简介：摘要目的分析沉默信息调节因子6(SIRT6)与上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)在食管鳞癌组织及同一患者的癌旁正常组织中的表达及其临床意义。方法选取2018年6月至2019年12月郑州大学附属洛阳中心医院胸外科收治的61例手术治疗食管鳞癌患者的癌组织及距肿瘤切缘3 cm以上的癌旁组织(镜下观察未见癌细胞)，男42例，女19例，年龄(63.62±9.59)岁，年龄范围为34～82岁。通过免疫细胞化学与蛋白免疫印迹实验(Western blot)方法检测SIRT-6、E-cadherin在食管鳞癌组织中的蛋白表达及免疫组化，并分析SIRT6和E-cadherin与临床病理资料的相关性。结果在食管鳞癌中SIRT6蛋白相对表达量(0.383±0.092)显著低于癌旁组织(1.037±0.116)，差异有统计学意义(t＝9.877，P<0.01)。食管鳞癌中E-cadherin蛋白相对表达量(0.423±0.089)低于癌旁组织(0.967±0.116)，差异有统计学意义(t＝6.976，P<0.01)。SIRT6在食管鳞癌组织中阳性表达与浸润深度相关，差异有统计学意义(P<0.05)；与肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移无关，差异无统计学意义(P>0.05)。E-cadherin在食管鳞癌组织中阳性表达与分化程度、浸润深度相关，差异有统计学意义(P<0.05)；与肿瘤大小、淋巴结转移无关，差异无统计学意义(P>0.05)。进行Spearman等级相关分析显示，两者之间呈正相关关系，差异有统计学意义(r＝0.538，P<0.01)。结论SIRT-6和E-cadherin的表达影响食管鳞癌的侵袭性，可为临床治疗食管鳞癌提供理论依据及靶点。

简介：目的：研究大气细颗粒污染物（PM2.5）浓度及对肺上皮细胞（A549细胞）炎性因子的影响。方法：测定2013年1月至2013年12月北京市某城区PM2.5浓度,比较不同PM2.5浓度对A549细胞炎性因子IL-6、TNF-α表达水平的影响。结果：北京市细颗粒污染物PM2.5日均值春季、夏季、秋季、冬季分别为174.3μg/m3、143.5μg/m3、166.7μg/m3、189.6μg/m3,四季超标率差异无统计学意义（P〉0.05）;大气细颗粒污染物PM2.5对肺上皮细胞IL-6、TNF-α的影响,春季、夏季、秋季、冬季四季之间差异无统计学意义（P〉0.05）;随着PM2.5浓度升高IL-6、TNF-α表达水平升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;随着染毒时间延长IL-6、TNF-α表达水平升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：大气细颗粒污染物浓度升高会使肺上皮细胞炎性因子表达增强。

简介：目的：探讨子宫上皮细胞稳定性FH检测用于宫颈癌前病变中的临床诊断意义。方法：通过分析2014年4月至2015年11月到医院进行宫颈癌前病变筛查的5200例患者的临床资料,其中包括经病理学检测诊断为宫颈癌前病变患者（观察组）和宫颈正常或宫颈良性病变患者（对照组）各2600例,全部患者进行宫颈液基细胞检查和子宫上皮细胞稳定性FH检测,对比分析两种方法检查结果探讨子宫上皮细胞稳定性FH检测临床诊断价值。结果：FH检测方法和TCT检测方法检测两组患者阳性结果,比较差异无统计学意义（P〉0.05）;FH检测方法同TCT检测敏感性比较差异无统计学意义（P〉0.05）;FH检测特异性显著低于TCT检测方法,比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：子宫上皮细胞稳定性FH检测用于临床宫颈癌前病变患者检测具有简单、快速、成本低的优势,临床检测敏感性较高,广泛适用于经济落后地区女性宫颈癌前病变患者临床诊断。

