简介：目的：构建和鉴定靶向E2F-1基因的RNA干扰慢病毒载体。方法：体外合成两对互补并编码靶向E2F-1基因的特异性短发夹RNA（shorthairpinRNA,shRNA）序列和一个阴性对照组的寡核苷酸,克隆到pLKO.1-PURO-U6（AgeI/EcoRI）质粒载体中,经酶切和测序鉴定所构建的重组载体是否正确,将以上质粒分别和包装质粒混合物共转染293T细胞,包装产生病毒颗粒。各组病毒载体转染Tca8113细胞后,运用Real-TimePCR和Western检测三组E2F-1mRNA和蛋白的表达水平。结果：经酶切和测序证明,pLKO.1-PURO-U6-E2F-1shRNA序列正确;转染后,各组慢病毒载体中,第一组质粒感染后的Tca8113细胞中E2F-1基因的核酸电泳条带明显减弱,Western检测出E2F-1蛋白的表达降低。结论：靶向E2F-1基因的shRNA慢病毒载体构建成功,并可特异性沉默E2F-1基因的表达,为研究E2F-1在口腔鳞癌的发生发展中的作用提供了初步的实验基础。

简介：PC游戏中，恐怖类动作游戏，特别是射击游戏，可算是历史最为悠久的游戏类别之一。如《DOOM》、《QUAKE》等启蒙时代的经典游戏，都带有浓重的恐怖要素，而类似于《网络奇兵》系列的作品，更是凭借光影与音效的出色运用，接连不断地挑战玩家的神经。不过个人而言，笔者对此类型的游戏并不特别钟爱，最重要的原因还是没胆量。《网络神兵2》，一款在各方面都堪称优秀的作品，然而对于笔者来说却是15分钟的体验，外加事后好几天的神经衰弱。

简介：Objective:ToinvestigatetheexpressionofE2FandBcl-2andtheclinicopathologicalsignificanceinhepatocellularcarcinoma.Methods:TheexpressionsofE2F-3andBcl-2in74patientswithhepaticcarcinoma,paracarcinomaand15patientswithlivercirrhosisweredetectedbyS-Pimmunohistochemicalstaining.Results:TheexpressionofE2Finhepaticcarcinomawassignificantlyhigherthanthatinparacarcinomaorlivercirrhosis(P<0.005),theexpressionofBcl-2inhepaticcarcinomawassignificantlyhigherthanthatinparacarcinoma(P<0.005),inwhichBcl-2expressionwaslowerthaninlivercirrhosis(P<0.05).TheexpressionofE2F-3wasrelatedwithhistologicalgrade,tumorsize,andtheexpressionofBcl-2wasrelatedwithhistologicalgrade,tumorsizeandtumornumber.TherewascorrelationbetweentheexpressionofE2F-3andBcl-2inhepaticcarcinoma.Conclusion:E2F-3andBcl-2expressionmayplayanimportantroleindevelopment,progressionandcellapoptosisoftumor.

简介：竞争性寡聚脱氧核糖核酸识别转录因子的DNA结合域,抑制了转录因子对基因的转录调控,转录因子E2F作为潜在的治疗靶点,可以用于抑制肾小球系膜细胞和血管内皮细胞的增生,在部分异常增生的疾病中显示了一定的应用前景.

简介：摘要LINC01018和CDK6均与恶性肿瘤的发生发展相关。恶性肿瘤中LINC01018表达下调、CDK6上调，且与恶性程度有关；生物信息学提示CDK6启动子存在E2F1结合位点，而LINC01018与E2F1可能有相互作用。由此推测，恶性肿瘤中LINC01018表达降低，LINC01018与E2F1相互作用后活化E2F1，促进CDK6转录激活，影响肿瘤增殖、侵袭和转移，从而揭示恶性肿瘤发生发展及调控的分子机制，为其治疗提供新思路和证据。

简介：摘要LINC01018和CDK6均与恶性肿瘤的发生发展相关。恶性肿瘤中LINC01018表达下调、CDK6上调，且与恶性程度有关；生物信息学提示CDK6启动子存在E2F1结合位点，而LINC01018与E2F1可能有相互作用。由此推测，恶性肿瘤中LINC01018表达降低，LINC01018与E2F1相互作用后活化E2F1，促进CDK6转录激活，影响肿瘤增殖、侵袭和转移，从而揭示恶性肿瘤发生发展及调控的分子机制，为其治疗提供新思路和证据。

