学科分类
/ 25
500 个结果
  • 简介:目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histonedeacetylaseinhibitionHDACi):丁酸(SodiumButyrateNaB)腹腔连续给药对BALB/C小鼠体重增长及器官发育的影响。方法:20只健康,3周BALB/C小鼠随机分成2组(丁酸组和对照组);丁酸组腹腔注射丁酸(NaB)1.2g/Kg·d,连续21天;对照组同时间腹腔注射等量生理盐水。21天后,测量体重;行4%多聚甲醛灌注、固定,取心脏,肝脏,脾脏,肺脏,肾脏,脑组织以及小肠组织器官,做石蜡切片,HE染色两组比较有无器官损害。结果:1.丁酸组与对照组比较,两组动物体重增长良好,平均增长11g,两组间无统计学差异(P〉0.05)。2.HE染色见丁酸组:心肌细胞无变性,坏死,无炎性细胞浸润,无肉芽组织形成;脾脏红、白髓结构清晰,脾窦无扩张,未见炎性细胞浸润;肺间质无扩张,充血,未见纤维化,肺泡无水肿;肾小管上皮细胞无变性坏死,肾间质未见水肿;脑细胞周围间隙和小血管间隙无增宽;肠道纤毛上皮排列整齐,肠壁无出血,坏死,无渗出;肝细胞围绕中央静脉呈放射状排列,细胞无水肿,无胆汁淤积。未发现上述器官的病理变化。结论:丁酸长期腹腔给药安全,无明显毒副作用。

  • 标签: 丁酸钠 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 毒性
  • 简介:静脉麻醉是小儿手术最常用而有效的麻醉方法。氯胺酮是小儿最常用的静脉麻醉药,但容易引起眼压增高,由此可能促使正常眼组织移位,带来手术并发症和后遗症,从而限制了氯胺酮在小儿眼科手术中的应用。鉴于静脉麻醉药泾丁酸有降低眼压的作用。为此,我们试图将羟丁酸与氯胺酮复合施行静脉麻醉,观察其麻醉前和麻醉后的眼压变化,企图找出一种既能获得满意麻醉效果,又可使眼压保持正常范围的小儿眼科手术麻醉方法。今将观察结果与评价报道如下,以供临床参考.

  • 标签: 羟丁酸钠 氯胺酮 高眼内压 静脉麻醉药 拮抗 小儿手术
  • 简介:1病例报告患者,男,5岁,体重14kg,因膀胱结石拟在分离麻醉下行膀胱切开取石术,术前30min阿托品0.3mg,鲁米那0.04g,安定33mg肌注,入室时因哭闹给予氯胺恫98mg(7mg/kg)肌注,手术进行25min时,追加γ-羟丁酸1500mg(107mg/kg)患儿安静,手术顺利进行,20min后结束手术。