简介：目的探究HPV感染与膀胱尿路上皮细胞癌（HUCC）的相关性及临床意义。方法收集70例BUCC患者及60例对照组患者的膀胱组织标本，采用PCR结合凝胶电泳方法检测标本中HPV16的表达情况，并分析其表达水平与膀胱癌各临床病理参数之间的相关性。结果HPV病毒在HUCC中的表达（15．7％）及对照组患者中的表达（13．3％）无统计学差异（P〉0．05），并且与肿瘤分化程度无关。结论目前的小型研究不支持HPV16感染参与免疫功能正常个体HUCC的发生。

简介：目的研究黄芪当归合剂及阿托伐他汀对缺氧／复氧人肾小管上皮细胞损伤的影响。方法选用人肾小管上皮细胞建立缺氧／复氧损伤模型，设正常对照组、单纯缺氧复氧组、黄芪当归合剂组、阿托伐他汀组、黄芪当归合剂和阿托伐他汀联合用药组。检测活性氧的产生量。酶联免疫吸附法检测细胞间黏附分子-1、单核细胞趋化蛋白-1的表达，逆转录聚合酶链式反应检测细胞间黏附分子-1mRNA、单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达，免疫印迹法检测核因子-kB。结果缺氧复氧组活性氧高于对照组，细胞间黏附分子-1、单核细胞趋化蛋白-1及各自mRNA表达上调，黄芪当归合剂组、阿托伐他汀组均降低细胞内活性氧水平，抑制炎性因子表达，黄芪当归合剂和阿托伐他汀联合用药组效果更加明显。结论黄芪当归合剂、阿托伐他汀对肾小管上皮细胞缺氧复氧性损伤有保护作用，联合用药效果显著，可能与通过抑制核因子-kB炎症通路减少细胞间黏附分子-1、单核细胞趋化蛋白-1表达从而降低氧化应激水平有关。

简介：摘要目的：研究蛋白酶体β5（PSMB5）过表达对人晶状体上皮细胞抗氧化能力的影响。方法：实验研究。构建重组质粒pcDNA3.1-PSMB5，将其转染入人晶状体上皮细胞株SRA01/04中，形成稳定表达（作为实验组），设pcDNA3.1空载体作为对照组。将2组细胞置于40 μmol/L H2O2环境下，Hoechst 33342荧光染色观察2组细胞核形态的变化；流式细胞仪检测2组细胞凋亡率的变化。数据采用独立样本t检验。结果：40 μmol/L H2O2环境下，Hoechst 33342荧光染色可见，与实验组相比，对照组的细胞核明显皱缩、变形；流式细胞仪检测发现，实验组和对照组的细胞凋亡指数分别为（9.3±0.9）%和（15.7±1.9）%，均高于处理前的（5.9±0.8）%和（7.1±1.1）%，对照组凋亡指数比实验组的凋亡指数更高（t=3.742，P=0.008）。结论：PSMB5基因过表达能有效提高人晶状体上皮细胞的抗氧化能力。

简介：摘要目的探讨阴道镜检查宫颈无明确诊断意义非典型鳞状上皮细胞（ASCUS）的临床应用价值。方法对2005年6月至2009年12月在福州市第二医院门诊和住院部行宫颈液基细胞学检查(TCT)，结果为ASCUS的300例患者进行阴道镜检查并取组织活检。结果300例ASCUS患者中，检出宫颈上皮内瘤变CINI级57例（19%），CINII级21例（7.0%），CINIII级4例（1.3%），宫颈浸润癌2例。结论宫颈细胞学检查为ASCUS时，其组织病理学结果从炎症到宫颈癌均有可能，应引起重视。阴道镜检查可有效地检出ASCUS患者中的宫颈癌前病变，甚至宫颈癌的患者，对基层医院管理ASCUS患者有临床应用价值。