简介：摘要目的探究E2F2基因在子宫内膜癌中的表达及与生物学行为的相关性。方法选择2015年3月至2018年4月本院妇科获取的30例正常子宫内膜标本、25例子宫内膜增生标本及73例子宫内膜癌组织纳入研究。采用RT-PCR及链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法测定3种组织E2F2 mRNA表达情况，并分析子宫内膜癌组织E2F2蛋白表达与临床病理参数之间的关系。结果子宫内膜癌组织E2F2 mRNA表达量高于子宫内膜增生组织及正常子宫内膜组织，差异有统计学意义(P<0.05)；正常子宫内膜、子宫内膜增生及子宫内膜癌组织E2F2蛋白阳性表达率分别为10.00%、16.00%及52.05%，组间比较差异有统计学意义(P<0.05)；国际妇产科联盟(FIGO)分期为Ⅲ～Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移及肌层浸润≥1/2的子宫内膜癌患者E2F2蛋白阳性表达程度显著高于FIGO分期为Ⅰ～Ⅱ期、高分化、无淋巴结转移及肌层浸润<1/2的患者(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织E2F2表达上调，其表达程度与患者FIGO分期、分化程度、淋巴结转移及肌层浸润相关。

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简介：瞄准：在主要hepatocellular癌(HCC)探索E2F5的表示模式并且阐明在hepatocarcinogenesis的E2F5的角色。方法：E2F5表示被immunohistochemistry分析在120主要HCC和29正常的肝纸巾分析。E2F5小的介入RNA是进HepG2的transfected，一根E2F5-overexpressedHCC房间线。在E2F5以后击倒，细胞生长能力和移居的潜力被检验。结果：E2F5是显著地在主要HCC的overexpressed与正常的肝纸巾相比(P=0.008)。显著地显示出的沉默E2F5的房间减少了增长(P=0.004)。在殖民地形成和软琼脂试金上，殖民地的数字显著地在沉默E2F5的房间被减少(P=0.004并且P=0.009，分别地)。E2F5击倒导致了G0/G1阶段房间和S阶段房间的减小的累积。移居/入侵房间的数字也在E2F5以后被减少击倒(P=0.021)。结论：到我们的知识，这是E2F5是的第一条证据通常在主要HCC和那E2F5的overexpressed击倒显著地镇压了HCC房间的生长。

简介：摘要目的本文旨在研究SKA1是否是调节肝癌恶性增殖的一个关键分子，并进一步探究其机制，为后续靶向治疗提供分子理论基础。方法通过生物信息学技术分析来自TCGA数据库中的肝癌数据，分析了SKA1在肝癌中的表达量，同时，我们还分析了SKA1的表达与肝癌患者预后的关系。采用基于脂质体介导的细胞转染技术，构建过表达SKA1的肝癌细胞系，并进一步采用CCK-8及平板克隆试验检测SKA1对肝癌细胞增殖能力的影响。采用生物信息学技术对SKA1及E2F1表达相关性进行分析，进一步检测E2F1在SKA1启动子区域的结合位点，并采用双荧光素酶技术检测E2F1对SKA1的转录激活作用。结果SKA1在肝癌组织中高表达，且SKA1高表达的肝癌患者的总体生存率（49.8%）比SKA1低表达患者低（69.4%），二者呈负相关。与此同时，E2F1也在肝癌组织中呈高表达，且E2F1高表达肝癌患者生存期显著低于低表达组，与不良预后呈负相关。SKA1过表达可将肝癌细胞的增殖能力提升近50%，SKA1受E2F1转录因子调控，且E2F1转录因子与SKA1启动子结合，转录激活SKA1在肝癌细胞中的表达。结论E2F1转录激活SKA1促进肝癌细胞增殖，导致肝癌患者预后不良。

简介：Thereisagrowingsupportforthelowlyingscalarmesonsf0(500),f0(980),a0(980),and(800)tobegenerateddynamicallyfromtheinteractionofpseudoscalarmesons,whilethecaseofthenextsetofscalarresonancesathigherenergies,f0(1370),f0(1710),K0(1430)ismoreaquestionofdebate.Soisthecaseofthetensorresonancesf2(1270),f′2(1525),K2(1430).AnewperspectiveonthesestateshasbeenofferedinRef.[1]wherethef0(1370)andf2(1270)resonancesareshowntobegeneratedfromtheinteractionprovidedbythelocalhiddengaugeLagrangiansimplementingunitarization.Itisshownthattheideaofthenatureofthesestatesasvectormeson-vectormesoncompositestateshasbeentestedinmanyreactions.Yet,thepermanentdiscussionoftheissuedemandsextrachecksforotherobservablesand,inthissense,theweakdecaysbringanewsourceofvaluableinformationthatshouldservetotestdifferentmodels.