  • 标签: Γ-羟丁酸钠 氯胺酮 呼吸抑制 复合麻醉 膀胱切开取石术 病例报告
  • 简介:摘要目的探讨丁酸在活体新生SD大鼠肠屏障功能中的保护作用,建立丁酸对活体肠黏膜作用的量效关系。方法将出生后9 d龄的新生SD大鼠按照随机数字表法分为5组,其中4组使用丁酸(sodium butyrate,NaB),浓度分别为20 mmol/L、40 mmol/L、80 mmol/L、160 mmol/L等4组,对照组使用0.9%生理盐水;经回肠灌注不同浓度的NaB作用1 h后取回肠组织,在尤斯灌注系统(Ussing Chamber)上测定跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance,TER)值,苏木精-伊红(HE)染色观察病理学及炎症损伤情况,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测紧密连接蛋白(Occludin、ZO -1)的mRNA表达量,Western blot法检测Occludin、ZO -1蛋白的表达水平。结果尤斯灌注系统测得对照组在30 min、60 min、120 min时的相对TER值(各个时间点测得的TER值除以0 min测得TER值得到的百分比值)分别为(87.36±1.88)、(85.98±0.99)、(101.03±1.47),20 mmol/L组分别为(83.45±2.97)、(107.24±5.35)、(101.44±3.96),40 mmol/L组分别为(126.07±3.48)、(140.54±3.64)、(100.50±4.64),80 mmol/L组分别为(102.24±4.60)、(134.55±7.80)、(106.76±8.82),160 mmol/L组分别为(84.80±2.97)、(78.16±2.89)、(67.11±4.07);使用不同浓度NaB作用30 min,与对照组相比,40 mmol/L组的TER值明显增加(P<0.05),作用1 h时,40 mmol/L组与80 mmol/L组的TER值明显高于对照组、20 mmol/L及160 mmol/L组(P<0.05),但二者的差异无统计学意义(P>0.05)。使用不同浓度NaB作用1 h后,根据损伤分级评分(0~5分)结果,160 mmol/L组(2.16±0.75)分,较对照组(0.33±0.51)分损伤明显(P<0.01),余各组损伤不明显(P>0.05)。40 mmol/L组及80 mmol/L组肠黏膜组织Occludin蛋白mRNA(1.80±0.31、2.13±0.90)表达量较对照组(1.01±0.21)上调,差异具有统计学意义(P<0.05),蛋白表达水平(0.58±0.04、0.73±0.01)较对照组(0.24±0.01)明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);而ZO -1蛋白mRNA(1.36±0.24、1.45±0.58)表达量较对照组(1.01±0.11)上调不显著,差异无统计学意义(P>0.05),蛋白表达水平(1.46±0.04、1.34±0.07)较对照组(1.07±0.05)亦明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);160 mmol/L组Occludin和ZO -1蛋白mRNA(1.27±0.47、0.92±0.25)表达量较对照组的差异无统计学意义(P>0.05),而蛋白表达水平(0.47±0.01、2.90±0.04)均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论NaB对活体新生SD大鼠肠黏膜的作用具有浓度依赖性,40 mmol/L或80 mmol/L的NaB能增强肠黏膜屏障的功能,这可能与肠黏膜组织Occludin和ZO -1蛋白的表达增加有关。

  • 标签: 大鼠 丁酸钠 肠黏膜屏障
  • 简介:目的探讨丁酸对人食管癌Eca-109细胞凋亡的作用。方法将丁酸以1mmol/L、2.5mmol/L和5mmol/L与人食管癌Eca-109细胞共培养,倒置显微镜观察细胞生长情况,免疫组化(SP法)检测凋亡抑制基因survivin蛋白的表达。结果Eca-109细胞经丁酸处理后,在倒置显微镜下观察到丁酸处理后的Eca-109细胞形态学发生了改变,细胞生长明显受到抑制;免疫组化检测实验组细胞的survivin蛋白表达阳性率低于对照组,具有统计学意义(P〈0.05)。结论丁酸可诱导食管癌Eca-109细胞凋亡,其机制与下调凋亡抑制基因survivin蛋白表达有关。

  • 标签: 丁酸钠 食管癌细胞 凋亡
  • 简介:摘要目的比较丁酸对老年与青年哮喘小鼠作用的效果。方法分别将24月龄(18只)和4月龄(18只)雄性C57BL/6小鼠,用随机数字法分为3组,对照组(Ctrl),模型组(OVA),处理组(OVA+Sob),每组各6只。OVA抗原激发前2 d,处理组给予腹腔注射1 mg/g丁酸(Sob),OVA组和Ctrl组给予生理盐水干预,末次激发后1 d进行终点评估。比较不同月龄小鼠Ctrl组、OVA组和OVA+Sob组之间的气道高反应性(AHR)、肺组织切片苏木精-伊红(HE)病理表现以及肺组织炎症因子的差异,评价Sob对不同月龄哮喘小鼠的作用。结果乙酰甲胆碱(Mch)6.250 g/L(276.28±113.62和103.02±19.55,t=3.368,P=0.026)、12.500 g/L(457.53±157.29和114.76±20.28,t=4.338,P=0.022)、25.000 g/L(1113.16±256.98和567.87±187.34,t=3.538,P=0.009)刺激下,老年OVA组AHR较青年OVA组升高;HE染色显示,老年Ctrl组与青年Ctrl组比较,肺泡腔面积减少,部分实性变,肺间质纤维结缔组织增生,肺泡上皮细胞,毛细血管内皮细胞增生;与各自Ctrl组比较,老年OVA组显著升高的细胞因子为嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)(P=0.035)、IL(白细胞介素)-17A(P=0.004)和IL-1β(P=0.001)。青年OVA组中升高的细胞因子为Eotaxin(P=0.001)、IL-17A(P=0.001)、IL-4(P=0.004)、角质形成细胞的趋化因子(KC)(P=0.012)和IL-1β(P<0.001);青年OVA组与老年OVA组比较,IL-4升高(Z=2.882,P=0.004);IL-1β降低(t=2.728,P=0.020);观察Sob对不同月龄哮喘小鼠的作用效果,Mch 12.500 g/L(P=0.015)、25.000 g/L(P=0.014)刺激下,老年OVA+Sob组AHR较老年OVA组缓解;Mch 3.125 g/L刺激时,青年OVA+Sob组AHR较青年OVA组下降(P=0.021);与青年OVA组比较,青年OVA+Sob组中IL-4(P=0.004)和IL-1β(P=0.014)降低。结论老年小鼠哮喘程度较青年小鼠更严重,可能与不同免疫表型相关;Sob对青年哮喘小鼠炎症因子的缓解作用,可能与青年哮喘小鼠AHR严重程度较老年小鼠轻有关。