简介：摘要目的评价LPS攻击大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)时血红素氧合酶-1/一氧化碳(HO-1/CO)信号通路与线粒体分裂的关系。方法大鼠AECⅡ进行传代培养，待其分裂至合适浓度(约2×105个/ml)时接种于96孔板。采用随机数字表法将细胞分为7组(n＝12)：空白对照组(C组)继续培养，不做任何处理；LPS组(L组)采用10 μg/ml LPS孵育；一氧化碳释放分子-2(CORM-2)＋LPS组(CL组)、HO-1诱导剂Hemin＋LPS组(HL组)、HO-1抑制剂ZnPP-Ⅸ＋LPS组(ZL组)分别采用100 μmol/L CORM-2孵育1 h、20 μmol/L Hemin孵育1 h以及10 μmol/L ZnPP-Ⅸ孵育0.5 h，而后用10 μg/ml LPS孵育；CORM-2＋ZnPP-Ⅸ＋LPS组(CZL组)：采用100 μmol/L CORM-2孵育1 h，而后用10 μmol/L ZnPP-Ⅸ孵育0.5 h，最后用10 μg/ml LPS孵育；Hemin＋ ZnPP-Ⅸ＋LPS组(HZL组)采用20 μmol/L Hemin孵育1 h，而后用10 μmol/L ZnPP-Ⅸ孵育0.5 h，最后用10 μg/ml LPS孵育。各组于培养或LPS孵育48 h时采用MTT检测细胞活力，采用Western bolt法检测HO-1、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)和线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达。结果与C组比较，其余6组细胞活力降低，HO-1、Drp1及Fis1表达上调(P<0.05)。与L组比较，CL组和HL组细胞活力升高，HO-1表达上调，Drp1及Fis1表达下调，ZL组细胞活力降低，HO-1表达下调，Drp1及Fis1表达上调(P<0.05)，CZL组和HZL组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。与CL组和HL组比较，ZL组细胞活力降低，HO-1表达下调，Drp1及Fis1表达上调(P<0.05)。结论HO-1/CO信号通路可抑制线粒体分裂，在LPS诱导大鼠AECⅡ损伤时发挥内源性保护作用。

简介：SAP时肠道黏膜屏障功能损伤所致的肠道菌群易位是胰腺感染的关键诱因^[1]，其机制主要是由于肠道黏膜屏障功能障碍引起肠道通透性增加，最终导致肠道细菌易位所致^[2]。上皮细胞间紧密连接蛋白Occludin在维持上皮细胞屏障功能方面具有重要作用。炎症状态下多种炎症因子可以影响Occludin的表达^[3]。因此，本文观察ANP大鼠Oeeludin蛋白表达的变化，旨在进一步明确SAP肠道黏膜屏障功能改变的机制。

简介：摘要目的探讨伴有脑膜上皮细胞样旋涡特征的去分化脂肪肉瘤（dedifferentiated liposarcomas with meningothelial-like whorls,DDLMW）的组织形态学、免疫组织化学及分子遗传学特征。方法收集江苏省人民医院（南京医科大学第一附属医院）2012年3月至2018年8月诊断为DDLMW的患者6例病历资料及存档切片，采用免疫组织化学染色检测MDM2、CDK4、p16等，应用荧光原位杂交（FISH）法检测MDM2基因扩增情况，并复习相关文献。结果患者男性3例，女性3例；4例发生于后腹膜，2例发生于纵隔，发病年龄范围40~77岁（中位年龄58岁）。大体表现为巨大单发或多发结节状肿块，镜下除了可见高分化脂肪肉瘤成分之外，均可见具有特征性的旋涡样结构，形态类似脑膜瘤；旋涡小体肿瘤细胞梭形或卵圆形，同心圆状致密排列，轻-中度异型性；此外，4例在旋涡小体的周围或中间可见化生性骨组织。免疫表型：肿瘤组织表达MDM2、CDK4、p16，不表达S-100蛋白、平滑肌肌动蛋白、SOX10、上皮细胞膜抗原、CD21、CD23、CD35；肿瘤细胞Ki-67阳性指数低。6例经FISH检测均显示肿瘤细胞伴有MDM2基因的扩增。结论DDLMW是一种罕见的去分化脂肪肉瘤的组织学亚型，特征性的旋涡状结构并不预示其有神经束膜或滤泡树突细胞的分化，认识并熟悉其存在结合免疫组织化学及MDM2基因FISH检测有助于其诊断与鉴别诊断。

