肺癌血液 EGFR突变检测结果及临床意义

姜明兴

云南省肿瘤医院（昆明医科大学第三附属医院）650000

【摘要】目的：对肺癌血液EGFR（表皮生长因子受体）突变检测的结果及临床意义进行分析。方法：将2017年10月至2018年10月我院收治48例肺癌患者的血浆与其中30例相对应的肿瘤组织中对NDA进行提取，经PCR扩增及基因测序的方法对EGFR基因突变进行检测，分析检测结果。结果：①肿瘤组织突变类型与血浆游离DNA EGFR基因突变类型相同。②男性与女性突变率比较并无差异（P＞0.05）；有无吸烟史突变率比较并无差异（P＞0.05）；在病理分型中，腺癌突变率高于鳞癌、腺鳞癌、大细胞癌及小细胞癌突变率，数据差异显著（P＜0.05）。结论：肿瘤组织突变类型与血浆游离DNA EGFR基因突变类型相同且腺癌突变发生率比较高。血液EGFR突变检测在肺癌中发挥着重要的作用，为临床的治疗提供科学依据，降低医疗风险的发生，保证患者治疗质量。

【关键词】肺癌；血液；EGFR突变

因受到各种因素的影响，导致肺癌的发病率呈逐年上升的趋势，虽然经过治疗可控制病情的发展，但是预后效果并不是很理想，缩短了患者的生存时间^[1]。目前临床治疗肿瘤以分子靶向药物为主，有学者指出，影响靶向药物治疗的重要因素是肺癌组织中EGFR酪氨酸激酶编码区基因突变，与治疗的效果有着直接的关系，因此检测EGFR突变有着重要的意义^[2]。此次研究旨在分析肺癌血液EGFR突变检测的结果及临床意义，数据资料报告如下。

1研究资料与方法

1.1研究资料

将2017年10月至2018年10月我院收治48例肺癌患者作为本次研究对象，其中男性33例，女性15例，年龄45~73岁，均值（59.0±6.6）岁。在其中30例患者提供了手术切除的肿瘤组织。

1.2方法

1.2.1血浆标本及血浆循环DNA的提取

通过静脉抽取外周血，为5ml，然后将其放在抗凝离心管内，做离心处理，时间约10min，取出上清血并置于离心管中，进行离心处理，时间约10min，将上清血（1.5ml/管）在-80℃的环境下保存。在解冻之后严格按照流程提取DNA，然后溶于双蒸水内，通过紫外分光光度计对DNA的纯度与含量进行测定，然后在-20℃的环境下保存。

1.2.2组织样本的采集与DNA的提取

肺癌组织在手术离体后经过一定的处理在-80℃的环境下保存。取30mg癌组织，置于Eppen-dorf管中，严格按照试剂盒说明书对DNA进行提取，通过紫外分光光度计对DNA的纯度与含量进行测定，A280/A260应在1.80之上，DNA浓度维持在50ng/uL。

1.2.3EGFR外显子19，21特异性PCR与基因测序

将肺癌患者循环DNA与癌组织DNA产物作为模板，扩增EGFR因子19，21外显子。PCR扩增经Taq Master聚合酶5uL，模板DNA2uL，上下游引物分别为0.2u/L，使用双蒸水将其补充到10uL。对扩增产物进行EB染色摄影处理，针对阳性扩增条带样本通过柱层析分离纯化后对基因进行测序。

1.3观察指标

比较肿瘤组织与血浆EGFR基因突变的关系与EGFR突变与患者数据资料之间的关系。

1.4统计学分析

本次研究数据经过SPSS19.0进行总汇处理，用率（%）来代表计数资料，进行χ²检验，P＜0.05为数据差异有统计学意义。

2结果

2.1肿瘤组织与血浆EGFR基因突变的关系

在30例肿瘤组织中，共8例患者为EGFR突变；7例患者为19外显子突变，其中6例患者为del E746-A750，1例患者为L747-S752；1例患者为21外显子突变，均为L858R。由此可知，肿瘤组织突变类型与血浆游离DNA EGFR基因突变类型相同。

2.2EGFR突变与患者数据资料之间的关系

男性与女性突变率比较并无差异（P＞0.05）；有无吸烟史突变率比较并无差异（P＞0.05）；在病理分型中，腺癌突变率高于鳞癌、腺鳞癌、大细胞癌及小细胞癌突变率，数据差异显著（P＜0.05）。详情数据见下表1。

表2EGFR突变与患者数据资料之间的关系

数据资料	例数	突变例数	X2	P
性别
男	23	6（26.1）	0.186	＞0.05
女	15	3（20.0）
吸烟史
有	26	6（23.1）	0.016	＞0.05
无	12	3（25.0）
病理分型
腺癌	23	8（34.7）
鳞癌	15	1（6.7）	4.327	＜0.05
腺鳞癌	4	0（0.0）
大细胞癌	4	0（0.0）
小细胞癌	2	0（0.0）

3讨论

在肺癌分子靶向治疗中，对EGFR酪氨酸酶抑制剂予以了大量的研究报告，通过研究发现，在EGFR酪氨酸酶抑制剂治疗的过程中，只有一部分患者对药物有反应，对TKI敏感的肺癌患者基本都有EGFR基因体细胞突变^[3]。临床中检测EGFR基因突变的来源以手术切除癌组织为主，但是却不适用于晚期肺癌患者，分析其原因为获取癌组织标本比较困难，虽然通过纤维支气管镜活检可获取组织标本，但是对患者造成的创伤也是比较大的，获取的癌组织也并不是很理想^[4]。所以，经组织标本可以对EGFR基因突变进行检测，在评估EGFR酪氨酸酶抑制剂靶向药物的治疗中发挥着重要的意义。

经研究证实，肿瘤组织突变类型与血浆游离DNA EGFR基因突变类型相同且腺癌突变发生率比较高。总而言之，血液EGFR突变检测在肺癌中发挥着重要的作用，为临床的治疗提供科学的依据，同时也降低了医疗风险的发生，保证患者的治疗质量。

参考文献

[1]黄健,王于理,代平等.胸水、血液EGFR基因突变检测在非小细胞肺癌治疗中的应用价值[J].山东医药,2018,58(6):61-63.

[2]浙江省抗癌协会抗癌药物专业委员会专家组.浙江省非小细胞肺癌血液EGFR基因突变检测专家共识[J].浙江医学,2016,38(4):233-236,290.

[3]沈才路.液体标本在非小细胞肺癌EGFR突变检测中的应用[J].国际检验医学杂志,2018,39(16):1947-1950.

[4]潘志文,朱静,徐笑红等.肺癌血液EGFR突变检测结果及临床意义分析[J].检验医学与临床,2017,14(Z1):265-267.