缺氧诱导因子2α在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义

刘言赵文杰张秀枫

摘要：目的研究分析宫颈鳞癌组织的缺氧诱导因子2α（HIF-2α）表达和意义。方法根据我院2006年3月至2012年3月接收的208例患者来进行分析研究，有102例宫颈鳞癌足足、66例CIN组织、40例正常宫颈组织，对这些组织的HIF-2αmRNA的表达情况进行比较研究。结果正常组织、宫颈鳞癌组织、CIN组织的HIF-2αmRNA的表达为0、68.6%、22.7%，结果存在统计学差异性（P<0.05）。宫颈鳞癌组织中的HIF-2αmRNA呈阳性表达的比例高于正常组织和CIN组织（P<0.05）。结论宫颈鳞癌的发生和病变过程与HIF-2αmRNA在宫颈鳞癌组织中表达上调有关联性。

关键词：缺氧诱导因子2α；宫颈鳞癌；原位杂交

[Abstract]Objective：Tostudytheexpressionandsignificanceofhypoxiainduciblefactor2alpha（HIF-2）incervicalsquamouscellcarcinoma.Methods：toanalyzeandResearchon208casesinourhospitalfromMarch2006toMarch2012toreceivepatients，102casesofcervicalsquamouscellcarcinoma，for66casesofCINtissues，40casesofnormalcervicaltissue，theexpressionofHIF-2alphamRNAfortheorganizationofthecomparativestudy.Results：theexpressionofHIF-2innormaltissues，cervicalsquamouscellcarcinomatissuesandmRNAtissueswas0，68.6%，22.7%，andtheresultswerestatisticallysignificant（P<0.05）.ThepercentageofHIF-2positiveexpressionincervicalsquamouscellcarcinomawashigherthanthatinnormaltissueandCINtissue（P<0.05）.Conclusion：theincidenceofcervicalsquamouscellcarcinomaandtheprocessofmRNAalphaHIF-2expressionincervicalsquamouscellcarcinomatissueisassociatedwithupregulation.

[Keywords]hypoxiainduciblefactor2；cervicalsquamouscellcarcinoma；insituhybridization

宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤疾病，对女性的健康和生命产生了威胁[1]。宫颈鳞癌是比较常见的类型，本文主要是通过原位杂交技术对宫颈鳞癌组织、正常组织和CIN组织的缺氧诱导因子2α（hypoxia-induciblefactor2α，HIF-2α）mRNA的表达情况进行分析研究，希望能够了解其在患者宫颈鳞癌病变过程中作用，现进行以下报道。

1材料与方法

1.1一般资料2006年3月至2012年3月我院对208例宫颈组织蜡块进行了检验研究。患者最小34岁，最大65岁，平均（45.8±3.5）岁。共有102例宫颈鳞癌组织、66例CIN组织，40例正常组织。

1.2主要试剂及试剂盒DAB显色剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司，人原位杂交检测试剂盒（MK2210h）购自武汉博士德生物工程有限公司，5’端地高辛标记的HIF-2α寡核苷酸探针序列：5’-GAAGCTGACCAGCAGATGGACAACTTGTACCTGAA-3’，由武汉博士德生物工程有限公司合成[2]。

1.3ISH染色石蜡切片经新鲜配置的二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水后，用新鲜配制的3%H2O2室温处理5～10min，以灭活内源性过氧化物酶，切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶，37℃消化20min，消化标本DNA结合蛋白，1%多聚甲醛/0.1MPBS（pH7.2～7.6），室温固定10min，每张切片加20μL不含探针的预杂交液，恒温箱40℃4h，每张切片加20μL含探针的杂交液，恒温箱40℃杂交过夜，杂交后洗涤，滴加封闭液，滴加生物素化鼠抗地高辛，滴加SABC，滴加生物素化过氧化物酶，PBS清洗，DAB显色，苏木素复染，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

1.5ISH结果判定HIF-2α阳性信号为棕黄色颗粒，定位于细胞质；参照文献[3]，使用原位杂交的阳性计算方法。

1.6统计学处理应用SPSS16.0统计学软件对数据进行处理，两样本率的比较采用四格表资料的字2检验，多样本率的比较采用行列表资料的字2检验；以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

正常组织、宫颈鳞癌组织、CIN组织的HIF-2αmRNA的表达为0、68.6%、22.7%，结果存在统计学差异性（P<0.05）。HIF-2αmRNA在伴淋巴结转移宫颈癌组织中的阳性表达率比较高；患者的分期越晚，该阳性表达率越高。HIF-2αmRNA阳性表达率和患者的年龄、浸润深度并没有联系（P>0.05）。

3讨论

HIF在人、哺乳动物体内广泛存在，它是转录因子[4]，现在临床中已经知道的缺氧诱导因子有HIF-1、HIF-2、HIF-33种。其中HIF-2是异源二聚体蛋白质复合物[5]。

根据研究显示，很多种恶性肿瘤患者的HIF-2α表达都比较高，所以我们认为HIF-2α属于癌基因的一种[6-8]。在此次研究中，正常组织、宫颈鳞癌组织、CIN组织的HIF-2αmRNA的表达为0、68.6%、22.7%，结果存在统计学差异性（P<0.05）。HIF-2αmRNA在伴淋巴结转移宫颈癌组织中的阳性表达率比较高；患者的分期越晚，该阳性表达率越高。HIF-2αmRNA阳性表达率和患者的年龄、浸润深度并没有联系（P>0.05），表明HIF-2α的表达和患者的宫颈鳞癌发病有直接联系。MMP可以促肿瘤侵袭转移，和患者的年龄、分期、浸润等无关[8]。该结果和此次的研究结论相符合，说明宫颈鳞癌在发病和发展的过程中受到了HIF-2α的影响。在侵袭和转移的时候有所参与，临床中可以将其作为新的分子治疗靶点。

总而言之，临床中的宫颈鳞癌发病和发展和HIF-2α高表达有很大的关联性，对HIF-2α的表达水平进行检测，能够为临床中的早期诊断以及治疗提供参考，在该疾病的治疗作用仍然需要更多的研究分析，通过对HIF-2α的研究，能够让我们以后治疗宫颈鳞癌过程中提供更多的指导价值，因此其临床意义重大。

参考文献

[1]邹亮，高慧淳，周建洪，等.HIF-1α、VDGF-C在细支气管肺泡癌中的表达及其意义[J].中国癌症防治杂志，2011，3（4）：306—309.

[2]孙翠琴，范洪斌.液基细胞学检测在宫颈癌早期筛查中的价值[J].中国医学创新，2012，9（31）：77-78.

[3]王秀平.TCT及阴道镜在宫颈病变诊断中的应用分析[J].中国医学创新，2011，8（26）：117-119.

[4]刘继勇，蔡玉鸣.子宫颈癌的介入治疗[J].中国医学创新，2012，9（20）：119-120.

[5]李娟.局部晚期宫颈癌手术前行动脉灌注介入先期化疗的临床分析[J].中国医学创新，2011，8（21）：173-174.

[6]马路鳞状细胞癌抗原研究进展[J].疾病监测与控制，2013，14（3）：10-11

[7]张彤，徐勇，张晓光，等.前列腺癌中Pim-1的表达及其临床意义[J].中华泌尿外科杂志，2006，27（9）：621-623.

[8]李晓晶，孙丹，刘桐林，等.Pim-1蛋白激酶在肺癌组织中的表达及临床相关性研究[J].中国现代医学杂志，2011，21（7）：793-796.