简介：摘要对于神经系统疾病的治疗，血脑屏障一直是药物输送的一大障碍。外泌体是由多种类型细胞分泌的天然膜囊泡，在细胞间的信息交流中发挥着重要作用。因具有生物相容性好、免疫原性低、天然稳定性好和能够穿越血脑屏障等优势，外泌体作为药物递送载体尤其是在脑靶向递送药物方面独具优势。文章简要介绍了外泌体的功能特征、载药方式，重点总结归纳了近年来不同细胞来源的外泌体在脑靶向药物递送技术方面的研究进展，及其在中枢神经系统疾病治疗中的应用，以期更好地为外泌体脑靶向药物递送系统的开发提供新的思路。

简介：摘要目的评价核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路在硫化氢(H2S)抑制脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠脑组织炎症反应中的作用。方法野生型C57BL/6J小鼠54只，Nrf2-/-C57BL/6J小鼠36只，体重20～25 g，采用随机数字表法分为5组(n＝18)：野生型假手术组(野生型Sham组)、野生型SAE组、野生型SAE＋NaHS组、Nrf2-/-SAE组和Nrf2-/-SAE＋NaHS组。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备小鼠SAE模型，于模型制备成功后3 h时腹腔注射NaHS 50 μmol/kg。于CLP后24 h时处死小鼠取脑组织，观察病理学结果，计数存活神经元，计算神经元存活率，采用Western blot法检测NLRP3的表达，采用ELISA法测定TNF-α、IL-1β和IL-6含量，采用流式细胞术检测Iba-1＋CD86＋、Iba-1＋CD206＋和Iba-1＋细胞百分比。结果与野生型Sham组比较，野生型SAE组脑组织NLRP3表达上调，TNF-α、IL-1β、IL-6含量、Iba-1＋CD86＋和Iba-1＋细胞百分比升高，Iba-1＋CD206＋细胞百分比和神经元存活率降低(P<0.05)；与野生型SAE组比较，野生型SAE＋NaHS组脑组织NLRP3表达下调，TNF-α、IL-1β、IL-6含量、Iba-1＋、Iba-1＋CD86＋细胞百分比和神经元存活率降低，Iba-1＋CD206＋细胞百分比升高(P<0.05)；与Nrf2-/-SAE组比较，Nrf2-/-SAE＋NaHS组小鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05)；与野生型SAE＋NaHS组比较，Nrf2-/-SAE＋NaHS组脑组织NLRP3表达上调，Iba-1＋、Iba-1＋CD86＋细胞百分比和TNF-α、IL-1β、IL-6含量升高，Iba-1＋CD206＋细胞百分比和神经元存活率降低(P<0.05)。结论Nrf2信号通路参与了H2S抑制SAE小鼠脑组织炎症反应的过程。

简介：摘要目的评价吸入高浓度氢气对小鼠脓毒症相关性脑病(SAE)的影响。方法健康雄性ICR小鼠200只，6~8周龄，体重20~25 g，采用随机数字表法分为4组(n＝50)：假手术组(Sham组)、SAE组、假手术＋高浓度氢气组(Sham＋H2组)和SAE＋高浓度氢气组(SAE＋H2组)。采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠SAE模型。分别于造模后1和6 h时，Sham＋H2组和SAE＋H2组吸入氢氧混合气体(67%H2-33%O2)1 h，Sham组和SAE组吸入氮氧混合气体(67%N2-33%O2)1 h。记录造模后7 d小鼠生存情况。分别于造模后3、5和7 d时，采用Y迷宫实验评估认知功能。于造模后24 h处死小鼠，取海马组织，行尼氏染色，光镜下观察CA1区病理学结果，计数正常神经元；采用ELISA法检测TNF-α和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的含量，采用荧光分光光度法检测线粒体膜电位(MMP)，采用荧光素-荧光酶发光法检测线粒体ATP含量。结果与Sham组相比，SAE组和SAE＋H2组造模后7 d生存率降低，造模后各时点自发交替百分比降低，海马CA1区正常神经元计数降低，TNF-α和HMGB1含量升高，MMP和ATP含量降低(P<0.05)，Sham＋H2组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。与SAE组相比，SAE＋H2组造模后7 d生存率升高，造模后各时点自发交替百分比升高，海马CA1区正常神经元计数升高，TNF-α和HMGB1含量降低，MMP和ATP含量升高(P<0.05)。结论吸入高浓度氢气可减轻小鼠SAE，其机制可能与减轻海马炎症反应和改善线粒体功能有关。