  • 标签: 哮喘 羟丁酸钠 脂肪酸类
  • 简介:γ-羟丁酸(Camma-hydroxybutyrate,CHB)具有降低机体脂质过氧化物(LPO)、增加超氧化物歧化酶(SOD)活力的药理机制,本研究以GHB联合放疗(Radiotherapy,RT)治疗恶性脑胶质瘤,以期提高患者生存率。方法:将恶性胶质瘤术后患者36例分为GHB联合RT组和常规放疗组前者于每次放疗前30min给予GHB200mg/m~2静脉滴注,常规放疗1.8~2gy/次,5次/周,处方剂量55~60Gy,后者除不使用GHB外其余同前者。随访观察肿瘤局部控制、生存和急性放射反应情况。Kaplan-Meier方法分析近期疗效、预期生存率结果:GHB+RT组1年、1.5年肿瘤局控率分别为62.20%、26.50%,对照组53.80%、13.80%GHB+RT组平均生存期为21.9±8.26个月,1年、2年预期生存率分别为80.0%、20.0%。对照组平均生存期为14.10±7.75个月,1年、2年预期生存率分别为66.67%、13.33%。GHB+RT组放疗后急性损伤2级、3级发生率分别为22.22%、16.67%,脑水肿、癫痫发生率分别为38.89%、22.22%;对照组急性损伤2级、3级发生率分别为33.33%、27.78%、脑水肿、癫痫66.67%、33.33%。结论:GHB联合放疗治疗恶性脑胶质瘤有助于减少放射反应,提高肿瘤局部控制率。

  • 标签: Γ-羟丁酸钠 胶质瘤 放射治疗 放射增敏剂
  • 简介:为研究丁酸对断奶仔猪生长性能和小肠形态的影响,本试验选用(21±1)日龄断奶、(6.62±0.03)kg健康“长×大”杂交仔猪36头,随机分为2个处理组.每个处理组3个重复(栏),每个重复6头仔猪,公母各半。试验日粮是在以玉米豆粕基础日粮基础上添加0.1%丁酸。试验期为21d。饲养结果表明,在断奶仔猪日粮中添加0.1%丁酸可显著降低断奶后1周的腹泻发生率(P〈0.05),提高断奶仔猪7-21d的平均日增重(P〈0.05),对采食量和料重比无显著性影响(P〉0.05)。小肠组织形态观察结果表明,0.1%丁酸可显著提高断奶后第一周十二指肠和回肠绒毛高度与隐窝深度的比值和降低隐窝深度(P〈0.05)。