简介：

简介：摘要目的检测大鼠肾小管上皮细胞是否表达CD131并探讨其在促红细胞生成素(EPO)抑制大鼠肾小管上皮细胞凋亡中的作用。方法传代培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E，将NRK-52E细胞随机分为正常对照组、高糖组、高糖+EPO组、高糖+EPO+Scramble siRNA组、高糖+EPO+EPO受体(EPOR) siRNA组(EPOR siRNA干扰组)及高糖+EPO+CD131 siRNA组(CD131 siRNA干扰组)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blot、免疫荧光检测NRK-52E细胞内EPOR及CD131的表达，免疫共沉淀(co-IP)检测EPOR、CD131在NRK-52E细胞内的结合情况。TUNEL法检测NRK-52E细胞凋亡情况，RT-qPCR、Western blot检测NRK-52E细胞内Caspase-3的表达情况。结果RT-qPCR、Western blot检测显示NRK-52E细胞表达EPOR和CD131，且高糖孵育后NRK-52E细胞内EPOR、CD131表达增高。免疫荧光检测显示EPOR和CD131在NRK-52E细胞内存在共定位表达，co-IP检测显示EPOR和CD131在NRK-52E细胞内存在相互结合。TUNEL检测显示，与正常对照组相比，高糖组NRK-52E细胞凋亡率显著增加。与高糖+EPO组相比，EPOR siRNA及CD131 siRNA干扰组NRK-52E细胞凋亡率显著增加。与正常对照组相比，高糖组NRK-52E细胞Caspase-3表达显著增高。通过siRNA干扰抑制EPOR、CD131表达后，EPO对Caspase-3表达的抑制作用减弱。结论大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E表达EPOR和CD131，且两者在NRK-52E细胞内可形成EPOR-CD131异二聚体，介导EPO抑制NRK-52E细胞凋亡。

简介：【摘要】目的 分析宫颈细胞p16免疫组化检查对不典型宫颈鳞状上皮细胞（ASC）的分流管理价值。方法 2019.01-2021.08本院就诊760例ASC患者，均结合宫颈有关细胞学检查明确诊断，同时取宫颈细胞开展p16免疫组化检查，统计p16阳性率。结果 ASC-US患者的p16阳性率于HSIL、LSIL、正常或者炎症反应组的分布情况差异显著（P＜0.05）。ASC-H患者的p16阳性率于HSIL、LSIL、正常或者炎症反应组的分布情况无显著差异（P＞0.05）。结论 结合宫颈细胞p16免疫组化检查结果能对ASC-US患者开展有效分流管理，优化阴道镜的转诊流程，HSIL检出效率较高，值得采用。

简介：摘要目的探讨双氢睾酮(DHT)浓度波动对前列腺上皮细胞(RWPE-2细胞系)中错配修复基因MutL同源物(MLH1)表达的影响及其机制。方法将RWPE-2细胞分为空白组，恒定组(DHT浓度为1、10 nmol/L)以及波动组(DHT浓度为1、10 nmol/L，每24 h波动1次)，以不同浓度的DHT干预不同的时间(0、24、48、72 h)，观察细胞的形态、生长状态及细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力；应用蛋白质印迹法(Western blot)、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测雄激素受体(AR)信号通路靶基因[前列腺特异抗原(PSA)、FK506结合蛋白(FKBP5)]、苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路靶基因[细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)]和MLH1基因表达的改变；免疫荧光法检测基因分布位置的变化。应用Graph Pad 7.0统计软件分析，组间差异采用t检验分析。结果恒定组与波动组中RWPE-2细胞形态学变化与DHT作用具有浓度(1～10 nmol/L)依赖性；CCK-8结果提示，72 h后，与空白组(6.904±0.143)比较，恒定组(7.073±0.103)、(8.508±0.187)与波动组(8.662±0.327)、(9.239±0.167)相对吸光度(A)值均增加，提示DHT干预增强细胞增殖，呈时间浓度依赖性(1～10 nmol/L)，差异有统计学意义(t＝6.805、4.922、10.6，P<0.01)；Western blot结果提示，与空白组比较，波动组与恒定组中各靶基因的mRNA及蛋白表达水平均上调，波动组较恒定组中上述基因表达进一步上调，波动组FKBP5基因较恒定组表达下调，差异有统计学意义(t＝5.488、15.730、7.976、3.695、3.952、2.830，P<0.05)；免疫荧光结果显示，与空白组比较，波动组和恒定组中各靶基因核内分布增多，且波动组上述基因分布差异更显著。结论DHT能上调RWPE-2细胞中错配修复基因MLH1的表达，而DHT波动会使这种趋势增加，通过AR和Akt信号通路介导的细胞增殖是其可能机制之一。