简介：摘要目的探讨脓毒症相关性脑病（sepsis-associated encephalopathy, SAE）的相关差异表达基因（differentially expressed gene, DEG）和信号转导途径。方法基于基因表达数据库（gene expression omnibus, GEO）的脓毒症患者脑组织的基因组数据，采用基因本体（gene ontology, GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG）富集分析，以及蛋白-蛋白相互作用网络（protein-protein interaction, PPI）分析，确定SAE的DEG。结果DEG在免疫应答、炎症反应、凋亡过程的负调控、蛋白质水解等方面显著富集。通过PPI分析筛选出10个枢纽基因，包括固醇调节元件结合转录因子1（sterol regulatory element binding transcription factor 1, SREBF1）、细胞因子信号转导抑制因子-3（suppressor of cytokine signaling 3, SOCS3）、封闭蛋白5（claudin 5, CLDN5）、免疫球蛋白结构域蛋白4（V-set and immunoglobulin domain containing 4, VSIG4）、DNA损伤诱导蛋白45β（growth arrest and DNA damage inducible protein 45β, GADD45β）、细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule 1, ICAM1）、血管生成素-2基因（angiopoietin 2, ANGPT2）、CD14、CD163、血栓反应蛋白1（thrombospondin 1, THBS1）。结论通过生物信息学方法挖掘出与SAE相关的10个枢纽基因，这些基因和机体的免疫炎症相关。

简介：摘要目的评价氢气对脓毒症相关性脑病小鼠海马线粒体动力学的影响。方法清洁级健康雄性C57小鼠224只，体重20～25 g，6～8周龄，采用随机数字表法分为4组(n＝56)：假手术组(Sham组)、假手术+氢气组(Sham+H2组)、脓毒症相关性脑病组(SAE组)和脓毒症相关性脑病+氢气组(SAE+H2组)。采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症相关性脑病模型。Sham+H2组和SAE+H2组小鼠分别于术后1和6 h时吸入2%氢气1 h。记录术后7 d生存情况。术后24 h时处死小鼠，光镜下观察海马组织CA1区病理学结果；采用荧光分光光度法检测海马组织线粒体膜电位(MMP)，采用荧光素-荧光酶发光法检测线粒体ATP含量。分别于术后6、12和24 h时处死小鼠，采用Western blot法测定海马组织线粒体动力相关蛋白1(Drp1)和线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达。结果与Sham组比较，SAE组和SAE+H2组术后7 d生存率下降，海马组织MMP和线粒体ATP含量降低，Drp1表达上调，Mfn2表达下调(P<0.05)，海马CA1区病理学损伤明显，Sham+H2组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。与SAE组比较，SAE+H2组术后7 d生存率提高，海马组织MMP和线粒体ATP含量升高，Drp1表达下调，Mfn2表达上调(P<0.05)，海马CA1区病理学损伤减轻。结论氢气改善脓毒症相关性脑病小鼠海马线粒体功能的机制可能与其促进线粒体融合，抑制线粒体分裂有关。

简介：摘要目的评价对乙酰氨基酚对小鼠脓毒症相关性脑病的影响及其与铁死亡的关系。方法清洁级健康成年雄性C57BL/6J小鼠160只，6周龄，体重22～24 g，采用随机数字表法分为4组(n＝40)：假手术组(Sham组)、假手术+对乙酰氨基酚组(Sham+APAP组)、脓毒症相关性脑病组(SAE组)和脓毒症相关性脑病+对乙酰氨基酚组(SAE+APAP组)。采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠脓毒症相关性脑病模型，Sham+APAP组和SAE+APAP组分别于模型制备前1 h时腹腔注射对乙酰氨基酚100 mg/kg。记录术后7 d生存情况；于术后24 h时观察小鼠脑组织海马CA1区神经元病理学结果，于造模后24 h时透射电镜下观察超微结构，采用比色法测定活性氧(ROS)、MDA和还原型谷胱甘肽(GSH)含量，Western blot法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)、胱氨酸/谷氨酸反向转运体(xCT)和4-羟基-2-壬烯醛(4-HNE)的表达。结果与Sham组比较，SAE组和SAE+APAP组术后7 d生存率降低，海马ROS和MDA含量升高，GSH含量降低，GPX4和xCT表达下调，SAE组4-HNE表达上调(P<0.05)，Sham+APAP组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)；与SAE组比较，SAE+APAP组术后7 d生存率升高，海马ROS和MDA含量降低，GSH含量升高，GPX4和xCT表达上调，4-HNE表达下调(P<0.05)。SAE+APAP组海马病理学和超微结构损伤较SAE组减轻。结论对乙酰氨基酚可有效减轻小鼠脓毒症相关性脑病，机制与其抑制铁死亡有关。

