简介：摘要目的探讨骨肉瘤微环境中的癌相关成纤维细胞（CAF）对骨肉瘤SOSP-9607细胞增殖的影响及可能机制。方法通过原代培养获得骨肉瘤来源的CAF及癌旁组织正常成纤维细胞（NF），使用流式细胞术检测CAF和NF的α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和成纤维细胞活化蛋白（FAP）的表达。收集CAF、NF的培养液，制备为相应条件培养液。将SOSP-9607细胞分为对照组、NF处理组、CAF处理组，分别应用新制备的未经处理的培养液及CAF、NF条件培养液处理。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测SOSP-9607细胞各处理组细胞增殖能力，实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹法检测各SOSP-9607细胞组cyclin D1表达水平。结果CAF中α-SMA和FAP阳性率分别为（86±5）%和（74±8）%，NF中分别为（15±3）%和（10±1）%，CAF与NF间差异均有统计学意义（t=20.83，P<0.05；t=14.30，P<0.01）。MTT法检测显示，CAF处理组SOSP-9607细胞培养24 h后能够促进细胞增殖；96 h后490 nm处吸光度值达到1.83±0.26，NF处理组为1.40±0.17，对照组为1.35±0.15，差异有统计学意义（F=8.59，P<0.05）。CAF处理组SOSP-9607细胞培养48 h后，cyclin D1 mRNA相对表达量上升至1.57±0.13，NF处理组为1.05±0.15，对照组为1，三组间差异有统计学意义（F=23.09，P<0.05），同时cyclin D1蛋白的表达水平也明显增强。结论CAF能够促进骨肉瘤SOSP-9607细胞增殖，并促进cyclin D1基因的表达。

简介：摘要目的探讨雷帕霉素对高糖环境下足细胞自噬和损伤作用的机制。方法体外培养永生化小鼠肾小球足细胞(mouse podocyte cell 5，MPC5)并进行分组：甘露醇等渗组(mannitol isotonic group，MG组)、高糖组( high glucose group，HG组)、雷帕霉素组(rapamycin group，RG组)以及自噬相关蛋白5-siRNA组(SiG组)。PCR和Western印迹检测足细胞标志Synaptopodin、自噬相关的ULK1以及mTOR通路相关蛋白p70S6K的表达。结果与MG组相比，HG组的Synaptopodin表达降低，自噬活性降低，p-ULK1以及p70S6K表达明显升高。与HG组相比，RG组的Synaptopodin表达升高，自噬活性较高，p-ULK1以及p70S6K表达较低。SiG组表现出与HG组相似的变化趋势。结论雷帕霉素可能通过mTOR-ULK1信号通路调节足细胞内自噬反应、减轻高糖环境引起的足细胞损伤。

简介：摘要目的探讨心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）及心脏超声指标在诊断脓毒症心功能不全中的价值。方法采用前瞻性观察性研究，选择2016年10月至2018年1月收住石河子大学医学院第一附属医院重症医学科的80例脓毒症患者。收集患者性别、年龄、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHEⅡ）、序贯器官衰竭评分（SOFA）、住院时间、28 d病死率等一般临床资料；确诊后1、3、7、10 d检测心脏超声指标及白细胞计数（WBC）、中性粒细胞比例（N%）、N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）、血清H-FABP水平。根据有无心功能不全将脓毒症患者分为心功能正常组（30例）和心功能不全组（50例），比较两组间不同时间点心脏超声指标和心脏标志物的差异；通过Logistic回归筛选出影响脓毒症患者发生心功能不全的心脏超声指标和心脏标志物后，进行受试者工作特征曲线（ROC）分析。结果两组一般资料对比，心功能不全组仅SOFA评分明显高于心功能正常组（分：6.12±4.09比4.57±2.45，P<0.05）。在相同时间点，心功能不全组N%、H-FABP均高于心功能正常组（N%：F＝6.973，P＝0.010；H-FABP：F＝17.303，P＝0.000）。在不考虑时间因素的情况下，两组间左室舒张期末容积（LVEDV）、左室收缩期末容积（LVESV）、左室射血分数（LVEF）、每搏量（SV）、心排血量（CO）、左室短轴缩短率（LVFS）、二尖瓣E峰与室间隔之间的垂直距离（EPSS）、等容舒张时间（IVRT）、E峰减速时间（EDT）、A峰持续时间（Ad）、左室收缩期肺静脉血流速度（S）、左室舒张早期肺静脉血流速度（D）、三尖瓣口舒张早期血流速度（E'）、三尖瓣口舒张晚期血流速度（A'）、右室游离壁三尖瓣环收缩期运动速度峰值（Sm）、肺动脉瓣环血流速度（PVBV）差异均有统计学意义。对Logistic回归分析筛选出的心脏超声指标和心脏标志物进行ROC曲线分析显示，ROC曲线下面积（AUC）及阳性预测值和阴性预测值分别为：LVEDV为0.636、77.30%、56.03%，SV为0.779、88.82%、71.19%，LVEF为0.753、92.12%、55.21%，CO为0.754、88.82%、77.19%，LVFS为0.728、81.25%、66.99%，EPSS为0.663、96.99%、51.56%，IVRT为0.775、86.97%、73.55%，A'为0.908、96.58%、89.60%，Sm为0.738、93.37%、56.77%，H-FABP为0.673、80.26%、57.25%。将H-FABP分别与LVEDV、SV、LVEF、CO、LVFS、EPSS、IVRT、A'、Sm进行平行诊断试验，其阳性预测值均高于单项诊断试验（分别为85.45%、93.91%、96.72%、94.74%、89.43%、98.00%、92.00%、99.42%、93.60%），阴性预测值均低于单项诊断试验（分别为50.89%、57.93%、49.15%、58.18%、57.05%、45.74%、57.92%、64.13%、47.78%）。结论心脏超声指标LVEDV、SV、LVEF、CO、LVFS、EPSS、IVRT、A'、Sm联合H-FABP对脓毒症心功能不全的诊断有一定价值。

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