简介：

简介：目的：建立前列腺特异膜抗原（PSM）检测方法。方法：利用异硫氰酸胍/酚/氯仿/异戊醇一步法从前列腺癌患者外周血有核细胞或前列腺癌组织中提取总RNA。用AMV逆转录合成PSMcDNA后进行巢式PCR扩增。并对试验中各种因素进行了严格地筛选和调整，找出了最佳反应条件。结果：在PCR反应体系中投入总RNA量相当于1-100个癌细胞所含总RNA量时，均能得到清晰的262bp的产物带。结论：本方法具有良好的稳定性和极高的灵敏度。为早期预示前列腺癌转移、复发和疗效观察提供了技术手段。

简介：目的：用荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）法准确地定是检验血清中乙型肝炎病毒（HBV）的数量和免疫指标，以指导临床。方法：采用HBV－DVAFQ－PCR诊断试剂盒，以一种完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术组合所产生的实时检验定量PCR方法，检测了58例临床血清标本。结果：经FQ－PCR检测，9例HBV的HBsAg、HBeAg、HBcAg、HBcAb都阳性标本，其HBV－DNA的阳性率为100％，平均HBV－DNA拷贝数为2．0×10^8/ml；16例HBsAg、HBeAb、HBcAb都阳性的标本，其阳性率为62．5％（10例），平均拷贝数为5．2×10^5/ml，而常规PCR只有33％的阳性率；7例HBsAb、HBeAb、HBcAb都阳性的标本，其阳性率为14．3％（1例），平均拷贝数为4．7×10^3ml。结论：HBV－DNA的FQ－PCR检测较常规PCR更具有较高的灵敏度和特异性，且定量准确，结果可靠，能够避免PCR后处理导致物假阳性污染，可以真实反映HBV的感染和低复制状态，对于乙型肝炎的临床诊断，治病方案的选择和疗效观察有较大的指导意义。

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简介：目的：构建压电基因传感器阵列检测系统。方法：首先利用精细微加工法制作单个传感器，在此基础上先后构建了粘胶式以及夹具式2×5型传感器阵列。并自行开发研制自激式振荡电路、PESAV2.0版频率记录分析软件。将它们与计算机联用以构建传感器阵列检测系统。结果：成功地制造出了在气、液相中稳定振荡的单个传感器，构建的粘接式及夹具式传感器阵列各有其优缺点；自激式振荡电路有非常强的振荡能力，在液相中起振非常容易，其频率稳定度也可达实用要求。PESAV2.0版频率记录分析软件具有自行设置各初始参数，实时记录频率变化、自动绘制频率变化趋势图及分析结果等多项功能。结论：成功地构建了传感器阵列检测系统，搭建起一个基因检测的技术平台，为临床上病原性微生物的检测以及多种疾病的早期诊断提供一种新方法。

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简介：目的：探讨不同保存条件对血液酒精浓度（BAC）的影响。方法：测定三种真空分离胶试管的空白BAC值。观测不同保存状态（室温密封3天、一周；4℃密封一周；室温敞开1h、2h）下的BAC变化情况。结果：三种分离胶试管空白BAC值（mg／ml）分别为：0．03±0．02，0．27±0．11，0．05±0．02。室温密封3天，一周，4℃密封一周及室温敞开1h的BAC值变化无统计学意义，室温敞开2h的BAC值则明显下降。结论：BAC测定标本保存应密封，尽量避免使用带分离胶的真空管，全血标本密封4℃或室温保存一周不影响BAC的检测。

简介：目的：进一步了解乙肝产妇的母乳中HBVDNA含量及其传染性，更好地指导母乳喂养。方法：利用荧光定时定量PCR检测技术，对45例乙肝血清学阳性的产妇进行血浆及乳汁中HBVDNA的定量检测。结果：45例产妇血浆和乳汁中HBVDNA的检出率分别为73%（33、45）和67%（30、45），其HBVDNA含量的对数值具有良好的相关性，（r=0.837，n=45，P<0.01），HBeAg（+）与HBeAb(+）两组间比较血浆及乳汁HBVDNA的含量，两者存在显著性差异（P<0.01）。HBeAg(+）组含量高于HBeAb（+）组。结论：乳汁和血浆中HBVDNA含量具有较好的相关性，血浆中HBVDNA高拷贝的产妇最好不要进行母乳喂养。产妇血浆中HBeAg与乳汁及血浆中HBVDNA含量都具有明显关系，它的存在提示血浆及乳汁中的HBVDNA含量较高。

