简介：摘要目的应用无血清培养基分离U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞，并鉴定相关肿瘤标志物表达。方法体外培养人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞，免疫荧光检测U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞球中CD105表达。采用免疫印迹法检测人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞Nanog和Oct4蛋白表达。采用半定量PCR检测人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞SOX2、Nanog和Oct4mRNA的表达。结果荧光显微镜下可见，U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞球中部分细胞CD105呈阳性表达。免疫印迹检测结果显示人骨肉瘤U2OS细胞株的Nanog和Oct4蛋白相对表达量为0.853±0.404和0.603±0.153，均明显低于U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞0.973±0.305和0.827±0.322（均p<0.05）。半定量PCR检测结果显示U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞SOX2、Nanog和Oct4mRNA的相对表达量为0.190±0.027、0.178±0.025、0.170±0.021，均明显高于人骨肉瘤U2OS细胞株0.032±0.009、0.086±0.016、0.019±0.006（均p<0.05）。结论人骨肉瘤U2OS细胞株中存在肿瘤干细胞，无血清培养可用于分离培养人骨肉瘤肿瘤干细胞。
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