简介：将壳聚糖纳米粒包裹的报告基因pEGFP-N1质粒转染至HEK293细胞,并在HEK293细胞中成功表达荧光蛋白的基础上,进一步将本室自行构建的PNP基因的真核高效表达载体质粒pcDNA3-PNP转染至HEK293细胞.转染72h后,对转染的HEK293细胞给予前体药6-MPDR至终浓度40μg/ml,一天后,采用MTT比色法测定药物对细胞增值的影响,并进行统计学处理.实验结果表明采用壳聚糖纳米粒转染试剂转染并给予前体药6-MPDR的实验组活细胞数,与用壳聚糖转染但不给前体药6-MPDR的对照组活细胞数相比,有显著差异(P＜0.05),说明新筛选出的壳聚糖纳米粒转染试剂可以将PNP自杀基因递送至靶细胞中,并在细胞中进行表达,从而使PNP/6-MPDR自杀基因系统发挥杀伤细胞的作用.分别采用相同工作浓度的脂质体与壳聚糖纳米粒转染试剂转染相同浓度的基因质粒,壳聚糖纳米粒对靶细胞生长数量影响很小,说明的壳聚糖纳米粒细胞毒性大大低于阳离子脂质体的细胞毒性.

简介：ＨＹ浓度不同的提取物和给药后不同时间光照的细胞毒作用图２为分别为不同浓度的ＨＹ提取物在给药后１ｈ和６ｈ光照６０ｍｉｎ的细胞生长抑制曲线,　ＨＹ与ＨＹ提取物的细胞毒作用比较图４比较了ＨＹ与ＨＹ提取物对ＨｅｐＧ２细胞的抑制作用,ＨＹ浓度不同的提取物在不同光照时间下的细胞毒作用图３为给药后６ｈ分别光照３０

简介：目的研究地塞米松对过氧化氢（H2O2）体外杀伤烟曲霉（Aspergillusfumigatus,A.fumigatus）的影响。方法用不同浓度的地塞米松（0mg/mL,0.02mg/mL,0.2mg/mL）处理烟曲霉孢子,按照处理时间不同分为A（0.5h）,B（2h）,C（7h）,D（16h）4组。用测定H2O2杀伤真菌的标准方法——斑点法分别测定各组烟曲霉孢子对H2O2的氧化杀伤敏感性。结果在H2O2浓度为1.5mmol/L下,未用地塞米松处理的孢子（阴性对照）氧化杀伤敏感性为5×101（生长良好）。A（0.5h）组：地塞米松0.02mg/mL处理后孢子的氧化杀伤敏感性为5×10^3;地塞米松0.2mg/mL处理后孢子的氧化杀伤敏感性为5×10^4。B（2h）组：地塞米松0.02mg/mL和0.2mg/mL处理后孢子的氧化杀伤敏感性均为5×10^3。C（7h）和D（16h）组：不同浓度地塞米松处理后氧化杀伤敏感性与阴性对照没有差别（均为5×10^1）。结论地塞米松使H2O2在体外杀伤烟曲霉的能力增强,这种作用仅发生在地塞米松接触烟曲霉孢子的早期（〈2h）。

简介：摘要目的探讨抗程序性死亡受体-1(PD-1)抗体联合细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞抗肿瘤作用的可能机制，及此过程中CXC趋化因子受体3(CXCR3)-CXC趋化因子配体9/10/11(CXCL9/10/11)信号轴的作用。方法取肾细胞癌(RCC)患者外周血10 ml，密度梯度离心获取外周血单个核细胞(PBMC)，利用重组纤维连接蛋白(5 μg/ml)、抗CD3抗体(5 μg/ml)、干扰素-γ(IFN-γ，1 000 U/ml)及白细胞介素-2(500 U/ml)制备CIK细胞。流式细胞技术检测CIK细胞表型，CIK细胞及PBMC中T淋巴细胞CXCR3的表达。利用消化酶混合液消化肾癌组织制备RCC单细胞悬液，分为两组，一组加入抗PD-1抗体(抗PD-1组)，另一组加入非特异性IgG设为对照组。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测CXCL9/10/11及IFN-γ mRNA表达水平，Transwell实验检测CIK细胞迁移能力。两组间比较采用t检验，相关分析采用线性回归。结果CIK细胞中CD3+CD4+T淋巴细胞、CD3+CD8+T淋巴细胞占比分别为(32.93±11.77)%、(59.67±11.60)%，表达CXCR3的CD3+T细胞百分比(28.05±4.15)%显著高于PBMC (6.69±5.29)%，t＝6.354，P<0.01。抗PD-1组CXCL9/10/11及IFN-γ的mRNA相对表达水平(1.29±0.41，1.87±0.72，1.58±0.68，1.24±0.39)均显著高于对照组(t＝2.655，4.511，3.175，2.315，P<0.05)，且趋化因子CXCL10/11与IFN-γ的mRNA相对表达水平呈正相关(F＝6.672，9.227，P<0.05)。抗PD-1组CIK细胞的迁移率[(16.64±6.47)%]显著高于对照组[(14.21±6.26)%，t＝4.075，P<0.01]。结论RCC中，抗PD-I抗体可能通过CXCR3-CXCL9/10/11信号轴促进CIK细胞的趋化迁移，进而发挥协同抗肿瘤作用。