简介：目的了解海洋微生物的最适生长条件，为海洋微生物监测提供有力保障。方法用无菌海水采样器采集海水，每份225ml分别加入含有25ml10×碱性蛋白胨水、5×碱性蛋白胨水、原液碱性蛋白胨水、嗜盐菌增菌液、RVS增菌肉汤、营养肉汤六种增菌液，经摄氏18℃、25℃、35℃增菌培养，每6小时为一个时间段，观察细菌生长情况，并挑取表面培养物接种于相应平板，TCBS平板、血平板、SS平板(SS平板配制采用海水和蒸馏水两种溶剂做对比)，并置相应温度下培养6h、12h、18h、24h、36h，在相应时间内长出细菌的分别挑取纯菌落进行鉴定。结果最适合海洋菌生长的温度为摄氏35℃；增菌时间为6—12小时；培养时间为12-24小时；在各种稀释度碱性蛋白胨水中以10×碱性蛋白胨水增菌效果较为理想，且用海水配制的培养基较蒸馏水生长条件好。结论海水中微生物具有嗜盐性，在摄氏35℃下，适宜的含盐培养基有利于海洋菌的生长。

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简介：目的：评价腹水生化指标在腹水鉴别中的诊断效率，探讨单项及组合指标的临床应用价值。方法：测定64例腹水患者，其中恶性腹水者30例，非恶性腹水者34例，用受试者工作特征曲线（ROC）评价腹水总蛋白（TP）、乳酸脱氢酶（LD）、胆固醇（TC）、白蛋白（ALB）、纤维连接蛋白（FN）、糖（GLU）等，指标敏感度和特异度，分析联合检测的诊断效率。结果：单项检测TP、LD、TC、ALB、FN、GLU的敏感度分别为96．7％、90．0％、90．0％、93．3％、90．0％、73.3％；特异度为85．3％、88．2％、88．2％、82.4％、88．2％、79.4％；ROC曲线下面积为0．93、0．93、0．92、0．89、0．85、0．80。2项联合检测（FN与LD或LD与TC）的敏感度、特异度、阳性似然比、诊断准确度分别为89.3％、90％、9．5、90．6％。而FN、TC、LD与TP组合敏感度和特异度分别为86．7％和93.3％，但阳性似然比却都降为7．7。3项联合检测（FN、LD、TC）敏感度、特异度、阳性似然比、诊断准确度分别为83．3％、85.3％、13．8、91．5％。结论：检测腹水TP、LD、TC、ALB和FN对于鉴别良恶件腹水且一定诊断价值．名项指标联合检测．尤其FN、LD、TC3项指标联合．可明显提高诊断效率。

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简介：目的研究ELISA法定量测定钙调素(CaM)的最优条件。方法用重组人CaM、免抗CaM，通过对聚苯乙烯反应板进行紫外辐照处理，改善抗原因相化条件；通过对抗原包被液、包被时间等条件优化，建立简便、快速、准确的ELISA定量技术。结果以pH7．40．01mol/L的PB为包被液，包被及后续封闭时间为4℃静置72h，CaM包被浓度为5-8g/ml，抗原抗体反应时间为37℃60min，可获最佳CaM定量结果。结论建立的检测CaM的ELISA测定方法，敏感性、重复性均在临床检测可接受的范围内，标准曲线的线性也较好，可用于细胞内外CaM的定量研究。

