简介:摘要目的对多重实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)进行反应体系筛选和方法探索,使其用于G1—G4型轮状病毒VP7基因的快速分型和定量分析。方法设计G1—G4型轮状病毒VP7基因特异性引物和探针,以特异性体外转录RNA为模板,筛选多重qPCR反应体系,建立多重qPCR方法。采用单因素方差分析和配对样本t检验对多重与单重qPCR检测结果进行比较。结果经筛选,得到6组三重qPCR反应体系和1组四重qPCR反应体系。所建立的三重和四重qPCR中,除四重qPCR的G1型参数〔标准曲线决定系数(R2)为0.982、扩增效率为89.221%〕略低于要求外,其余标准曲线R2均>0.99,扩增效率均在90%至110%之间;检测灵敏度达102拷贝/μl。多重与单重qPCR检测同一样本的相关性较好(R2>0.95)。三重与单重qPCR(t值为1.420~25.786)、四重与单重qPCR(t值为2.505~4.851)检测结果间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论建立的多重qPCR可同时对3种以上目的基因进行分型和定量检测,为未来多价轮状病毒疫苗及混合病毒样本中毒株的快速分型和定量检测方法的建立提供了借鉴。
简介:摘要目的应用液质联用(LC-MS/MS)技术,建立农产品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的定量检测方法,对市场中的农产品进行分析。方法样品粉碎后经乙腈水(84+16)提取,不经免疫亲和柱净化,氮吹浓缩定容后过0.22μm滤膜。滤液经反向C18柱分离,以0.1%甲酸水-甲醇作流动相梯度洗脱分离4种黄曲霉毒素。质谱采用电喷雾离子化源(ESI),正离子模式扫描。结果4种毒素在各自的定量范围内均呈良好的线性关系,r>0.990,回收率>80%,且与经免疫亲和柱净化相比,具有较高的回收率。结论该方法具有简便、快速、经济、灵敏、准确等优点,适用于多种农产品中黄曲霉毒素的检测。
简介:摘要目的总结胰腺内副脾(IPAS)与G1级神经内分泌肿瘤(PNENs)的MRI特征,明确两者的影像学征象。方法回顾性分析2013年1月至2019年12月间海军军医大学第一附属医院收治的11例经手术病理或99mTc热变性红细胞显像证实的IPAS患者和9例经手术病理证实的发生在胰尾的G1级PNENs患者资料。观察IPAS组和PNENs组病灶的MRI特征,包括病灶形态、大小、是否突出于胰腺轮廓之外、是否囊变、平扫T2WI信号、DWI信号、多期强化方式及有无假包膜等,比较两组病灶表现特征的差异。结果IPAS组和PNENs组在病灶突出于胰腺轮廓之外、T2WI及DWI信号、多期强化方式、假包膜的差异上均有统计学意义(P值均<0.05)。PNENs组病灶(9/9)较IPAS组病灶(3/11)更容易突出于胰腺轮廓之外;PNENs组病灶T2WI及DWI信号略高于IPAS组病灶,其T2WI、DWI高信号占比分别为6/9、4/9,而IPAS组均为0;PNENs组病灶多期强化更倾向于强化范围前后一致(6/9),而IPAS组病灶则以强化范围前后不一为主(10/11);PNENs组病灶增强后均可见假包膜,IPAS组病灶增强后均无假包膜。结论病灶突出于胰腺轮廓之外、T2WI及DWI信号特点、多期强化方式及假包膜是IPAS与G1级PNENs的重要鉴别征象。
简介:目的观察细胞周期素G1(cyclinG1)在三阴乳腺癌和非三阴乳腺癌中的差异表达,探讨cyclinG1与三阴乳腺癌患者临床病理特征的关系及其对预后判断的指导意义.方法收集2003年1月-2008年10月间,沈阳军区总医院的78例女性乳腺癌手术切除组织及患者的相关临床病理资料进行免疫组织化学染色及结果判定.在这78例乳腺癌组织中随机选取22例乳腺癌及其癌旁组织抽提RNA,进行转录水平的分析实验.结果cyclinG1在乳腺癌组织中的表达显著高于癌旁组织,乳腺癌组织中cyclinG1高表达者总体生存率低于低表达者(P〈0.05),cyclinG1高表达的三阴乳腺癌患者预后最差,乳腺癌中cyclinG1表达相对于总体生存率为独立的预后因子.结论cyclinG1在乳腺癌中高表达,且其表达水平与乳腺癌的分子分型及临床预后密切相关,是乳腺癌尤其是三阴乳腺癌潜在的预后判断指标.