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  • 简介:科技日报哈尔滨10月15日电,我国首例采用成体体细胞作为核供体的克隆东北民在哈尔滨诞生。14日.出生仅3d的3头可爱的黑色克隆小猪与媒体见面。3头克隆小猪通体黑色.发育正常.各项形态特征与供核体细胞个体完全一致。据项目负责人、东北农业大学生命科学学院刘忠华博士介绍.他们“克隆”的东北民与过去克隆的不同之处在于采用的是成体体细胞作为核供体,其供核体细胞取自1头出生3d的东北民猪仔猪.而我国在此之前的克隆核供体细胞则取自于妊娠33d的胎儿。技术难度更高一些。

  • 标签: 东北民猪 克隆猪 核供体细胞 生命科学学院 东北农业大学 项目负责人
  • 简介:在国家重点基础研究发展规划——“973”项目以及北京市自然科学基金资助下,由中国农业大学李宁教授主持的课题组经过一年多的科技攻关,终于取得成果:一头体重1130g的克隆小香猪在河北省三河市明慧养猪公司顺利诞生。这是我国独立自主完成的首例体细胞克隆,填补了我国在这一领域的空白,这头克隆小香猪的诞生表明我国在此项研究上已经达到了国际先进水平。

  • 标签: 克隆猪 体细胞 诞生 中国农业大学 国际先进水平 基金资助
  • 简介:近日,中国科学院亚热带农业所科研人员阳成波、印遇龙和范明哲等通过艰苦的探索,成功地克隆肾脏Ⅱ型钠离子依靠磷转运载体a(NaPi-Ⅱa)基因,并把全序列提交到GeneBank(基因序号为:DQ173927)。

  • 标签: 猪肾脏 基因 克隆 科学家 中科院 中国科学院
  • 简介:近日,中国科学院亚热带农业所科研人员阳成波、印遇龙和范明哲等通过艰苦的探索,成功地克隆肾脏Ⅱ型钠离子依靠磷转运载体a(NaPi-Ⅱa)基因,并把全序列提交到GeneBank(基因序号为:DQ173927)。

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  • 简介:新华社北京6月10日讯,在中国科学家和丹麦科学家的共同培育下,当地时间2006年6月8日14时05分,3头克隆在丹麦农业科学研究所顺利降生。迄今,这3头幼小的“手工克隆均健康活泼,发育正常。中国科学院北京基因组研究所负责人说,这不仅是北欧首例克隆,更是国际上首次采用“手工克隆”技术成功培育的克隆,标志着动物克隆领域的一个突破性进展。

  • 标签: 中国科学家 克隆猪 手工 培育 丹麦 农业科学研究所
  • 简介:参考GenBank上发表的星状病毒亚基因组序列,设计1对引物,对星状病毒广西流行株衣壳蛋白ORF2基因进行扩增,最终克隆得到PAstV/NNJG7株的衣壳蛋白完整序列。序列分析发现,其ORF2全长2358bp,编码786个氨基酸;与星状病毒Ⅰ型参考株核苷酸同源性最高,为77.3%-79.4%;在ORF1b和ORF2连接处有一段高度保守的序列,在ORF23′端有一段长83bp非翻译序列及一个含43bp高度保守的茎环样基序。

  • 标签: ORF2基因 序列分析 病毒 克隆 GENBANK
  • 简介:日前,江苏省异种器官移植重点实验室培育成功首批转基因克隆,标志着我国开展异种器官移植迈开了实质性步伐,未来将有望实现为人类定制器官。该实验室拥有一支核心的科研团队,建成后将繁育拥有自主知识产权的、