简介：摘要目的探讨达格列净对高糖诱导的HK-2细胞损伤的影响。方法将HK-2细胞分成4组：正常对照组（negative control，NC）、高糖模型组（high glucose group，HG）、达格列净组（dapagliflozin，CS-179）和阳性对照二甲双胍组（positive control，PC）。给药作用24 h后，通过CCK-8法检测细胞存活率；通过多功能酶标仪测定ROS、SOD、CAT活力和MDA含量；Western blot法检测Nrf2蛋白的表达情况。结果CCK8结果显示，高糖模型组细胞存活率为58.0%±0.8%，达格列净组为87.0%±0.4%，达格列净能明显提高HK-2细胞存活率，差异有统计学意义（P<0.01）。酶标仪检测发现，与高糖模型组对比（ROS：3.46±0.05，MDA：25.37±0.61，SOD：55.89±4.09，CAT：10.22±1.67），达格列净能降低高糖导致的ROS（1.97±0.04）和MDA（9.5±0.4）的蓄积（均P<0.01），提高SOD（114.95±4.19）和CAT（32.83±2.01）的活力（均P<0.01）；与高糖模型组中Nrf2蛋白表达量（0.26±0.03）对比发现，达格列净组中Nrf2蛋白（0.48±0.03）的表达明显升高（P<0.01）。结论达格列净可改善高糖诱导的HK-2细胞损伤，其作用机制可能是通过降低HK-2细胞氧化损伤，激活Nrf2来发挥保护作用的。

简介：摘要目的研究多瘤促活化因子3(PEA3)在高氧诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅱ)损伤中的作用及其机制。方法体外培养AEC Ⅱ，分为高氧组和常氧组。给予高氧或空气后24 h、48 h及72 h，收取各组细胞，选取最佳造模时间为48 h。将AEC Ⅱ分3大组：空白组、阴性对照组(转染空载)、过表达质粒组(转染PEA3)，每大组均分为高氧亚组和常氧亚组。给予高氧或空气后48 h，收取各组细胞。检测活性氧(ROS)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-18、表面活性物质蛋白C(SP-C)、水通道蛋白5(AQP5)、PEA3及锰超氧化物歧化酶(MnSOD)等。采用SPSS 20.0统计软件，数据比较采用t检验和重复测量方差分析。结果分组与时间的交互作用对AEC Ⅱ内ROS、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18、SP-C和AQP5均有显著影响(F＝19.857、20.132、23.133、18.673、28.341、27.333和34.217，均P<0.05)。在24 h、48 h和72 h，高氧组ROS分别是同时间常氧组的1.78倍、1.94倍和2.26倍(t＝18.649、17.486和19.385，均P<0.05)；NLRP3、MCP-1均明显增加；IL-1β、IL-6、IL-8和IL-18分别是同时间常氧组的1.33倍、1.69倍和1.65倍，1.26倍、1.56倍和2.12倍，1.13倍、1.47倍和2.34倍，1.46倍、1.72倍和1.95倍(均P<0.05)；SP-C蛋白表达明显减少，AQP5蛋白表达明显增加；SP-C核酸相对含量分别比同时间常氧组减少了22%、63%和72%，差异均有统计学意义(t＝3.982、16.328和20.259，均P<0.05)，AQP5核酸相对含量分别是同时间常氧组的1.92倍、5.23倍和7.36倍，差异均有统计学意义(t＝14.631、18.945和19.521，均P<0.05)。在24 h、48 h和72 h 3个时间点，高氧组ROS、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18、SP-C和AQP5比较差异均有显著差异(F＝22.343、20.566、23.701、19.222、32.146、40.278和37.107，均P<0.05)。在PEA3过表达48 h，与高氧阴性对照组相比，高氧过表达质粒组AEC Ⅱ内ROS降低了34%(t＝14.635，P<0.05); NLRP3、MCP-1均减少；IL-1β、IL-6、IL-8和IL-18分别降低了29%、22%、27%和18%(t＝15.895、17.872、18.749和15.274，均P<0.05)；SP-C增加，AQP5减少；PEA3和MnSOD均明显增加。结论PEA3过表达可能通过上调MnSOD蛋白表达，缓解高氧刺激后AEC Ⅱ内ROS增多和多种炎症通路激活，减少AEC Ⅱ向AEC Ⅰ转化，减轻高氧诱导的AEC Ⅱ损伤。

