简介：为满足科研和医学应用上的需要，用基因工程的方法制备海蛇神经毒素。首先人工合成海蛇神经毒素Erabutoxin（Eb）的基因，重组到T载体。通过PCR扩增Eb基因，用限制性内切酶把基因片段酶切成黏性末端，然后将目标基因插入表达载体pPET22b（＋），电转重组质粒到宿主菌BL21（DE3），在25℃0．5mmol／LIPTG诱导培养8h收获培养物，SDS-PAGE电泳检测目标蛋白大部分存在于包涵体中，用8mol／L尿素溶解后，利用C末端的His-6与Ni^2＋离子亲和层析纯化，得到单一的电泳蛋白带。

简介：2005年9月至2006年4月间，在黑龙江铁力市及周边市、县、林业局、农场的饲养肉鸡户中，发生一种以咳嗽、流泪、呼吸锣音、下痢等为特征的传染病。因当地的兽医诊断经验不足或过于草率，误诊为大肠杆菌病，造成严重经济损失。后经笔者详细诊断，确诊为肉鸡慢性呼吸道病与大肠杆菌混合感染，现将防治情况介绍如下，以供参考。

简介：1发病情况辽宁省普兰店市沙包镇．养鸡户王某于2010年3月上旬从种鸡孵化场购进海塞克斯蛋雏鸡3000只．采用地面平养育雏，用稻草垫料、火炉采暖，3月17日由于气温突然变化，雏鸡出现精神异常，食量减少，

简介：目的研制一台可以应用于外科的臭氧冲洗仪，并进行臭氧对大肠杆菌的杀灭实验。方法在臭氧相关性质和臭氧技术的发展成果基础上，结合现代微处理器技术和集成电路技术，研制臭氧冲洗仪。使用PIC单片机进行硬件设计和软件编程。进行体外实验，配制5种不同浓度的大肠杆菌菌液，将臭氧气体作用于这些菌液。配制臭氧水，使用纸片法作用于大肠杆菌。观察实验结果。结果研制出了臭氧冲洗仪样机，仪器的运行情况良好。对5种浓度的菌液，臭氧气都能够实现很好的灭菌效果，灭活率均在40％以上。臭氧水对大肠杆菌抑菌的作用很明显，抑菌环直径为1.52cm，而对照组为0cm。实验验证了臭氧对大肠杆菌的杀灭效果。结论该仪器操作简便，为臭氧冲洗法的研究提供了很好的工具。但与进口仪器仍有差距，需继续改进研制的产品样机。

简介：[目的]确定大肠杆菌菌液刺激蝇蛆产生浓度高、活性强的抗菌肽时间和蝇蛆饲喂家禽的安全性。[方法]采用不同浓度的大肠杆菌菌液分别与麸皮混合饲喂蝇蛆，于10、24、48h分别收集存活蝇蛆并对其粗提取抗菌肽，

简介：2006年3月，我市某养殖场饲养的罗曼褐育成蛋鸡5000多只，于92日龄时突然发病，出现拉白、绿稀粪，并伴有呼吸道症状，采食量稍减，该养殖户凭经验按大肠杆菌治疗，用药三天后效果不明显，并且死亡率增加。根据临床症状，病理剖检及实验室检验，确诊为非典型性新城疫与大肠杆菌混合感染。经采取综合防治措施后，病情得到控制。现将诊治情况报道如下：

简介：应用多聚酶链反应(PCR)，直接从SIV感染的猴艾滋病(SAIDS)模型猴的外周血淋巴细胞总DNA中扩增出767bp的SIV核心蛋白P27基因片段。扩增产物经EcoRI及SalI双酶切后，克隆入相同酶切的表达质粒pBV^220中，获得含SIV核心蛋白基因片段的重组质粒pBVSG．并进行DNA序列分析，用该重组质粒转化大肠杆菌DHBa经筛选，增殖及42℃温度诱导，SDS—PAGE表明外源基因表达蛋白含量占菌体总蛋白14．5%，Western-blot证实表达产物能被SIVP27单克隆抗体及SAIDS模型猴血清中特异性抗体识别。

简介：2014年7月上旬，菏泽市牡丹区某饲养户饲养的21日龄、2100只雏鸭突然发病，出现昏睡、下痢、呼吸困难、死亡率高的症状。根据临床症状、剖检变化及实验室检查，确诊为鸭的曲霉菌与大肠杆菌混合感染，现将诊治情况报告如下。