  • 标签: 江苏省 克隆猪 转基因 异种器官移植 重点实验室 自主知识产权
  • 简介:目的克隆广西巴马小型PGC-1α基因编码区(CDS)序列,利用RT-PCR和QRT-PCR方法分析PGC-1αmRNA组织表达情况。方法本实验以广西巴马小型背最长肌cDNA为模版,PCR扩增PGC-1α基因CDS序列,将其连接至pEASY-T5载体,转染细菌、验证和序列测定;通过RT-PCR半定量和QRT-PCR实时荧光定量检测PGC-1α基因在小型多个组织中的表达情况。结果克隆获得广西巴马小型PGC-1α基因CDS序列,全长2391bp,编码796个氨基酸,与参考序列的同源性为99.9%,两处碱基发生同义突变,分别是C-A1105和GA1524;PGC-1α基因在广西巴马小型猪心脏和肾脏中的表达丰度最高,其次是肝脏、皮下脂肪和背最长肌,而在胰腺中未检测到其表达。结论成功克隆了广西巴马小型PGC-1α基因编码区序列并进行了多种组织表达分析,为后续研究PGC-1α在小型2型糖尿病发生过程中作用途径打下基础。

  • 标签: 广西巴马小型猪 PGC-1Α基因 序列分析 组织表达
  • 简介:目的为寻找囊尾蚴病新的免疫学候选诊断分子奠定基础。方法设计合成引物,用PCR法从cDNA文库中扩增出囊尾蚴抗原6H基因编码序列,将其克隆入PMD-18T载体,然后在原核表达载体PET-28a中亚克隆,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot观察表达结果。结果用PCR法扩增出一条大小约774bp的特异性片段,克隆质粒PMD-18T-6H和原核表达质粒PET-28a-6H作BamHⅠ和XhoⅠ双酶切和以重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段。诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约33kDa大小的融合蛋白条带,Westernblot结果显示其可与囊尾蚴病人血清起反应。结论本实验成功地克隆囊尾蚴抗原6H编码基因,并在原核细胞中进行了表达及鉴定,为进一步免疫诊断研究奠定了基础。

  • 标签: 寄生虫病 抗原 基因克隆
  • 简介:设计合成两对覆盖PCV2基因组奎长的引物,对PCV2分离株S2、P11、L进行全基因测序。将所测序列与GenBank上已公布的PCV2毒株序列进行同泺性比较,并绘制系统发育进化树。结果显示。所测毒株与其它地城的24株PCV2分离株的基因组序列同源性很高。3个分离株之问的奎基因核苷酸同源性在95.4%-99.3%。序列分析表明欧洲分离株和美洲分离株分别构成PCV2的两个夫的分支:欧洲系和美洲系。S2、P11属于欧洲系,L属于美洲系。

  • 标签: 猪圆环病毒 克隆 序列测定与分析
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  • 简介:目的:利用慢病毒载体建立稳定表达载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F(pAPOBEC3F,简称pA3F)的PK15细胞系。方法:以实验室前期构建的pBPLV-flag-pA3F质粒为模板,PCR扩增pA3F基因,克隆到pLenti-Puro-3Flag载体构建成pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒,Western印迹鉴定其在HEK293T细胞中的表达;将pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒与包装载体共转染HEK293T细胞,包装成Lenti-pA3F慢病毒并测定病毒滴度;将Lenti-pA3F慢病毒感染PK15细胞,通过嘌呤霉素压力筛选并结合有限稀释法,筛选稳定表达pA3F的细胞单克隆株,最终Western印迹检测细胞单克隆株中pA3F的表达。结果:菌落PCR和序列测定表明pLenti-Puro-pA3F-3Flag质粒构建正确,Western印迹显示该质粒可在HEK293T细胞中表达pA3F蛋白;包装了Lenti-pA3F慢病毒,滴度为1.32×10^8TU/mL,慢病毒感染PK15细胞后可检测到pA3F蛋白的表达;经Western印迹鉴定,筛选得到的单克隆细胞可稳定表达pA3F蛋白。结论:建立了稳定表达pA3F的PK15细胞单克隆株,为进一步深入研究内源性反转录病毒在pA3F作用下的免疫逃逸机制奠定了基础。

