简介:摘要:本文主要目的是建立一种猪潜能扩展干细胞(pEPSC)的培育方法。方法:收集D3.5天的猪体内受精胚胎,将获取的猪8-细胞胚胎在定植在STO饲养层上,用含 20%血清替代物, 1×MEM NEAA, 0.1 mM β-巯基乙醇, 103 U human LIF,1.0 μM PD0325901, 3.0 μM CHIR99021, 4.0 μM JNK Inhibitor VIII, 10.0 μM SB203580,5.0 μM XAV939以及100 U/ mL青 链霉素及 2. 5 μg / mL 两性霉素 B 的DMEM/F-12培养基培养,倒置相差显微镜下观察细胞形态及增殖状,免疫荧光技术检测标志物OCT4、SOX2、NANOG的表达水平。结果:成功获得可长期传代pEPSC细胞系,克隆呈现大而扁平圆形,边缘光滑,细胞群落密集,pEPSC中OCT4、SOX2、NANOG均高表达。
简介:摘要:目的:探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体进行提取鉴定和蛋白组学。方法:培养人脐带间充质干细胞并采用超滤序贯超离法提取外泌体,通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、蛋白质定量、蛋白质印迹法及蛋白组学分析等技术鉴定。结果①所抽取的外泌体分散度比较好,而且均匀。②,外泌体粒径分布的高峰为(129.5+8.7) nm,它的膜表面是带有负电荷的,其浓度为8.375>109颗粒/ml,平均 zeta电位为(-28.1+3.6) mV。③ 外泌体中存在着一类特殊的膜蛋白,即CD9,CD63等。④蛋白质组学研究发现外泌体中的大部分蛋白都具有较高的活性,它们涉及到 RNA剪接、 mRNA加工、蛋白质折叠等生物学过程,涉及到 RNA/DNA等基因材料的合成、加工、降解等过程。结论:经研究发现,人脐带间充质干细胞外泌体与其母系细胞存在某种“同质”、“差别”,且这些“差别”的蛋白质功能与其自身的免疫学特性都不相关,从而证实人脐带间充质干细胞外泌体具有较小的免疫学活性及较高的安全性。
简介:摘要:本文从专利统计角度分析了该项技术所处的生命周期,并介绍了从库尔特计数器的诞生到各时期重点技术,包括脉冲分析判据、液力聚焦、细胞电泳技术、微流控技术、激光检测技术融入等,这些技术使流式细胞计数检测实现了轻小化,自动化,智能化,目前多面技术融合高精度流式细胞计数器及搭载自动识别分析系统的流式细胞计数器已成为新的研究热点方向。
简介:摘要:肿瘤免疫治疗开启了癌症治疗的新纪元,其中CAR-T免疫细胞疗法成为了肿瘤免疫治疗的热点领域。本文从全球及中国角度对CAR-T细胞治疗领域的关键技术CAR-T细胞制备进行研究,从技术发展趋势、技术发展路线两方面对CAR-T的制备相关技术的主要分支领域进行深入研究。
简介:摘要:以检索的CAR-T细胞疗法的关键技术——安全性控制的国内外专利为基础,对该领域的技术发展趋势和主要申请人进行了梳理,旨在为该领域的研发提供参考。