简介：研究了抗坏血酸与丝裂霉素C（MitomycinC）对艾氏腹水癌细胞的联合杀伤作用，Cu（Ⅱ）／mitomycinC／抗坏血酸体系对DNA链的断裂作用，以及丝裂霉素C存在下，Cu(Ⅱ）催化抗坏血酸有氧氧化的动力学，实验结果表明，抗坏血酸与丝裂霉素C在杀伤艾氏腹水癌细胞时存在协同作用，该协同作用与Cu(Ⅱ）／mitomycinC/抗坏血酸体系对DNA链的断裂作用以及Cu(Ⅱ）／mitomycinC/抗坏血酸体系产生·OH自由基的量和速度有关，其均与抗坏血酸浓度成正比，此结果提示，抗坏血酸有氧氧化产生的·OH,以及由之引起的DNA链断裂作用，是导致抗坏血酸与丝列霉素C在杀伤艾氏腹水癌细胞时存在协同作用的重要原因。

简介：自然杀伤细胞（NK细胞）是机体抗肿瘤的第一道防线，是机体天然免疫的主要承担者，也是获得性细胞免疫的核心调节细胞。NK细胞对肿瘤的杀伤活性与其细胞表面受体和肿瘤细胞表面的配体密切相关，由于肿瘤细胞表面配体表达不同致使对NK细胞杀伤的敏感性有很大差异，临床疗效不一。我们简要介绍了影响肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性的机制，对目前提高肿瘤细胞敏感性的策略和方法进行了总结。

简介：心理战是敌对双方以各种形态的信息和媒介为武器，以人的思想、意识、精神、情感等主观世界为目标，通过心理宣传、心理威慑、心理恐吓、心理欺骗等各种手段，对人的心理施加刺激影响，使其朝预定方向变化和发展，造成有利于己、不利于敌的心理状态，从而达到一方面分化瓦解征服敌人，以尽可能小的代价换取尽可能大的胜利，一方面巩固己方心理防线，保持昂扬士气，使己方始终立于不败之地。这是一种特殊的作战样式，

简介：摘要目的观察原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者外周血和肝脏浸润的自然杀伤样B(natural killer-like B, NKB)细胞变化，分析IL-18在体外对NKB细胞水平的影响和机制。方法入组43例HCC患者和21例健康对照者(normal control, NC)，采集抗凝外周血，分离血浆和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)，16例接受手术治疗的HCC患者，取肿瘤组织和癌旁组织，分离肝脏内淋巴细胞(intrahepatic lymphocyte, IHL)。酶联免疫吸附试验检测血浆IL-12、IL-18和IL-18结合蛋白(IL-18 binding protein, IL-18BP)水平，流式细胞术检测PBMC和IHL中CD3-NKp46+CD19+NKB细胞比例和NKB细胞中IL-18+细胞比例。使用重组人IL-18(1 ng/ml和10 ng/ml)对PBMC和IHL进行刺激培养，检测NKB细胞比例和NKB细胞中IL-18+细胞比例变化，并检测培养上清中IL-18BP水平变化和NKB细胞中磷酸化核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)的变化。组间比较采用t检验、单因素方差分析或LSD-t检验。结果血浆IL-12水平在HCC组和NC组之间的差异无统计学意义(P＝0.245)，HCC组血浆IL-18水平低于NC组[(224.30±58.89) pg/ml vs (327.00±52.27) pg/ml，P<0.000 1]，HCC组血浆IL-18BP水平高于NC组[(4.42±0.97) ng/ml vs (0.92±0.18) ng/ml，P<0.000 1]。HCC组外周血NKB细胞比例低于NC组[(2.68±1.23)% vs (8.88±2.95)%，P<0.000 1]，NKB细胞中IL-18+细胞比例亦低于NC组[(54.42±12.60)% vs (69.74±12.65)%，P<0.000 1]。肿瘤组织IHL中NKB细胞比例低于癌旁组织[(2.89±0.86)% vs (4.66±1.17)%，P<0.000 1]，NKB细胞中IL-18+细胞比例亦低于癌旁组织[(51.50±13.18)% vs (62.13±9.24)%，P＝0.013]。重组人IL-18刺激后培养上清中IL-18BP分泌水平降低(P<0.05)。1 ng/ml IL-18刺激对PBMC和IHL中NKB细胞比例、NKB细胞中IL-18+细胞比例、NKB细胞中磷酸化NF-κB水平均无影响(P>0.05)，而10 ng/ml IL-18刺激不但提升NKB细胞比例和NKB细胞中IL-18+细胞比例，还可诱导NKB细胞中磷酸化NF-κB水平升高(P<0.01)。结论高浓度IL-18在体外可能通过抑制HCC患者IL-18BP表达促进NF-κB磷酸化，可能发挥正反馈作用，诱导NKB细胞活化和IL-18分泌。