简介：目的构建人卵细胞ZP3蛋白的原核重组载体并进行表达和鉴定。方法提取人卵巢中总RNA，逆转录合成cDNA，自行设计引物，PCR扩增ZP3蛋白编码序列，PCR产物经BamHI／NheⅠ双酶切后，克隆至表达载体pET—His中，在E．coliBL21-DE3中诱导ZP3融合蛋白的表达。结果在异丙基-β-硫代半乳糖苷（IPTG）的诱导下，重组菌高效表达出一个相对分子质量约为50000的产物。结论人卵细胞ZP3蛋白的全长编码序列已被克隆ZP3蛋白融合表达载体pET—His，并在E．coliBL21-DE3中获得高表达。

简介：摘要：目的：探讨分析实时荧光PCR检测腹泻患者肠致泻性大肠杆菌的分布。方法：此次研究，获取我院之中150例腹泻患者的粪便标本，并借助实时荧光PCR检测，对病原菌做检测，分析不同大肠杆菌分布情况。结果：150例样本中有肠致泻性大肠杆菌40例，检出率为26.67%；其中检出肠致病性大肠杆菌占比47.50%, 肠黏附性大肠杆菌占比 30.00% ；肠出血性大肠杆菌占比 12.50% ；肠产毒性大肠杆菌占比7.50%, 肠侵袭性大肠杆菌占比 2.50%；＜5岁患者致泻性大肠杆菌检出率较高。结论：腹泻患者的肠致泻性大肠杆菌检测中，以肠致病性、肠黏附性为主，年龄小于5岁患者致泻性大肠杆菌感染几率较高。

简介：仔猪大肠杆菌病病原为产肠毒素大肠杆菌,该菌致病力主要由粘附素性菌毛和肠毒素两类毒力因子构成,主要危害1周龄内的仔猪。仔猪大肠杆菌病三价灭活疫苗用分别带有K88、K99、987P纤毛抗原的大肠埃希菌,接种于适宜培养基上培养,将培养物

简介：肠出血性大肠杆菌是80年代初Rileg等发现的一种新的病原菌。目前已发现此菌株50多个血清型，其中90％以上为O157，这些菌株均产生对Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)有毒性作用的细胞毒素。除引起人类腹泻外并常导致3种严重并发症：(1)肠出血性结肠炎(HC)；(2)溶血性尿毒综合征(HUS)；(3)血栓形成血小板减少性紫癫(TTP)。为了摸清我国肠出血性

简介：摘要：本文选用青海省海北藏族地区某奶牛养殖基地的腹泻病死牛为研究对象，取其心脏、肝脏、脾脏、肺脏其进行大肠杆菌分离鉴定并进行药敏试验。结果显示，分离的菌株经过各个培养基的菌落形态、革兰氏染色显微镜镜检、生化试验结果可以确定为大肠杆菌；分离的大肠杆菌对阿米卡星、左氧氟沙星、头孢曲松钠、庆大霉素药物敏感；对氨苄青霉素、阿莫西林、卡那霉素、阿奇霉素、氟苯尼考药物中度敏感；对恩诺沙星、四环素、链霉素药物产生耐药。

简介：目的：融合表达结核分枝杆菌Rv3881c突变子抗原，以便与其他已知的免疫显性抗原联合使用，有效增加结核分枝杆菌感染血清学检验的敏感性和特异性。方法：将克隆的来源干结核分枝杆菌H37Rv株的Rv3881c突变体基因插入原核表达载体pET24b，并在大肠杆菌BL21中获得高效表达；由于重组的Rv3881c突变子抗原片段同C端的6xHis标签融合表达，使用Ni-柱进行快速纯化。结果：Western印迹表明，重组的Rv3881c突变子抗原同选取的6例结核病阳性临床血清标本均能发生明显的反应。结论：重组Rv3881c突变体具有较好的特异性，提示该抗原可能成为检测结核的有效抗原之一。

简介：【目的】分析尿路致病性大肠杆菌（uropathogenicEscherichiaeoli，UPEC）粘附素基因抽a与细菌生物膜形成的关系，探索细菌生物膜形成机制。【方法】采用结晶紫染色法检测临床分离的50株UPEC形成生物膜的能力，分别从生物膜阳性组与阴性组PCR扩增抽a基因，比较两组访a阳性率的差异。【结果】50株UPEC中34株能够形成生物膜。生物膜阳性组与阴性组中iha基因分布率分别为85．29％和56．25％，有显著性差异（P〈0．05）。【结论]UPEC形成生物膜是比较普遍的现象，粘附素基因iha与细菌形成生物膜存在相关性。