简介：摘要目的评价富氢液对脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠海马线粒体生物合成和动力学的影响。方法雄性C57BL/6J小鼠128只，6~8周龄，体重20~25 g，采用随机数字表法分为4组(n＝32)：假手术组(Sham组)、假手术+富氢液组(Sham+HRS组)、SAE组和SAE+富氢液组(SAE+HRS组)。采用盲肠结扎穿孔法建立小鼠SAE模型。Sham+HRS组和SAE+HRS组分别于造模后1和6 h时腹腔注射富氢液10 ml/kg。每组随机取20只小鼠，记录术后7 d生存情况。于造模后3、5和7 d进行Y迷宫迷路分辨测试。于造模后24 h时采用ELISA法测定海马组织TNF-α、IL-6和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的含量；采用分光光度法测定超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性；采用Western blot法测定海马过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)、核呼吸因子2 (NRF2)、线粒体转录因子A(Tfam)、动力相关蛋白1(Drp1)和线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达。结果与Sham组比较，SAE组术后7 d生存率降低，新异臂停留时间缩短，海马组织TNF-α、IL-6和HMGB1含量升高，SOD和CAT活性降低，PGC-1α、NRF2、Tfam和Drp1表达上调，Mfn2表达下调(P<0.05)；与SAE组比较，SAE+HRS组术后7 d生存率升高，新异臂停留时间延长，海马组织TNF-α、IL-6和HMGB1含量降低，SOD和CAT活性升高，PGC-1α、NRF2和Tfam表达上调，Drp1表达下调，Mfn2表达上调(P<0.05)。结论富氢液减轻小鼠SAE的机制可能与促进线粒体生物合成，调节线粒体动力学，减轻海马氧化应激有关。

简介：摘要目的评价内皮祖细胞源性外泌体对氧糖剥夺-复氧复糖神经元损伤的影响。方法培养HT22小鼠海马神经元，采用随机数字表法分为3组(n＝30)：对照组(C组)、氧糖剥夺-复氧复糖组(OGD/R组)和氧糖剥夺-复氧复糖+内皮祖细胞源性外泌体组(OGD/R+EXO组)。C组细胞正常培养，OGD/R组采用无糖无血清DMEM培养基在94%N2-1%O2-5%CO2混合气体培养6 h进行氧糖剥夺，随后更换正常培养基进行复氧复糖24 h。OGD/R+EXO组于氧糖剥夺-复氧复糖造模前24 h在培养基中加入20 μg/ml内皮祖细胞源性外泌体。采用免疫荧光染色法鉴定内皮祖细胞，Western blot法、透射电镜、纳米颗粒追踪分析法鉴定外泌体。采用CCK-8法检测神经元活力，ELISA法测定MDA含量和SOD活性，TUNEL染色法检测神经元凋亡率，Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果培养细胞为内皮祖细胞，成功提取内皮祖细胞源性外泌体。与C组相比，OGD/R组和OGD/R+EXO组神经元活力降低，MDA含量升高，SOD活性降低，神经元凋亡率升高，Bax表达上调，Bcl-2表达下调，cleaved-caspase-3/caspase-3比值升高(P<0.05)；与OGD/R组相比，OGD/R+EXO组神经元活力升高，MDA含量降低，SOD活性升高，神经元凋亡率降低，Bax表达下调，Bcl-2表达上调，cleaved-caspase-3/caspase-3比值降低(P<0.05)。结论内皮祖细胞源性外泌体可减轻氧糖剥夺-复氧复糖神经元损伤，与抑制氧化应激和神经元凋亡有关。