简介：一位歌唱比赛的评委在听一位参赛者唱完一首歌后问：“谁叫你来的？”“朋友。”评委答：“他们不是你的朋友。”

简介：<正>报载,曾有一位南方老板应邀与人洽谈业务。不料,正式见面时,新买的腰带竟连续两次发生“事故”,致使裤子脱落,使他蒙受羞辱。更糟的是,对方恰巧是一位女士,人家由此判断出,这位先生连自己的生活都不会照料,难以让人信任。就这样,一根劣质皮带“黄”了若干万元的买卖。于

简介：摘要目的通过体外T细胞识别自体树突状细胞(dendritic cell，DC)加工递呈的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)特异性抗原，探讨靶向HBV-C、E、X基因的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes，CTLs)对体外靶细胞的特异性杀伤效应。方法利用基因重组技术分别将HBV-C、HBV-E、HBV-X三种抗原负载至腺相关病毒(adeno-associated virus，AAV)上，获得重组腺相关病毒(recombinat adeno-associated virus，rAAV)。通过Ficoll法分离得到外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMC)，经HBV-C-rAAV、HBV-E-rAAV、HBV-X-rAAV分别转染单核细胞并诱导分化为成熟DC。上述DC分4组，分别为阴性对照组(未转染组)和HBV-C-rAAV/DC、HBV-E-rAAV/DC、HBV-X-rAAV/DC组(转染组)。通过流式细胞术检测rAAV的转染率，并检测DC表面的标志分子和DC分泌的细胞因子白细胞介素(interleukin，IL)-10、IL-12。将体外培养的T细胞分别与未转染组DC、HBV-C-rAAV/DC、HBV-E-rAAV/DC、HBV-X-rAAV/DC混合，利用混合淋巴细胞反应收获CTLs，利用流式细胞术检测CTLs表面的标志分子以及分泌的细胞因子干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)，并用3H-TdR掺入法检测T细胞的体外增殖能力。通过51Cr释放实验计算CTLs对靶细胞的杀伤率。结果对照组和转染组(HBV-C-rAAV/DC、HBV-E-rAAV/DC、HBV-X-rAAV/DC)中，HBV抗原阳性的DC比例分别为2.80%、85.12%、96.63%、98.42%。转染组中表达CD80的DC比例分别是55.26%、58.25%、59.63%，表达CD83的比例分别是43.19%、48.73%、40.01%，表达CD86的比例分别是95.46%、96.74%、83.62%，分泌IL-12的比例分别是47.60%、52.50%、69.20%。经转染组DC诱导产生的T细胞亚群中，CD8+CD69+T细胞的比例分别为33.10%、31.50%、30.00%，CD4+CD25+T细胞的比例分别为11.89%、8.77%、10.87%，分泌IFN-γ的比例分别为44.65%、45.16%、45.16%，T细胞体外增殖力(cpm值)分别为19 351、19 070、26 428。经转染组DC诱导产生CTLs对HBV抗原阳性的原代肝癌细胞(hepatoma cancer cells，HCC)组的杀伤率分别为61.18%、56.93%、65.05%，对HBV抗原阴性的宫颈癌细胞组的杀伤率分别为4.62%、3.69%、4.34%，对HCC+HBV抗体封闭组的杀伤率分别为34.90%、27.39%、30.66%，对HCC+主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex，MHC)-Ⅰ类分子抗体封闭组的杀伤率分别为17.83%、21.47%、23.71%。转染组DC诱导产生的CTLs能有效杀死HBV抗原阳性的靶细胞，在抗原表达下降后，其杀伤能力显著减弱，MHC-Ⅰ类分子的缺失也会导致CTLs杀伤能力的明显降低。结论健康人外周血中分离出的单核细胞和淋巴细胞，可在体外通过特定细胞因子的诱导、携带不同HBV基因片段的rAAV的转染和细胞共培养，最终获得HBV特异性杀伤能力显著增强的CTLs，且该类T细胞具有很强的细胞增殖能力，有利于持续杀伤靶细胞；CTLs对靶细胞的杀伤作用依赖于HBV抗原和MHC-Ⅰ类分子的表达。