  • 标签: 猪载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F 慢病毒载体 猪内源性反转录病毒
  • 简介:NR5A2是孤儿核受体家族中的重要成员,在胚胎发育、类固醇激素生成、卵泡发育和排卵中发挥重要作用。经克隆和测序获得二花脸NR5A2基因编码区序列,采用RT-PCR技术分析其组织表达特征,并采用荧光定量PCR技术检测二花脸与杜长大三元杂交卵巢组织中NR5A2基因转录水平。结果表明:

  • 标签: 基因克隆 二花脸猪 转录水平 卵巢组织 荧光定量PCR RT-PCR
  • 简介:目的克隆版纳微型近交系(BMI)不育和可育公猪TDRP1基因,分析其序列及mRNA表达水平上的差异,预测其蛋白质功能,并检测该基因在可育公猪中的组织表达分布情况。方法以NM_001198925序列为模板,设计特异引物,采用RT-PCR方法结合测序获得TDRP1的cDNA序列并进行生物信息学分析;采用半定量PCR方法检测TDRP1在不育和可育公猪睾丸中的表达规律,分析该基因在可育公猪17种组织中的表达特征。结果获得了BMITDRP1基因的编码区序列(GenBank登录号:KJ186786),生物信息学分析表明其编码186个氨基酸,蛋白质相对分子质量(Mw)为20.49×10^3,等电点(pI)为5.86,无信号肽,有94.1%的概率位于细胞核,含有1个亮氨酸富集的核输出信号。不同物种的氨基酸序列比对表明TDRP1与人、恒河猴、小鼠和大鼠等哺乳动物的TDRP1相似性在73%-83.2%之间,其中与人、恒河猴的相似性较高。mRNA表达分析表明,TDRP1在BMI不育和可育公猪睾丸间表达水平差异无显著,在精囊腺和前列腺中高表达,在睾丸和小脑中中度表达,在大脑和肾脏中低表达,在其余组织中不表达。结论成功克隆了BMITDRP1基因的全长编码区序列并发现了BMI特有的2个SNP位点;TDRP1基因在BMI不育和可育公猪间序列完全一致,睾丸mRNA表达水平差异无显著性,多组织转录谱分析表明该基因存在明显的组织差异表达现象,在精囊腺和前列腺中有较高表达量,为深入研究TDRP1基因在精子发生方面的作用奠定了基础。

  • 标签: 精子发生相关蛋白1 精子发生 版纳微型猪近交系 生物信息学 组织表达特性
  • 简介:1997年4月,英国科学家宣布用克隆技术培育出一只绵羊“多莉”。一时间,“克隆”成为20世纪末惊世骇俗的遗传科技。与此同时,围绕克隆技术的间谍窃密、微机复制窃密活动也就相伴而生了。继英国克隆出绵羊后,美国和欧洲也纷纷克隆、牛等。在克隆研究中,植入一头胚胎或一头胚胎牛细胞中的究竟是哪一种基因,是一个技术秘密,有关公司都守口如瓶。早在几年前,我国(下转第45页)(上接第37页)有关部门便利用克隆技术成功地培育了牛、、山羊等动物。国外克隆实验研究机构与间谍机构联手,伺机窃取我克隆机密。我国克隆机密存储于电脑克隆软盘中,国家保密机构为它制定了严格的保密防范措施,反间谍机关则严密注视国际上克隆技术

  • 标签: 克隆技术 反间谍 实验研究 防范措施 国家安全 保密机构
  • 简介:克隆技术已渐成熟,其作用与意义也已成为人们关注的焦点。大家对克隆羊多利也应当比较熟悉。那末你对克隆技术是怎样看的呢?是赞成还是反对?看了下面的文章,也许使你对克隆会有更多的了解,从而得出自己的结论。

  • 标签: 结论 熟悉 作用与意义 文章 焦点 克隆技术