简介:使用含512个已知水稻基因3'表达序列标签的cDNA微阵列检测了萌发期水稻幼苗的基因表达谱.313个基因产生了可靠的杂交信号.其中,天冬氨酸氨基转移酶基因和4个具有核糖体功能的基因表达丰度非常高,表明萌发期幼苗中的氨基酸和蛋白质的合成代谢很活跃.β-1,3-葡聚糖酶基因是一种典型的病程相关基因,该基因的高水平表达,表明幼苗中存在着一种高度发育的抗病机制.实验也发现编码一种重要的抑制细胞凋亡的基因-Baxinhibitor-1,在幼苗中的表达丰度很高;该结果可解释为什么正常的幼苗中很少发生细胞程序性死亡现象.实验所测定的大量基因的表达丰度有助于从基因组转录水平理解萌发幼苗的生理特点.
简介:综述几种DNA分子标记技术:RFLP是用限制性内切酶切割不同个体基因组DNA后,含同源序列的酶切片段在长度上的差异,可靠性较高、但操作烦琐,信息含量低;染色体原位杂交是利用特异性核酸片段作探针,直接同染色体DNA片段杂交,在染色体上显示特异DNA,准确、直观,但技术非常复杂;PCR是模仿DNA在生物体内的自然复制过程来扩增DNA片段,安全性好,快速易行;RAPD是以人工合成的碱基顺序随机排列的寡核苷酸单链为引物,对所研究的基因组DNA进行PCR扩增,产生多态性的RAPD片段,可以检测多个基因位点,但不能识别杂合子位点;AFLP指纹技术是在RFLP与RAPD两种指纹技术基础上建立和发展起来的,有较高的稳定性,但对基因组纯度和反应条件要求较高;DNA芯片技术是一种以杂交测序基本理论为基础的新型生物技术,用于测序、基因表达、疾病诊断等,但造价、探针的密度与纯度还有待完善;小卫星DNA一般与RFLP技术结合以获得小卫星DNA指纹图谱,信息含量高,但它在染色体上分布不均匀;微卫星DNA既可用作探针获得指纹图谱,也可通过PCR方法进行微卫星位点多态性分析,但工作量大;ISSR即内部简单重复序列,也是一种新兴的分子标记技术,具有很好的稳定性和多态性.
简介:Linkerswereassembledonaglasssurfacebasedonthehydrolysisandcondensationof3-glycidoxy-propyltrimethoxysilane(GPS).AftertheassemblyofGPS,fourapproachesweretriedtoopentheendingepoxidegroupofGPSortofurtherelongatethelinkers.TheeffectoftheseapproachesonDNAinsitusynthesisandhybridizationwasinvestigated.Forthespacingofthesynthesisinitiationsites,thewettabilityofthesupportandthelengthofthelinkinggroupthatattachestheinitiationsitetothesurfacehavedirectinfluencesontheyieldofcouplingreactionsandthesubsequenthybridizationevents.X-rayphotoelectronspectroscopy(XPS)andmeancontactanglesofdeionizedwateroftheaboveslidesweremeasuredtoassessthelinker'scharacteristicsineachprocedure.Itwasprovedthattheglassslidesweresuccessfullymodifiedandbecameexcellentsupportsfortheoligonucleotidessynthesis.Inaddition,itprovedbestfortheinsituoligonueleotidessynthesisthataglassslidewasinturntreatedwithethylenediamine,glutaradehyde,ethanolamineandsodiumborohydridesolutionatambienttemperatureaftersilanizedwithGPS.