简介：摘要目的探讨人自然杀伤（NK）细胞在CD137抗体作用下通过抗体依赖性细胞毒性作用（ADCC）介导对乳腺癌细胞的杀伤作用。方法NK细胞表型和细胞因子检测实验分组：阴性对照组（未用人CD137抗体处理的NK细胞）、CD137抗体处理组（10 μg/mL人CD137抗体处理4 h的NK细胞）；NK细胞毒性检测实验分组：根据体系中是否添加NK细胞、人CD137抗体和西妥昔单抗分为8组。流式细胞术检测两组NK细胞表面CD16分子的表达情况，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测两组NK细胞培养上清液中干扰素（IFN）-γ和肿瘤坏死因子（TNF）-α的浓度，乳酸脱氢酶（LDH）法检测8组反应体系中表皮生长因子受体（EGFR）高表达乳腺癌细胞系MDA-MB-231和EGFR低表达乳腺癌细胞系MDA-MB-453的杀伤比例，并采用t检验或析因分析进行统计学分析。结果与阴性对照组比较，CD137抗体处理组CD16+NK细胞比例（79.57﹪ ±0.92﹪比90.43﹪±0.67﹪）、细胞因子IFN-γ浓度[（388.90±7.02） pg/ mL比（523.90±1.90）pg/ mL]和TNF-α浓度[（20.59±4.09）pg/mL比（47.22±2.14）pg/mL]均升高，差异有统计学意义（P < 0.05）；MDA-MB-231细胞杀伤的三因素析因分析结果显示：NK细胞、人CD137抗体和西妥昔单抗3个因素分别对MDA-MB-231细胞的杀伤都有作用（F = 5227.276、201.473、1792.242，P均< 0.001），3个因素两两之间的交互作用对MDA-MB-231细胞的杀伤也都有作用（F =183.903、1517.187、33.483，P均< 0.001），3个因素的二级交互作用差异有统计学意义（F = 41.505，P < 0.001）。结论人CD137抗体可增强NK细胞分泌细胞毒性因子IFN-γ和TNF-α的能力，同时可上调NK细胞表面CD16分子的表达，从而使得NK细胞可能通过西妥昔单抗介导的ADCC作用增强对表皮生长因子受体（EGFR）高表达乳腺癌细胞的杀伤作用。

简介：成功的网络视频广告含两种元素：病毒性元素、品牌信息元素。品牌信息元素解决品牌需求，病毒性元素解决传播需求。

简介：社交媒体的存在让企业传播活动面临新的挑战。航空业是受社交媒体冲击最为严重的行业之一，但对航空公司声誉打击最严重的往往并非事件本身，而是它们采取的回应方式。

简介：导弹是“导向性飞弹”的简称。是一种可以指定攻击目标，甚至追踪目标动向的无人驾驶武器。导弹有多种分类方法．按飞行方式。一般分为弹道导弹和巡航导弹。

简介：近年来，在媒体的舆论监督上，有一个现象颇为费解：一方面，对于行政、司法腐败，社会丑恶现象，对个人权利的侵犯，媒体的揭露可谓不遗余力，而且屡奏奇效；而另一方面，上述的丑恶现象却并未相应地销声匿迹，往往是按下葫芦浮起瓢，在某些地方，甚至有愈演愈烈之势。这到底是什么地方出了毛病?

简介：23岁的周佳玉，家住河北省承德市。2011年9月，她考入河北师范大学。因为长相靓丽，打扮时尚，周佳玉一直是很多男孩心目中的“女神”。可对待爱情，周佳玉始终抱着宁缺毋滥的态度。

简介：对地面部队而言，战场上装甲车辆的防护从未如此重要但也从未面临如此多的挑战。战场上成型装药威胁的尺寸、能力和数量，以及配用成型装药的先进制导远程导弹的使用，也达到前所未有的高度。

简介：2006年7月14日，以色列海军“萨尔”一5型导弹护卫舰“哈奈特”号在距离贝鲁特城约16公里处水域执行任务时，被据称是伊朗提供的“诺尔”反舰巡航导弹击中。

简介：纵观近些年主动防护系统的发展，可以看出其已逐步应用于坦克、装甲车上，并且已由单件装备发展为一种复杂的系统。本文按照硬杀伤主动防护系统的击毁距离将其分为两类：近距离主动防护系统与超近距离主动防护系统。