男性少弱精子症不育患者精子DNA碎片检测情况分析

王晓岚

【摘要】目的：探究分析男性少弱精子症不育患者精子DNA碎片检测情况。方法：研究对象为我院2017年1月到10月期间收治的40例男性少弱精子症不育患者，将其作为观察组，同期选择健康体检的40名男性作为对照组，检测观察组和对照组人员的精液指标，并测定精子DNA碎片指数（DFI），分析DFI与精子密度、活动率、正常形态率以及前向活动精子之间的相关性。结果：观察组患者DFI、精子密度、活动率、正常形态、前向活动精子等指标与对照组上述指标存在较大的差异性，存在统计学意义（P＜0.05）；DFI和精子密度、活动率、正常形态率以及前向活动精子之间呈负相关。结论：男性少弱精子症不育患者精子DNA碎片与精子的相关指标呈负相关，表明男性少弱精子症不育患者的精子DNA完整性受到损伤，通过对DFI检测可作为男性生育能力评价的重要指标。

【关键词】男性少弱精子症不育；精子DNA碎片检测；精液指标

【中图分类号】R697【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）04-0165-02

根据临床统计资料显示，不孕不育中有50.0%的因素为男性因素，在男性不孕不育检查中主要通过精液分析对患者不孕不育情况进行诊断，不过在世界卫生组织男性生育能力预测中却没有提及上述指标，因而常规的精液分析指标存在一定的局限性[1]。分子生物学的发展使得精子DNA检测成为一种可能，通过对精子DNA完整性的检测逐渐在男性不孕不育诊断中得到应用。本文结合我院收治的40例男性少弱精子症不育患者资料，对上述患者DNA碎片检测情况进行分析。

1.临床资料及方法

1.1一般资料

研究对象为我院2017年1月到10月期间收治的40例男性少弱精子症不育患者，将其作为观察组，同期选择健康体检的40名男性作为对照组。观察组患者年龄25～37岁、平均年龄为（29.3±3.8）岁，病程2～6年、平均病程为（3.6±0.8）年，根据WHO第5版男性少弱精子症的临床诊断标准确诊；对照组年龄23～39岁、平均年龄（29.1±4.0），对照组人员存在健康生育史，经检查不存在异常。观察组和对照组人员染色体均为（46，XY），Y染色体臂不存在缺失或者异常情况。观察组和对照组一般资料差异不具有统计学意义，能够实施比较（P＞0.05）。

1.2方法

检查前对观察组和对照组实施常规健康教育，要求所有人员禁欲5天，通过手淫方式获得精液，然后由我院检验科医生按照精液检测常规使用相关仪器完成精液分析，具体的包括精子密度、活动率、正常形态、前向活动精子等。然后对精子DNA碎片实施检测，将精液离心，去掉精浆，通过EBSS的加入实现对精子密度调节，选取20μl离心后的精液实施玻片涂抹，保证涂抹均匀，通过显微镜对精子密度进行观察，在精子密度适宜后，将载玻片放入27℃烤箱中烤干备用，配制好伊红液，在精子涂片干燥后使用90.0%的乙醇进行30min固定，取出，晾干，在苏木素染液中进行5min染色，染色后取出冲洗120s，取出在滴干后将其放置到伊红染色液中染色，染色时间约30～60s，再次流水冲洗，待玻片干燥后完成精子DNA碎片检测，具体的通过SCD实验完成精子DNA碎片检测，根据试剂盒说明完成检测，分析精液DFI和常规精液指标的相关性[2]。

1.3观察指标

观察指标有；（1）观察组和对照组常规精液指标；（2）DFI和常规精液指标的相关性。

1.4统计学分析

整理观察指标数据，用SPSS19.0统计学软件对各类参数实施分析处理，计数资料用率（%）表示，计量资料用均值±标准差表示，组间比较前者用卡方，后者用t，检验标准为P＜0.05。

2.结果

2.1观察组和对照组精液指标比较

观察组和对照组各项精液指标比较见表，观察组患者DFI、精子密度、活动率、正常形态、前向活动精子等指标与对照组上述指标存在较大的差异性，存在统计学意义（P＜0.05）。

2.2DFI和其它指标的相关性分析

DFI和精子密度、活动率、正常形态、前向活动精子等呈负相关，与精子密度的相关系数为r=-0.487，和活动率的相关系数为r=-0.686，和正常形态的相关性为r=-0.830，和前向活动精子的相关系数为r=-0.637。

3.讨论

不孕不育作为临床常见病，根据统计资料数据显示，我国不孕不育症出现了一定的上升趋势，我国不孕不育平均发病率约为12.5%～15.0%，当前我国不孕不育患者人数已经超过了5000万。在不孕不育方面男性因素约占了一半[3]。少弱精子症作为男性不孕不育的主要病因，不孕不育患者会受到来自社会、家庭等方面的压力，有效的诊断社会进行治疗的基础。

本文研究中对男性少弱精子症不育患者和正常人员的精液进行分析，研究结果表明，男性少弱精子症不育患者其精子密度、活动率、正常形态、前向活动精子等指标均低于对照组上述指标，进一步表明男性少弱精子症不育患者的精子密度或者精子活力存在异常，从而影响到男性的生育能力，这一点与过国内众多文献资料报道存在高度一致性[4]。

随着分子生物学的研究和发展，有研究指出男性不孕不育与精子DNA断裂之间存在着密切关系[5]。有文献资料报道不孕不育患者采用辅助生殖过程中，DNA完整性与胚胎发育过程中可能出现的流产、胚胎停止发育关系密切，当精子DNA完整性损伤越严重，则后期出现流产或者胚胎停止发育的可能性越大[6]。这些都为男性少弱精子症研究奠定了基础。

本研究通过对DFI与精液常规指标相关性分析，结果显示DFI和常规精液指标呈负相关，DFI越大，则对应的精子密度、活动率、正常形态以及前向活动精子指标越小，男性患者不孕不育的可能性越大。

综上所述，男性少弱精子症不育患者精子DNA碎片与精子的相关指标呈负相关，表明男性少弱精子症不育患者的精子DNA完整性受到损伤，通过对DFI检测可作为男性生育能力评价的重要指标。

【参考文献】

[1]杨晓玉,王莉莉,陈萍,等.刘嘉茵.精子DNA碎片指数和精子畸形率对ICSI临床结局的影响[J].中华男科学杂志,2013,19(12):1082-1086.

[2]徐秀民,于德新,张志强,等.男性不育患者精子DNA损伤与非整倍体精子的研究[J].安徽医科大学学报,2013,59(11):1355-1359.

[3]马强,刘春莲,李元杰,等.焦海燕.RNF8基因遗传变异与吸烟饮酒的交互作用对精子DNA碎片率和原发性男性不育的影响[J].重庆医学,2013,42(33):3983-3985.

[4]许金榜,黄海龙,康跃凡,等.男性少弱精子症不育患者精子DNA碎片检测情况分析[J].中国现代医学杂志,2013,23(23):75-78.

[5]杨译,姜辉,张海娇,等.刘德风.男性不育患者年龄与精子DNA碎片和精液常规参数的相关性分析[J].中国性科学,2012,21(02):17-19.

[6]孙振高,连方,姜鲲鹏,等.生精片对男性少弱精子症患者精液参数的影响及作用机制研究[J].中华男科学杂志,2012,18(08):764-767.