细胞免疫学检测临床分析

孙瑞微

【关键词】细胞免疫检测临床分析

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）52-0138-02

1自然杀伤细胞功能测定

1.1细胞引起的靶细胞杀伤大致分三种情况，一是CTLs细胞毒作用，是特异抗原激发的，受MHC分子限制的细胞杀伤；二是自然杀伤细胞发挥的细胞毒作用，所谓自然杀伤即细胞不需MHC参与，亦不借助抗体，而对靶细胞(如异体细胞、瘤细胞)造成杀伤；三是抗体介导的细胞毒(ADCC)作用，在ADCC中，效应细胞的特异性和功能发挥均由致敏抗体决定。

1.2NK活性与肿瘤相关密切，一般认为，肿瘤患者的NK活性多呈降低状态，此与瘤细胞的免疫逃避有关。通过免疫调节，增强免疫措施，体外法或体内提高NK活动，有助于肿瘤的控制。

1.3LAK和NK的作用属于自然杀伤细胞活性，测定其活性主要有两种方法，一是乳酸脱氢酶释放法，现已少用。二是51Cr释放法，该法测定放射核素51Cr标记的靶细胞在效应细胞的作用下的破坏，溶解程度，以51Cr释放为指标。靶细胞多采用瘤细胞株[1]。

2T细胞表面分化抗原测定(CDmolecules)

2.1T细胞表面的CD分子

T细胞表面的CD分子有十几种，应用最多的有以下几种[2]。

2.1.1CD2分子CD2分子即绵羊红细胞受体，是T细胞E花环试验的介导分子，在95％人外周血T细胞表达。该CD分子参与细胞的免疫功能，对T细胞受体的抗原识别有辅助作用，同时，CD2分子还是补体C3的受体成分之一。CD2分子并非在全部T细胞上有表达，CD2分子本身也有一个分化成熟与否的问题。用单抗称记CD2分子阳性的细胞，有时E花环试验会呈阴性反应。

2.1.2CD3分子CD3分子是泛T细胞标记，在成熟胸腺细胞、所有的外周血T细胞(包括静息态和激活态)都有表达，而在粒细胞，单核细胞上不表达，是总T细胞的最重要标志。CD3构成TCR的一部分，对T细胞活化有重要影响，抗CD3抗体可促进T细胞产生IL－2、TNFα等多种细胞因子，增强CTLs、LAK、NK细胞的瘤细胞杀伤活性。

抗CD3单克隆抗体，还可用于治疗器官移植后的排异反应，作用类似抗淋巴细胞血清。

2.1.3CD4分子CD4分子是公认的辅助、诱导T淋巴细胞的标记，在人外周血淋巴细胞中的阳性率约为47％，同时低水平表达于单核细胞和巨噬细胞。CD4分子的主要作用是辅助TCR的抗源接受和信号传导，CD4+细胞的抗原识别受MHC－Ⅱ类分子限制。CD4分子还是HIV的病毒受体，是病毒外壳蛋Gp120的结合位点，这也是HIV主要侵犯CD4+细胞的原因，已有众多应用CD4+封闭法治疗AIDS患者的报道。

2.1.4CD8分子与CD4+细胞相对应，CD8+是淋巴细胞中的另一亚群，T抑制细胞和CTLs细胞的标记，正常人外周血阳性率低于CD4+细胞，约为18％～38％。CD8分子也与T细胞的激活有关，其抗原识别受MHC－I类分子限制，CD8分子也表达在人外周血的裸细胞上(Nullcells)。由于CD8+细胞代表了CTLs群，所以，其数量变化在一定程度上反映了机体的细胞免疫功能，特别是细胞毒介导的免疫损伤。抗CD8抗体对预防骨髓移植物抗宿主反应有效。

2.1.5CD4+细胞／CD8+细胞免疫功能失调表现为免疫功能低下、亢进或紊乱，CD4／CD8+细胞群间的功能协调与否至关重要。很容易想象，一个亚群的功能异常必然表现为机体的免疫失调，所以，测定两者的平衡关系对指导临床有特别的意义。主要应用范围如下：

(1)免疫缺陷病，两种细胞都低下表明整体免疫功能低下，体液免疫低下多反映在CD4+细胞上，细胞免疫功能低下多反映在CD8+细胞上。

(2)某些自身免疫病，如SLE的活动期多表现为CD4+细胞升高、CD8+细胞升高不明显或下降，但比值升高；进行性多发性硬化症患者多见两者都降低，但比值升高。

(3)器官移植后的监护，CD8+细胞升高，比值缩小时警惕排异的可能。

2.2B细胞表面的CD分子

2.2.1CD19分子CD19分子广泛表达于B淋巴细胞，从最早期的B前体到成熟期的B细胞，至B细胞分化为浆细胞时消失，但在外周血的T淋巴细胞，中性粒细胞，单核细胞都不表达，所以，是最重要的B细胞标记分子。一般认为CD19分子与B细胞的信号传导有关，参与B细胞的免疫反应。体液免疫缺陷患者，CD19+细胞可减少，B细胞系统的肿瘤患者，CD19+细胞常明显升高。

2.2.2CD21分子CD21分子分布于成熟的B淋巴细胞，部分T细胞和某些类型的上皮细胞。CD21分子单独不能作为界定B细胞的阳性标记，但与其他CD一起，可增加鉴定B细胞的可靠性。CD21分子在其他细胞因子的辅助下，能促进B细胞的分化增殖。CD21分子又是EB病毒的结合分子，能介导EB病毒转化B细胞为永生细胞，成为制备人源单克隆抗体的重要方法，作为补体受体的结构成分，CD21分子还参与补体的活化，促进体液免疫反应。

2.3NK细胞的CD分子

象NK细胞群的鉴定一样，NK细胞上的CD分子也不够特异、清晰，所以不可能以一种CD分子作为NK细胞的标志。CD2、CD3、CD8、CD12等分子均呈不同程度的在NK表达。但都不是100％的表达，一般以CD3－、CD16+、CD56+界定NK细胞，这些分子与NK细胞的活化和杀伤活性有关。此外，CD25分子为T细胞活化的标记分子；CD69为淋巴细胞，NK细胞和巨噬细胞活化的早期标志；CD63与血小板的粘附功能密切相关等等，以表示之。

参考文献

[1]章谷生.拓展细胞免疫学检验项目、更好地为临床服务[J].上海医学检验杂志,1995年01期

[2]龙振洲,谢蜀生.我国免疫学基础研究现状及发展战略的设想[J].现代免疫学,1988年03期