  • 标签: 丁酸钠 断奶仔猪 腹泻率 平均日增重 小肠形态
  • 简介:摘要目的探讨丁酸对严重烫伤小鼠肠道屏障的作用及相关机制。方法将18只雌性8~12周龄C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假伤组、单纯烫伤组、烫伤+丁酸组,每组6只。将单纯烫伤组、烫伤+丁酸组小鼠背部浸入90 ℃热水中9 s,造成30%体表总面积Ⅲ度烫伤;将假伤组小鼠背部浸入37 ℃温水中9 s模拟致假伤。3组小鼠均于伤后即刻腹腔内注射乳酸林格液1 mL。此外,烫伤+丁酸组小鼠分别于伤前30 min及伤后即刻经腹腔注射300 mg/kg剂量丁酸溶液;假伤组及单纯烫伤组小鼠仅腹腔注射相同体积的无菌磷酸盐缓冲液。伤后24 h,取3组小鼠抽取门静脉血采用异硫氰酸荧光素-葡聚糖荧光探针示踪法检测肠道通透性,取回肠组织采用蛋白质印迹法检测肠黏膜带状闭合蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白、密封蛋白1、密封蛋白2、核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18蛋白表达,采用间接免疫荧光法检测肠黏膜ZO-1分布。对数据行单因素方差分析、LSD检验及Bonferroni校正。结果(1)伤后24 h,假伤组、单纯烫伤组、烫伤+丁酸组小鼠肠道通透性分别为0.88±0.19、2.62±0.48、1.23±0.16。与假伤组比较,单纯烫伤组小鼠肠道通透性明显增强(P<0.01),烫伤+丁酸组无明显变化(P>0.05)。与单纯烫伤组比较,烫伤+丁酸组小鼠肠道通透性明显减弱(P<0.01)。(2)伤后24 h,与假伤组比较,单纯烫伤组和烫伤+丁酸组小鼠肠黏膜紧密连接蛋白ZO-1、闭合蛋白及密封蛋白1表达量均明显降低(P<0.05),密封蛋白2表达量明显增加(P<0.05)。伤后24 h,与单纯烫伤组比较,烫伤+丁酸组小鼠肠黏膜ZO-1及闭合蛋白表达量明显增加(P<0.05),密封蛋白2表达量明显减少(P<0.05),密封蛋白1表达量无明显变化(P>0.05)。(3)伤后24 h,与假伤组比较,单纯烫伤组和烫伤+丁酸组小鼠肠黏膜NLRP3、IL-1β、IL-18蛋白表达量均明显增加(P<0.05);与单纯烫伤组比较,烫伤+丁酸组小鼠肠黏膜NLRP3、IL-1β及IL-18蛋白表达量均明显减少(P<0.05)。(4)伤后24 h,假伤组小鼠肠黏膜ZO-1沿细胞膜均匀分布,光滑连续;单纯烫伤组小鼠肠黏膜ZO-1分布不规则,有断裂;烫伤+丁酸组小鼠肠黏膜ZO-1分布改变较单纯烫伤组有所改善。结论丁酸能够抑制严重烫伤后小鼠肠黏膜NLRP3炎症小体激活,减少IL-1β和IL-18产生,从而减轻紧密连接蛋白表达和分布异常,保护肠道屏障功能。

  • 标签: 烧伤 肠道营养 紧密连接蛋白 丁酸钠 肠道屏障
  • 简介:摘要目的探讨小儿手术用氯胺酮安定、γ-羟基丁酸、异丙嗪的临床麻醉效应。方法应用氯胺酮、γ-羟基丁酸、异丙嗪复合麻醉行小儿手术65例。结果小儿麻醉应用氯胺酮较为普遍,应用得当,效果较满意。结论氯胺酮、γ-羟基丁酸、异丙嗪复合适用于小儿手术麻醉。

  • 标签: 氨胺酮&gamma -羟基丁酸钠异丙嗪复合麻醉体会
  • 简介:目的体外研究丁酸对人食管癌Eca-109细胞的凋亡作用。方法以1mmol/L、2.5mmol/L、5mmol/L丁酸处理Eca-109细胞,透射电镜观察细胞凋亡的形态,TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫组化(SP法)检测凋亡抑制基因bcl-2蛋白的表达。结果Eca-109细胞经丁酸处理后,透射电镜见到细胞核染色质浓缩,聚集于核膜处等细胞凋亡的形态特征,并见到凋亡小体;TUNEL法检测发现2.5mamol/L丁酸处理24h组与阴性对照组细胞凋亡率分别为5.5%和1.6%,其差异具有显著性(P〈0.05);免疫组化检测实验组的bcl-2蛋白表达阳性率低于对照组,具有统计学意义(P〈0.05)。结论丁酸可诱导食管癌Eca-109细胞凋亡,其机制与下调凋亡抑制基因bcl-2蛋白表达有关。

