理盐水血清。15只SD大鼠利用全骨髓贴壁法分离BMSCs,培养至P3代,通过形态学观察、表型鉴定、成骨成脂诱导鉴定BMSCs,鉴定认为培养成功后通过麝香血清干预BMSCs,检测细胞增殖率,利用Transwell实验检测麝香血清对BMSCs迁移的影响。结果外源性大鼠BMSCs呈梭形贴壁生长,生长状态良好;表型鉴定:CD45、CD34阴性表达,CD44、CD90阳性表达;细胞成骨、成脂诱导后可定向成骨、成脂分化;不同浓度麝香组与对照组比较均能提高BMSCs增殖率(P<0.05);与对照组比较,不同浓度麝香在24h、48h、72h均增加BMSCs迁移(P<0.05),以低浓度组效果最佳。结论麝香血清可以促进BMSCs增殖,促进BMSCs的体外迁移。

  • 标签: 麝香 骨髓间充质干细胞 增殖 迁移 大鼠 动物实验
  • 简介:马兜铃酸(Aristolochicacid)是关木通、广防己、马兜铃、天仙藤、青木香、寻骨风和朱砂莲以及铁线莲马兜铃、蛇根马兜铃、印度马兜铃等10余种马兜铃科马兜铃属植物中的一类菲类化合物,主要由马兜铃酸A、B、C、D、E等及其衍生物组成。近年来随着因服用含有马兜铃酸的植物而导致。肾损害的报道不断出现,人们对马兜铃酸的毒性越发地关注。

  • 标签: 马兜铃酸 植物药 药物毒性 肾脏损害 低血钾性瘫痪
  • 简介:目的:用血清药理学方法观察耳聋左慈汤对庆大霉素(Gentamicin,GM)所致小鼠耳蜗毛细胞损伤的作用。方法:完整分离小鼠耳蜗基底膜,平铺于鼠尾胶上,无血清培养液培养24小时后,正常组更换10%空白血清的培养液,模型组同时加入0.3mMGM和10%空白血清,耳聋左慈汤药物血清组同时加入0.3mMGM和10%血清,继续培养24小时,免疫荧光染色后荧光显微镜下进行全耳蜗毛细胞计数。用全耳蜗毛细胞损失率评价耳聋左慈汤血清对GM所致耳蜗毛细胞损伤的作用。结果:正常耳蜗毛细胞排列整齐,无缺失,而0.3mMGM模型组耳蜗毛细胞大量缺失,外毛细胞损失率(41.8±1.9)%高于内毛细胞损失率(16.8±1.8)%;耳聋左慈汤药物血清可降低耳蜗毛细胞的损失率,内、外毛细胞损失率与模型组比较差异均有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。结论:耳聋左慈汤血清对GM造成的耳蜗毛细胞损伤有拮抗作用。

  • 标签: 耳聋左慈汤 庆大霉素 血清药理学 耳蜗 毛细胞
  • 简介:摘要目的探讨肺金生血清对体外培养的A549细胞生长及MMP-2表达的影响。方法以肺金生方血清作用于体外培养的A549细胞,普通倒置显微镜观察各组细胞的生长特点及形态,MTT法检测细胞活力,ELISA法检测20%肺金生方血清对A549细胞MMP-2表达的影响。结果20%肺金生方及环磷酰胺血清作用于细胞后,与正常细胞相比形态发生明显改变,明显梭形化,细胞数量减少。肺金生方血清作用后OD值与空白组血清作用后OD值相比有差异,其中20%、25%血清与空白组相比有显著性差异(P<0.01),20%肺金生方血清组对A549细胞MMP-2表达与空白血清组相比有差异(P<0.01)。结论肺金生方可以抑制体外培养的A549细胞生长,降低A549细胞MMP-2表达水平。

  • 标签: 肺金生方 A549细胞 MMP-2
  • 简介:目的:探讨铁甲草血清对过氧化氢诱导的体外LO2肝细胞损伤的影响。方法:用终浓度为0.6mmol/L过氧化氢诱导体外LO2肝细胞损伤,给予铁甲草血清干预,观察肝细胞形态学变化并检测肝细胞的存活率,取细胞上清液测定ALT、AST、MDA、GSH及GSH-px的含量。结果:铁甲草血清的高剂量作用后,肝细胞数量较多,细胞膜完整、边界清晰、透亮度较高;高剂量能显著提高体外LO2肝细胞存活率,降低ALT、AST、MDA水平,明显增加GSH、GSH-px含量。结论:铁甲草血清对过氧化氢所致体外肝细胞损伤具有一定的保护作用。