简介：目的：建立一种灵敏度高、特异性好、精密度高、操作简便的荧光实时定量PCR技术，对临床标本中的TTVDNA进行定量检测。方法：设计针对TTV基因保守序列非转录区(UTR)的一对引物和一条荧光基团双标记探针。将PCR扩增所得的产物片段与PUCm—T载体连接并进行克隆，提取重组质粒以极限稀释法进行定量，作为定量检测的标准品。通过对重组质粒的测序来验证方法的特异性。通过与套式PCR—ELISA方法阳性检出率的比较，显示本方法学的高灵敏度。在临床研究中，通过对36例丙肝患者及123例不同血清标志物阳性的乙肝患者，166例健康体检者血清中TTVDNA的定量检测，评估TTVDNA在不同人群中检出阳性率的差异显著性。此外还观察了乙肝患者不同血清ALT水平组别TTVDNA阳性检出率的差别。结果：本方法检测TTV—DNA的灵敏度高于基于ORFl的普通套式PCR—ELISA方法，重组质粒测序结果显示方法有很好的特异性；通过重组质粒标本梯度稀释检测显示该方法的线性范围为10^2-7拷贝／ml；批间CV为13．2—16．0％，批内CV为6．5．0—11．3％。健康体检者、丙肝患者、乙肝患者三组人群的血清TTVDNA定量结果分别为10^4.11±0.97、10^3.91±1.07、10^3.89±0.99拷贝／ml；三组人群TTVDNA阳性检出率无差异显著性；且乙肝患者(TTVDNA+)血清ALT水平与TTVDNA载量无相关显著性(P>0．1)；乙肝患者血清ALT异常与正常两组TTVDNA阳性检出率无差异显著性(P>0．1)。结论：本方法操作简单、灵敏度高、特异性好、结果数据化，适合于临床实验室进行临床标本的TTV—DNA定量检测。

简介：目的：摸索及优化肽核酸（PNA）石英谐振式基因传感器（QOGS）阵列的检测条件。方法：设计针对HBV的bis-PNA探针，将其固定在QOGS阵列表面，具体摸索了bis-PNA探针与HBV基因组DNA杂交时的最佳pH值、最佳离子浓度、最佳探针固定量。结果：杂交缓冲液pH值为6.8、离子浓度为20mmol/L、探针浓度为1.5μmol/L时杂交条件最为适宜。结论：摸索出了PNA-QOGS阵列反应时的最佳条件，为成功地构建PNA-QOGS阵列检测系统奠定了坚实的基础。

简介：

简介：目的:探讨产AmpC酶菌在医院内的分布情况,为临床经验用药提供依据.方法:采用头孢西丁初筛试验筛选出符合AmpC酶表型筛选条件的菌株共245株,再用三维确诊试验确证产AmpC酶菌株并对其进行分析.结果:1437株革兰阴性杆菌中,筛选出产AmpC酶菌株118株,经三维试验确证阳性检出率为8.2%(118/1437),其中阴沟肠杆菌检出最多为65株,占总确证菌株的55.1%(65/118);其次为鲍曼不动杆菌13株(11.0%).经医院内分布情况分析,检出率高的为ICU、外科、血液科,分别为19.5%、14.4%、14.4%.标本种类分析检出率最高为痰液57.6%.结论:产AmpC酶菌已成为医院感染的重要病原菌,且以阴沟肠杆菌为主,以第三代头孢菌素使用率高的ICU、外科、血液科分布最广,以下呼吸道最易感染,临床医师应引起高度重视.

简介：目的建立SARS冠状病毒的RT—PCR核酸检测方法。方法合成针对SARS冠状病毒特异性引物，从SARS病人及疑似病人标本中提取RNA，经反转录和巢氏PCR扩增出相应大小的DNA片段。对这些片段克隆后进行DNA序列分析，并将序列与SARS冠状病毒和其它已知冠状病毒进行同源性分析。结果从SARS病人痰、咽拭子或血液标本中得到多例RT—PCR阳性片段，其中8个片段经克隆和DNA序列分析证实为SARS冠状病毒序列(同源性100％)，而所有参照标本RT—PCR均为阴性。结论该方法可用于SARS冠状病毒的RT—PCR核酸检测。