简介:以分离筛选、鉴定的假单胞菌为研究材料,提取假单胞菌的基因组为模板基因.设计引物进行PCR扩增。扩增的条件为94℃预变性4min,98℃变性10S,58℃退火1min,72℃延伸2min,35个循环,72℃复性10min。用试剂盒回收PCR产物,以PGEM—TEasyVector为载体。产生重组质粒,转化到大肠杆菌(E’coli)JM109细胞中,于LB平板上进行蓝白筛选阳性克隆。提取阳性克隆的质粒,电泳筛选滞后质粒,EcoRⅠ酶切验证后进行测序,检测弹性蛋白酶基因在JM109Ecoli细胞中的表达。结果表明:PCR扩增出1,67kh的基因片段。并成功克隆在EcoliJM109细胞中:挑取白斑提取的质粒,检测有滞后质粒,EcoRⅠ酶切检测到3.0kh的载体和1,67kb的基因片段;以滞后质粒为模板再次进行PCR扩增,扩增出1.67kb基因片段。证明该质粒为重组质粒,经上海博亚生物技术公司测序为1.67kh的基因片段。并在EcoliJM109细胞中表达。
简介:原花青素的抗氧化活性与聚合度有很大的关系,高聚体的抗氧化活性不及低聚体,且难以被人体吸收利用。将高聚体水解成活性更高的低聚体或单体,可以充分利用天然植物资源。葡萄籽原花青素粗提液用AB-8大孔树脂吸附纯化,以不同浓度乙醇溶液梯度洗脱,采用亚硫酸作为酸介质将乙醇浓度为33%、35%、37%、39%、41%的洗脱液原花青素高聚体水解。以平均聚合度、自由基清除率和VC当量浓度为指标对原花青素高聚体水解效果进行评价,并检测水解产物中副产物,讨论了水解过程机理与酸介质影响。水解后原花青素的平均聚合度显著降低,抗氧化活性提高。用分光光度法定性检测,产物中没有副产物生成。水解液进行分级分离,表明水解产物主要为低聚体。
简介:菲律宾稻米研究所和STRIVE基金会的研究显示,该国大多数消费者有可能接受转基因稻米。研究所所长宣称多数农民渴望尝试新的水稻品种,希望藉此降低成本及害虫带来的损失。由菲国生技公司DA—BPO(theDABiotechnologyProgramOffice)提供经费的三合一稻研究,目前已有所进展。专家们认为2011年,菲律宾的转基因水稻将首次通过所有管控,展开商业推广。三合一稻的育种目标,不仅把β-胡萝卜素转入地方品种,还通过传统育种技术将抗水稻衰退杆状病毒及抗白叶枯病的基因一起转移到稻米中。三合一稻被视为转基因稻米是因其父母本之一的黄金米含有β-胡萝卜素,而β-胡萝卜素由其它植物的基因转殖进入。