简介：目的构建分泌表达具有生物学活性的重组人胰岛新生相关蛋白（rhINGAP）载体毕赤酵母。方法通过PCR扩增INGAP基因，插入到重组质粒α,／pUC18的α因子信号序列处，再将融合基因αINGAP重组到表达质粒pPIC9K，SalI酶切线性化重组质粒αINGAP／pPIC9K。电穿孔转化毕赤酵母，营养缺陷型培养基MD和G418筛选含高拷贝表达盒的酵母转化子，PCR鉴定是否含有目的基因INGAP，甲醇诱导rhINGAP的表达，Westernblotting鉴定目的蛋白，ELISA法定量测定其含量。结果重组表达质粒αINGAP／pPIC9K经酶切获得758bp片段，符合α因子与INGAP片段融合的长度，筛选得到3个阳性转化子，培养上清含有与抗INGAP抗体反应的蛋白。结论成功构建了分泌INGAP蛋白的毕赤酵母菌株。

简介：目的构建含Sonichedgehog（SHH）蛋白N端基因片段的毕赤酵母表达载体。方法通过BamH1、Xho1双酶切、T4连接酶连接，将SHH-N基因片段插入pET22b原核表达载体，构建pET22b-SHH-N质粒；经PCR扩增，产物再与pTA2载体连接，构建pTA2-SHH-N重组质粒；经EcoR1及Not1双酶切、T4连接酶连接，将SHH—N端基因片段插入pPIC9K质粒，构建pPIC9K-SHH-N重组质粒；通过线性化、脱磷酸化，将线性化pPIC9K-SHH-NDNA转染毕赤酵母菌株GS115，最后经PCR扩增和测序鉴定。结果转染的毕赤酵母经PCR扩增和测序证实含有SHH-N基因片段，与原始的基因片段序列完全一致。结论成功地构建含SHH-N蛋白基因片段的毕赤酵母表达载体。

简介：目的探讨超声引导下经腋静脉置入输液港在乳腺癌化疗患者中的应用及并发症处理。方法采用方便抽样方法．对重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科2016年9月至2017年1月的50例经腋静脉植入输液港的乳腺癌化疗患者进行分析研究。结果经超声引导下经腋静脉置入输液港穿刺置管成功率为98％（49／50）：手术时间（26±4）min。穿刺次数≤2次为96％（48／50）。术中常见并发症包括气胸发生率为0％（0／50）和误穿动脉发生率为4％（2／50），导管异位发生率为2％（1／50），术中出血2％（1／50）。术后远期并发症包括夹闭综合征发生率0％（0／50），血栓发生率2％（1／50），感染发生率为2％（1／50），导管脱落发生率0％（0／50）。结论植入式静脉输液港是临床需长期静脉输液的常用技术，经超声引导下腋静脉穿刺植入为一项安全、有效、并发症发生率相对较低的技术，有利于临床的开展。

简介：目的：比较植入式静脉输液港（venousportaccess，VPA）与外周静脉穿刺中心静脉置管（periph-erallyinsertedcentralcatheter，PICC）在乳腺癌患者化疗中的应用效果，为临床选用提供参考依据。方法根据入院时间的不同将2009年1月至2010年12月南京军区福州总医院120例乳腺癌分为2组，每组60例，分别给予VPA和PICC，比较2组的置管成功率、留管时间、相关并发症。结果一次性置管成功率：VAP组为100％，PICC组为66.7％；留管1年以上：VAP组为59例，PICC组4例；并发症：VAP组为1例，PICC组9例。结论VPA是乳腺癌静脉化疗的理想通道，可减轻护理工作。