简介：利用氨基酸密码子的简并性及大肠杆菌中高表达真核基因时,转录起始区的结构特点:①在起始密码子ATG后使用富含嘌呤的密码子延长其mRNA同tRNA反密码子loop的互补;②通过应用富含A/U的密码子,避免mR-NA形成稳定的二级结构;③减少潜在的第二个Shine-Dalgarno序列。通过聚合酶链式反

简介：以琼脂稀释法对67株鸡源大肠杆菌及61株猪源大肠杆菌进行最低抑菌浓度（MIC）测定,并以SPSS分别进行卡方检验和Probit模型估算,分析不同来源大肠杆菌耐药差异显著性及不同抗生素的半数抑菌浓度（MIC50）,以期对不同畜禽粪便来源的大肠杆菌耐药差异进行详细准确的探讨。结果显示,鸡源大肠杆菌对头孢噻肟、诺氟沙星、环丙沙星和四环素耐药率分别为98.51%、68.66%、56.72%和100%,猪源大肠杆菌对头孢噻肟耐药率为88.52%,对诺氟沙星、环丙沙星和四环素则100%耐药。除四环素,鸡源、猪源大肠杆菌对诺氟沙星、环丙沙星、头孢噻肟的耐受差异显著（P〈0.05）,51%的鸡源大肠杆菌和89%的猪源大肠杆菌均呈4重耐药。SPSS分析结果表明,Probit模型估算结果优于当前MIC50常规计算方法,头孢噻肟、诺氟沙星、环丙沙星和四环素对鸡源大肠杆菌MIC50分别为40.031μg·mL^-1、40.020μg·mL^-1、2.683μg·mL^-1和101.418μg·mL^-1,对猪源大肠杆菌MIC50分别为8.724μg·mL^-1、56.044μg·mL^-1、31.214μg·mL^-1和130.915μg·mL^-1。回归方程显示环丙沙星对鸡源大肠杆菌抑制作用最强;高于40.031μg·mL^-1时,诺氟沙星抗菌作用弱于头孢噻肟,低于120.23μg·mL^-1时,诺氟沙星抗菌作用强于四环素;头孢噻肟、环丙沙星、诺氟沙星和四环素对猪源大肠杆菌的抑菌作用则呈递减趋势。同时验证了诺氟沙星和环丙沙星属同种作用机制,基于Probit模型计算更简单、快速、直观。研究结果可为畜禽养殖中大肠杆菌的耐药差异监控提供一定的数据基础。

简介：

简介：仔猪黄白痢是由埃希氏大肠杆菌引起的产房仔猪常见的肠道传染病之一,常在出生后数小时至断奶前发病,对仔猪的危害非常大,发病率高时可达90％以上,病死率可高达100％.大肠杆菌的血清型众多,无有效的疫苗可用来防治该病,目前,临床上主要使用抗生素药物来控制大肠杆菌病,但大肠杆菌极易产生耐药性,使用抗生素对该病的防治效果越来越差[2],据华南农业大学陈杖榴教授报告,发现一些新血清型大肠杆菌对常用的21种抗生素都有很高的耐药性,基本上是一种“超级细菌”,另外由于广泛、大量、长期不规范的使用抗生素所导致的药物残留和一些药源性疾病,严重威胁着动物源性食品安全和公共卫生[2].

简介：目的研究和比较大肠杆菌OmpA信号肽衍生多肽P-KKK在体外对不同细菌的杀菌效应。方法采用琼脂铺板计数法测定衍生多肽P-KKK对革兰阳性（G＋）菌和革兰阴性（G-）菌的杀菌活性,将不同浓度的衍生多肽P-KKK分别与3种G＋菌（金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、枯草芽孢杆菌）和3种G-菌（大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌、绿脓杆菌）在37℃孵育2h,铺板后置于37℃中培养18-24h,记录每一琼脂板上菌落形成数量（CFU）,计算多肽P-KKK的杀菌率。结果衍生肽P-KKK对G＋菌具有较强的杀菌活性,浓度在200ug/mL时,能杀灭98.5%以上的G＋菌,浓度为40ug/mL时杀菌率也达80.2%以上;对G-菌也有较强的杀菌活性,浓度在200ug/mL时,能杀灭93.8%以上的G-菌,浓度为40ug/mL时杀菌率也达15.2%-99.7%。结论大肠杆菌OmpA信号肽衍生肽P-KKK对G＋菌及G-菌均具有明显的杀菌活性,进一步对其结构与功能进行研究将有助于开发出新型抗菌药物。