  • 标签: 丁酸钠 食管癌细胞 凋亡 ECA-109细胞
  • 简介:对比研究羟丁酸和氯胺酮对原代培养大鼠心肌细胞的毒性作用。方法将经原代培养成活4d后的大鼠心肌细胞分为5组,每组6孔。包括对照组,小剂量(HL,3×10^-3mol·L^-1)与大剂量(HH,3×10^-2mol·L^-1)羟丁酸组和小剂量(KL,1×10^-5mol·L^-1)与大剂量(KH,1×10^-4mol·L^-1)氨胺酮组。各组均于实验开始后8h终止反应,评定心肌细胞博动功能,观察细胞形态学改变、测定心肌细胞酶及电解质变化。结果与对照组相比,KL组心肌细胞博动频率明显加快(P<0.05),而KH组减慢(P<0.05)。细胞形态学亦有相应变化。KH组LDH和AST释放量增加(P<0.05),ALP活性下降(P<0.05)。而HL、HH组的上述指标均无明显变化。各组间电解质变化未见显著差异。结论高浓度的氯胺酮具有直接的心肌抑制作用,而低浓度的氯胺酮却有正性变时性和变力性作用。无论低学浓度或高浓度的羟丁酸,均未见心肌细胞毒性作用。

  • 标签: 羟丁酸钠 氯胺酮 心肌细胞毒性 细胞培养 动物实验
  • 简介:摘要:本文以樱桃谷肉鸭作为研究对象,在其基础饲料中添加了丁酸,结果证明0—3周饲料中添加丁酸的试验组相比于对照组而言,肉鸭日增长质量提升了9.15%与9.46%;在饲料中添加丁酸能够有效降低肉鸭粪便中的TN、TP、氨氮、有机质、Cu以及Zn含量,从而证明丁酸能够有效促进肉鸭生长,并减少肉鸭粪便中的污染物,且不同添加量对于肉鸭的生长、减排效果影响不同。

  • 标签: 丁酸钠 肉鸭养殖 粪便污染物 减排效果 优化措施
  • 简介:摘要目的通过观察高浓度丁酸(sodium butyrate,NaB)(5 mmol/L,8 mmol/L)对单层Caco-2细胞肠屏障模型的作用,及该过程中对NF-κB通路的影响,旨在探讨高浓度NaB破坏单层Caco-2细胞肠屏障模型的可能分子机制。方法使用不同浓度的NaB及雷公藤甲素(triptolide,TP)(特异性抑制NF-κB)50 nmol/L作用体外培养的Caco-2细胞及单层Caco-2细胞肠屏障模型,按照作用的试剂和浓度分为0 mmol/L NaB(对照组)、50 nmol/L TP组(TP组)、2 mmol/L NaB组(NaB Ⅰ组)、5 mmol/L NaB(NaB Ⅱ组)、8 mmol/L NaB(NaB Ⅲ组)、5 mmol/L NaB+50 nmol/L TP组(NaB+TP组)。测定单层Caco-2细胞肠屏障模型的跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance,TER)及菊粉-FITC(inulin-FITC)的通透性;用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)及蛋白质印迹法检测各组IL-1β和TNF-α的mRNA及蛋白水平;用核质分离试验检测p65蛋白入核水平的变化。结果①高浓度NaB(5 mmol/L、8 mmol/L)作用于单层Caco-2细胞肠模型72 h后,与对照组相比,TER显著下降,inulin-FITC通透性显著升高;如5 mmol/L NaB作用于单层Caco-2细胞肠屏障72 h,TER降低至(106.33±4.04)(Ω×cm2),inulin-FITC的通透性升高至(12.52±1.82)%,与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);而使用50 nmol/L TP特异性抑制NF-κB后,其TER升高至(398.33±3.06)(Ω×cm2),inulin-FITC的通透性降低至(7.24±0.25)%,差异具有统计学意义(P<0.05),提示5 mmol/L NaB对肠屏障的破坏作用被显著抑制;②高浓度NaB(5 mmol/L、8 mmol/L)作用Caco-2细胞72 h,IL-1β和TNF-α mRNA及蛋白的表达水平较对照组显著提高,且p65蛋白入核水平也显著提高,差异具有统计学意义(P<0.05);③在5 mmol/L NaB的基础上,使用TP抑制NF-κB后,可显著抑制高浓度NaB诱导IκB-α的磷酸化及p65蛋白入核,并显著降低IL-1β与TNF-α的表达水平。结论高浓度NaB可破坏肠屏障功能,其机制可能与活化NF-κB通路,促进炎症因子释放相关。

