变形链球菌荧光报告株的构建和鉴定

目的探讨变形链球菌（S．mutans）荧光素酶（luc）基因报告株构建方法，拟为探讨抗菌剂对多菌种生物膜中S．mutans的作用提供研究基础。方法将S．mutansUA159乳酸脱氢酶（ldh）基因及其上游部分约1100000片段克隆至自杀质粒pFW5-luc的多克隆位点，构建重组质粒．并经酶切和测序证实。采用自然转化的方法，实现重组自杀质粒和S．mutansUA159同源序列的单次交换。结果经过聚合酶链反应（PCR）和测序分析，筛选出具有报告活性的S．mutansldh-luc基因荧光报告株。结论成功构建了S．mutansldh-luc基因荧光报告株。