简介:摘要目的观察沉默同源异型盒基因2(Prrx2)表达后对乳腺癌紫杉醇化疗敏感性的影响及相关机制。方法选取Prrx2表达较高的MCF-7和MDA-MB-231细胞作为研究对象,构建稳定沉默Prrx2表达的细胞株。采用不同浓度的紫杉醇作用于癌细胞,分析肿瘤细胞增殖、克隆形成和半数抑制浓度(IC50)变化。构建裸鼠移植瘤模型,分析沉默Prrx2表达后紫杉醇对移植瘤生长的影响。RT-PCR检测凋亡相关基因的变化。结果沉默Prrx2表达后MCF-7、MDA-MB-231细胞紫杉醇IC50明显降低,并提高紫杉醇对裸鼠移植瘤生长抑制作用。沉默Prrx2表达后促进紫杉醇诱导的癌细胞凋亡,可能与Bcl-2、Bax表达异常有关。蛋白检测发现沉默Prrx2表达下调β-catenin在乳腺癌细胞核中的表达,抑制Wnt/βcatenin信号通路的活性。结论沉默Prrx2表达后增强乳腺癌细胞对紫杉醇化疗敏感性,可能与下调Wnt/β-catenin信号通路活性有关。
简介:摘要目的初步探讨长链非编码核仁小分子RNA宿主基因1(SNHG1)对RA-成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的影响及可能的机制。方法组织块培养法培养RA和创伤患者FLS,用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测二者SNHG1的表达情况;在RA-FLS中,用小干扰RNA(siRNA)沉默SNHG1表达后,CCK-8法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期分布,蛋白质印迹法检测周期蛋白(cyclin)D1的表达情况;2组样本比较用独立样本t检验,多组样本间比较采用单因素方差分析。结果与创伤患者FLS相比,RA-FLS中SNHG1表达上调[(2.13±0.55)与(1.00±0.01)](t=-5.87,P=0.004);在RA-FLS中,沉默SNHG1表达后,与阴性对照相比,SNHG1-siRNA处理组细胞增殖活力下调[(0.930±0.033)与(0.759±0.027)](t=6.879,P=0.002),G2/M+S期细胞所占比例下调[(28.2±1.5)%与(9.7±2.6)%](t=10.715,P<0.01),cyclinD1蛋白表达下调(t=6.168,P=0.004)。结论RA患者滑膜细胞中SNHG1的表达增高,SNHG1可能通过影响cyclinD1蛋白表达参与FLS增殖调控,从而促进滑膜增生。