  • 标签: 肠黏膜 丁酸钠 NF-κB炎症信号通路
  • 简介:目的:探索芳香酶基因乳腺癌相关启动子特异性阻滞剂定点抑制肿瘤局部组织原位雌激素合成的可能性。方法:从乳腺癌标本中获取原代脂肪成纤维细胞进行培养,加入乳腺癌细胞MCF-7的条件培养液,作为芳香酶肿瘤相关性启动子(PI1,PI3)激活的研究细胞模型。用启动子特异性逆转录PCR、芳香酶活性检测等方法观察抗组蛋白乙酰化酶(HDAC)抑制剂丁酸(NaBu)对PI1,PI3活性的影响。结果:NaBu特异性抑制PI1,PI3基础和诱导水平转录本,但对另一种芳香酶启动子P14的表达无明显影响。其机制在于抑制PI1,PI的转录。结论:NaBu在乳腺癌治疗中具有潜在的临床价值,进一步研究丁酸的分子效应靶点,将为了解乳腺癌发病的关键环节提供良好的切入点。

  • 标签: HDAC抑制剂 丁酸钠 芳香酶 肿瘤相关性启动子 乳腺癌 肿瘤
  • 简介:摘要目的评价过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)/NF-κB信号通路在丁酸减轻小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用。方法SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠32只,7~9周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(IIR组)、丁酸组(NaB组)和PPARγ抑制剂GW9662组(GW9662组)。采用夹闭肠系膜上动脉根部45 min后恢复灌注2 h的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型。GW9662组于缺血前1 h腹腔注射GW9662 2 mg/kg,NaB组和GW9662组于缺血前30 min腹腔注射丁酸500 mg/kg。于再灌注2 h时,心脏穿刺采集血标本,然后处死小鼠,取肠组织,光镜下观察肠黏膜损伤情况并行Chiu评分;采用ELISA法检测血清和小肠组织二胺氧化酶(DAO)、IL-6及TNF-α水平;采用Western blot法检测小肠组织PPARγ和NF-κB p65的表达水平。结果与Sham组比较,IIR组Chiu评分升高,血清和小肠组织DAO、TNF-α、IL-6水平升高,PPARγ表达下调,NF-κB p65表达上调(P<0.05);与IIR组比较,NaB组小鼠Chiu评分、血清和小肠组织DAO、TNF-α、IL-6水平降低,PPARγ表达上调,NaB组及GW9662组NF-κB p65表达下调(P<0.05);与NaB组比较,GW9662组Chiu评分、血清和小肠组织DAO、TNF-α、IL-6水平升高,PPARγ表达下调,NF-κB p65表达上调(P<0.05)。结论丁酸减轻肠缺血再灌注损伤的机制可能与激活PPARγ/NF-κB信号通路,抑制炎症反应有关。