简介：摘要目的探究RNA结合蛋白FOX1(RBFOX1)在人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧(H/R)模型中对细胞氧化应激及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响。方法构建HK-2细胞缺氧/复氧(缺氧16 h，复氧4 h)模型，实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测RBFOX1的基因表达水平。将HK2细胞随机分为Control组、H/R组、H/R+NC组、H/R+RBFOX1组；Control组细胞正常培养，H/R+NC组和H/R+RBFOX1组分别转染对照质粒及RBFOX1过表达质粒后行缺氧/复氧处理。比色法检测各组细胞丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性；流式细胞仪检测各组细胞中活性氧(ROS)的含量；流式细胞术检测各组细胞凋亡水平；蛋白质印迹法(Western blot)检测各组RBFOX1、Nrf2、磷酸化Nrf2(p-Nrf2)及HO-1的蛋白表达水平。多组差异比较采用单因素方差分析，两两比较采用单样本t检验。结果RT-qPCR结果显示缺氧/复氧处理后的HK-2细胞RBFOX1基因的表达量低于Control组(0.357±0.022比1.000±0.000，t＝28.979，P<0.01)。Western blot结果也显示H/R组的RBFOX1表达量低于Control组(0.515±0.038比0.734±0.023，t＝4.955，P<0.01)。H/R+RBFOX1组RBFOX1(0.942±0.074比0.515±0.038、0.629±0.080，F＝10.932，P<0.05)、HO-1(0.839±0.068比0.638±0.033、0.622±0.052，F＝5.167，P<0.05)的蛋白表达水平及p-Nrf2/Nrf2比值(0.864±0.034比0.577±0.047、0.541±0.058，F＝13.896，P<0.01)明显高于H/R组和H/R+NC组，与Control组差异无统计学意义(P>0.05)。ROS流式检测结果表明H/R+RBFOX1组的活性氧水平明显低于H/R组和H/R+NC组[(5.25±0.10)%比(8.98±0.12)%、(9.76±0.21)%，F＝248.098，P<0.01]；MDA酶标仪检测结果显示H/R+RBFOX1组的MDA含量明显低于H/R组和H/R+NC组(3.506±0.098比5.034±0.087、5.176±0.089，F＝102.103，P<0.01)；SOD酶标仪检测结果显示H/R+RBFOX1组内的SOD活性高于H/R组和H/R+NC组(0.415±0.011比0.215±0.003、0.250±0.030，F＝32.681，P<0.01)。细胞凋亡流式检测结果表明H/R+RBFOX1组的细胞凋亡水平明显低于H/R组和H/R+NC组[(22.98±0.40)%比(28.70±0.68)%、(30.70±0.68)%，F＝44.029，P<0.01]，但高于Control组[(22.98±0.40)%比(4.84±0.43)%，t＝30.734，P<0.01]。结论RBFOX1在HK-2细胞缺氧/复氧损伤模型中具有抑制细胞氧化应激的作用，这一作用与Nrf2/HO-1信号通路有关。