  • 标签: 铁甲草 过氧化氢 肝细胞损伤 谷丙转氨酶 谷草转氨酶
  • 简介:摘要目的探讨芪参活血颗粒血清对脓毒症大鼠心肌细胞(H9C2)过度自噬的抑制作用及其对脓毒症心肌细胞的保护作用。方法12只SPF级Wistar大鼠,按芪参活血颗粒低、中、高剂量[分别相当于生药12.7、25.4、50.8 g/(kg·d)]灌胃制备血清。将传代培养的大鼠胚胎心肌细胞(H9C2)分为五组:对照组以10%胎牛血清的DMEM培养;脂多糖(LPS)组以10%胎牛血清的DMEM+1 μg/ml的LPS培养;LPS+芪参活血颗粒低、中、高剂量组分别以10%低、中、高剂量血清的DMEM预干预4 h后加入1 μg/ml的LPS。共同培养4 h后,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测自噬标志物Beclin-1、ATG5和LC3B的mRNA及蛋白表达;共同培育8、12、24、48 h后,采用CCK-8法检测各组细胞在不同时间点的细胞活性。结果与对照组比较,LPS组自噬标志物Beclin-1、ATG5 mRNA及Beclin-1、ATG5、LC3B蛋白表达在LPS干预细胞早期(4 h)即升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与LPS组比较,LPS+芪参活血颗粒各剂量组均可降低LPS导致的Beclin-1、ATG5、LC3B的mRNA升高及蛋白的过表达,差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8法检测细胞活性实验显示:LPS组及LPS+芪参活血颗粒低、中、高剂量组在12、24 h及48 h细胞活性明显下降,与对照组差异有统计学意义(P<0.05);而LPS+芪参活血颗粒中剂量组24、48 h的细胞活性较LPS组明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同浓度芪参活血颗粒血清对LPS诱导的心肌细胞自噬均有抑制作用,且中剂量芪参活血颗粒灌胃大鼠获得的血清可通过抑制自噬改善脓毒症心肌损伤。

  • 标签: 脓毒症 心肌细胞 自噬 芪参活血颗粒 含药学清
  • 简介:摘要目的探讨芪参活血颗粒血清对脓毒症大鼠心肌细胞(H9C2)过度自噬的抑制作用及其对脓毒症心肌细胞的保护作用。方法12只SPF级Wistar大鼠,按芪参活血颗粒低、中、高剂量[分别相当于生药12.7、25.4、50.8 g/(kg·d)]灌胃制备血清。将传代培养的大鼠胚胎心肌细胞(H9C2)分为五组:对照组以10%胎牛血清的DMEM培养;脂多糖(LPS)组以10%胎牛血清的DMEM+1 μg/ml的LPS培养;LPS+芪参活血颗粒低、中、高剂量组分别以10%低、中、高剂量血清的DMEM预干预4 h后加入1 μg/ml的LPS。共同培养4 h后,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测自噬标志物Beclin-1、ATG5和LC3B的mRNA及蛋白表达;共同培育8、12、24、48 h后,采用CCK-8法检测各组细胞在不同时间点的细胞活性。结果与对照组比较,LPS组自噬标志物Beclin-1、ATG5 mRNA及Beclin-1、ATG5、LC3B蛋白表达在LPS干预细胞早期(4 h)即升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与LPS组比较,LPS+芪参活血颗粒各剂量组均可降低LPS导致的Beclin-1、ATG5、LC3B的mRNA升高及蛋白的过表达,差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8法检测细胞活性实验显示:LPS组及LPS+芪参活血颗粒低、中、高剂量组在12、24 h及48 h细胞活性明显下降,与对照组差异有统计学意义(P<0.05);而LPS+芪参活血颗粒中剂量组24、48 h的细胞活性较LPS组明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同浓度芪参活血颗粒血清对LPS诱导的心肌细胞自噬均有抑制作用,且中剂量芪参活血颗粒灌胃大鼠获得的血清可通过抑制自噬改善脓毒症心肌损伤。

  • 标签: 脓毒症 心肌细胞 自噬 芪参活血颗粒 含药学清
  • 简介:  α溴隐停和炒麦芽血清在90min附近出峰时间相同,测定结果表明炒麦芽血清中α溴隐停含量是(0.0702±0.01)μg/ml,结果α溴隐停和炒麦芽血清溴隐停血清成分一部分峰相同

  • 标签: 中溴 停移行 含药
  • 简介:目的观察补肾健脾活血方血清对UMR106细胞成骨分化和骨形成相关蛋白的影响。方法将实验动物随机分成空白血清组、低剂量血清组、中剂量血清组、高剂量血清组、阳性对照组,分别予以灌胃制备血清,并对其细胞进行加培养,测定UMR106细胞培养72h后的检测增殖、ALP活性以及各组细胞OPN、RUNX2、BMP-2蛋白表达情况。结果与空白血清组比较,低、中、高剂量血清组和阳性对照组加干预72h后,细胞吸光度值均较低(P〈0.05),而细胞ALP活性均较高(P〈0.05),且随着中药血清水平升高,ALP活性提高;与空白血清组相比,经中药血清培养后UMR106细胞OPN、RUNX2、BMP-2均显著上调(P〈0.05),且呈浓度梯度性变化,各中药血清组以高剂量组表达最为明显。结论表明补肾健脾活血方(骨康方)血清有促进UMR106细胞成骨分化和调节骨形成相关蛋白;且随着补肾健脾活血方(骨康方)水平的增高,成骨分化更明显。

  • 标签: 中医药 补肾健脾活血方 UMR106细胞