  • 标签: 丁酸盐类 再灌注损伤 过氧化物酶体增殖物激活受体 NF-κB
  • 简介:摘要目的探讨丁酸(NaB)是否通过组蛋白丁酰化修饰改善糖尿病肾脏病(DKD)炎症和纤维化。方法无特定病原体(SPF)级C57BL/6雄性小鼠24只,8周龄、16~17 g。采用随机数字表法将其分为正常对照组(NC组)、高脂饮食联合链脲佐菌素(50 mg/kg)复制的DKD模型组(DKD组)、NaB溶液(每48小时40 mg/kg)腹腔注射干预组(DKD+NaB组),每组8只。体外培养肾系膜细胞,分为正常葡萄糖(NG)组(5.56 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)、HG+NaB组(30 mmol/L葡萄糖和1 mmol/L NaB)、HG+NaB+乙酰转移酶活性转录共激活因子(P300)抑制剂(A485)组(30 mmol/L葡萄糖、1 mmol/L NaB和10 μmol/L A485)。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清炎症因子[单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-6(IL-6)]水平,及尿微量白蛋白和尿肌酐,并计算尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR),采用Western blotting法检测各组小鼠肾脏组织和肾系膜细胞IL-6、MCP-1和转化生长因子-β(TGF-β)、泛丁酰化、H3K9丁酰化的蛋白表达水平,采用qRT-PCR检测各组小鼠肾脏组织和肾系膜细胞TGF-β、纤连蛋白(Fn)、P300的mRNA表达水平。采用HE、Masson染色观察小鼠肾脏组织硬化及纤维化程度。采用单因素方差分析进行组间比较。结果体内实验结果表明,与DKD组比较,DKD+NaB组小鼠UACR、血清IL-6、MCP-1水平均下降,肾脏组织的TGF-β和Fn的蛋白、mRNA表达均下降,泛丁酰化修饰、H3K9丁酰化修饰以及P300的蛋白、mRNA表达均明显上调(均P<0.05);HE、Masson染色显示,小鼠肾脏组织硬化及纤维化程度改善。体外实验结果表明,NaB呈浓度依赖性上调肾系膜细胞泛丁酰化和H3K9丁酰化修饰水平;与HG组比较,HG+NaB组肾系膜细胞泛丁酰化和H3K9丁酰化修饰均明显上调,IL-6和TGF-β的蛋白表达均下调;与HG+NaB组相比,HG+NaB+A485组的肾系膜细胞泛丁酰化和H3K9丁酰化修饰均下调,MCP-1、IL-6的蛋白、TGF-β的蛋白及mRNA、Fn的mRNA表达均上调(均P<0.05)。结论NaB可能通过组蛋白丁酰化修饰途径,抑制肾脏炎症及纤维化基因表达,改善DKD肾脏损伤。

  • 标签: 糖尿病肾脏病 丁酸钠 组蛋白丁酰化 炎症 纤维化
  • 简介:目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸(sodiumbutyrate)和DNA甲基化抑制剂5-aza对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化的影响。方法常规培养大鼠BMSCs,细胞分为4组:依次加入丁酸0mM,0.5mM,1.0raM,2.0mM。MTT和流式细胞仪检测不同浓度丁酸对细胞增殖和凋亡的影响。4周后利用westernblot和免疫荧光检测4组细胞的心肌细胞特异性蛋白的表达。从上述4组中选出诱导能力最强的丁酸组与5-aza组成4个实验组:阴性对照组,5-aza组,丁酸组,5-aza.L丁酸组。作用4周后检测心肌细胞特异性蛋白的表达。结果丁酸抑制细胞增殖,具有浓度依赖性,而对细胞凋亡没有明显影响。检测发现丁酸和5-a.za均能有效诱导BMSCs分化为心肌细胞,丁酸诱导分化最适浓度为1.0mM。同时1.0mM丁酸诱导分化效率高于5-aza。除此,5-aza和丁酸共同作用于BMSCs,其诱导分化能力明显高于其它组。结论丁酸能够有效诱导BMSCs向心肌细胞分化,丁酸浓度为1.0mM时诱导能力最强,同时诱导分化率高于5-aza。5-aza和丁酸一起作用诱导BMSCs向心肌细胞分化的能力明显高于其它组,间接证明DNA去甲基化和组蛋白乙酰化具有协同作用。丁酸在有效作用浓度范围内,虽然抑制BMSCs增殖,但是不影响细胞凋亡,表明丁酸具有低毒的特性,为以后丁酸应用于临床打下实验基础。

  • 标签: 丁酸钠 5-AZA 骨髓间充质干细胞 心肌细胞
  • 简介:目的探讨丁酸氢化可的松软膏中氢化可的松含量的测定方法。方法采用HPLC法进行含量测定(岛津CIS—ODS柱.(150mm×4.6mm,5μm)。流动相为甲醇:水:乙醚(62:38:2)。流速1.0ml/min。检测波长240nm。结果在30~450μg/L浓度范围内呈良好线性关系,r=0.9993。平均回收率为99.89G(RSD为0.54)。结论HPLC法测定丁酸氢化可的松软膏中的丁酸氢化可的松含量。方法简便、快速、准确。对药品的质量控制有重要意义。

  • 标签: 丁酸氢化可的松软膏 HPLC法 含量测定