简介：目的:探讨米非司酮对异位子宫内膜腺上皮细胞中多种凋亡基因、侵袭基因表达的影响。方法:本研究为双盲随机对照研究,选取78例子宫内膜异位症患者作为研究对象,随机分为米非司酮组与对照组,各39例。米非司酮组采用米非司酮+手术治疗,对照组仅行手术治疗,术后采用酶联免疫法检测两组侵袭基因、凋亡基因的蛋白表达量。结果:米非司酮组细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);异位子宫内膜腺上皮细胞中β-catenin、GSK3β、uPA、NF-κBp65、OPN等侵袭基因的蛋白表达量均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PTEN、Smac、Bax、Fas等促凋亡基因的蛋白表达量均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Ki-67、c-IAP1、Bcl-2、Livin、Id-1等凋亡抑制基因的蛋白表达量均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:米非司酮能够影响异位子宫内膜腺上皮细胞中多种侵袭、凋亡基因的表达,可下调侵袭基因的表达,抑制侵袭;上调促凋亡基因的表达以及下调凋亡抑制基因的表达,促进细胞凋亡。

简介：

简介：摘要目的探讨14－3－3σ基因在调控内毒素/脂多糖(LPS)引发人肺上皮细胞炎症反应中的机制。方法(1)取培养的对数生长期人正常肺上皮细胞BEAS－2B，按照随机数字表法分为对照组、PCMV6－14－3－3σ组，每组3孔。对照组细胞转染空载质粒，PCMV6－14－3－3σ组细胞转染PCMV6－14－3－3σ质粒。转染48 h，蛋白质印迹法检测细胞内14－3－3σ蛋白表达。(2)取培养的对数生长期人正常肺上皮细胞BEAS－2B，按照随机数字表法分为对照组、PCMV6－14－3－3σ组、PCMV6－14－3－3σ＋LPS组、LPS组，每组3孔。对照组细胞转染空载质粒孵育42 h，PCMV6－14－3－3σ组细胞转染PCMV6－14－3－3σ质粒孵育42 h，PCMV6－14－3－3σ＋LPS组细胞转染PCMV6－14－3－3σ质粒42 h后加入LPS(终质量浓度1 μg/mL，下同)刺激6 h，LPS组细胞仅加入LPS刺激6 h。蛋白质印迹法检测Bax、B淋巴细胞瘤－2基因(Bcl－2)的蛋白表达，计算两者比值；流式细胞仪检测细胞凋亡率；实时荧光定量反转录PCR技术检测细胞内肿瘤坏死因子α(TNF－α)、白细胞介素1β(IL－1β)mRNA表达量；酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中TNF－α、IL－1β含量。对数据行t检验、单因素方差分析、LSD检验。结果(1)与对照组(0.78±0.04)比较，转染48 h PCMV6－14－3－3σ组细胞14－3－3σ蛋白表达水平(1.05±0.03)明显升高(t＝5.41, P<0.01)。(2)与对照组比较，PCMV6－14－3－3σ组细胞Bax/Bcl－2比值、细胞凋亡率、TNF－α mRNA及IL－1β mRNA表达量、细胞上清液中TNF－α及IL－1β含量均无明显变化(P>0.05)，LPS组细胞上述指标均明显升高或增加(P<0.01)。与LPS组比较，PCMV6－14－3－3σ＋LPS组细胞上述指标明显下降或减少(P<0.01)。结论14－3－3σ是调控细胞凋亡的重要因子，通过调节凋亡调控因子Bax/Bcl－2比值，抑制人肺上皮细胞凋亡，从而减轻LPS诱导的炎症反应。