简介：Objective:Tostudytheexpressionofactivatedepi-dermalgrowthfactorreceptor(EGFR)andtranscrip-tionfactorE2F(E2F)inCondylomaAccuminata(CA)patients.Methods:ImmunofluorescenttechniqueswereusedtoinvestigatetheexpressionofactivatedEGFRandE2FinCApatients.Results:TheexpressionofactivatedEGFRonthemembraneofepithelialcellsinCAlesionswassig-nificantlygreatercomparedtoexpressionleversinthecontrolgroup(P<0.01).Moreover,theco-expres-sionofactivatedEGFRandE2Fwassignificantlyin-creasedcomparedtothecontrolgroup(P<0.01).Conclusion:Ourobservationssuggestthatthein-creaseinactivatedEGFRexpressionmaystimulatehyperplasiainCApatientsthroughtheactivationoftranscriptionfactorE2F.

简介：LetB(E,F)bethesetofallboundedlinearoperatorsfromaBanachspaceEintoanotherBanachspaceF,B+(E,F)thesetofalldoublesplittingoperatorsinB(E,F)andGI(A)thesetofgeneralizedinversesofA2B+(E,F).InthispaperweintroduceanunboundeddomainW(A,A^+)inB(E,F)forA2B+(E,F)andA^+2GI(A),andprovideanecessaryandsufficientconditionforT2W(A,A^+).Thenseveralconditionsequivalenttothefollowingpropertyareproved:B=A^+(IF+(T??A)A^+)??1isthegeneralizedinverseofTwithR(B)=R(A^+)andN(B)=N(A^+),forT2W(A,A^+),whereIFistheidentityonF.Alsoweobtainthesmooth(C￥)diffeomorphismMA(A^+,T)fromW(A,A^+)ontoitselfwiththefixedpointA.LetS=fT2W(A,A^+):R(T)\N(A^+)=f0gg,M(X)=fT2B(E,F):TN(X)R(X)gforX2B(E,F)g,andF=fM(X):8X2B(E,F)g.UsingthediffeomorphismMA(A^+,T)weprovethefollowingtheorem:SisasmoothsubmanifoldinB(E,F)andtangenttoM(X)atanyX2S.ThetheoremexpandsthesmoothintegrabilityofFatAfromalocalneighborhooldatAtotheglobalunboundeddomainW(A,A^+).Itseemstobeusefulfordevelopingglobalanalysisandgeomatricalmethodindifferentialequations.

简介：Epigenetic因素，包括的改变的microRNA(miRNA)表示，可以在全身的豺狼座erythematosus(SLE)贡献异常有免疫力的房间功能。MiRNA-let-7a(let-7a)被显示了直接改变房间周期前进和proinflammatorycytokine生产。由于在房间分割和发炎的let-7a的关键角色，我们调查了let-7a-mediated增长和NFκ；在J774A.1巨噬细胞和MES的Btranslocation在vitro的13个mesangial房间。在有let-7a的刺激免疫者的房间transfected，房间增长显著地随着时间的过去被增加。在S和G2阶段的刺激免疫者的房间的数字有重要增加。刺激免疫者的房间overexpressinglet-7a增加了NFκ的原子translocation；B。Bioinformatical分析表明E2F家庭，G1-S转变的批评管理者，在他们的mRNA抄本为let-7a有潜在的有约束力的地点。Let-7aoverexpression显著地增加了房间周期使活跃之物E2F2的表示并且在刺激免疫者的房间增加了retinoblastoma蛋白质(Rb)phosphorylation。房间周期禁止者E2F5显著地在刺激免疫者的let-7a-transfected房间被减少。Bioinformatical分析揭示了E2F2和NFκ；B是预言调整let-7a倡导者的抄写因素。我们与E2F2和NFκ用染色质immunoprecipitation由即时RT-PCR分析了let-7a的transcriptional规定；B抗体。E2F2和NFκ有增加；在在刺激免疫者的房间为let-7a倡导者充实的DNA的B绑定。SilencingE2F2或NFκ；B显著地减少了在刺激免疫者的房间的let-7a表示和IL-6生产。一起拿，我们的结果建议let-7a的overexpression可以在SLE贡献增生和proinflammatory反应。

简介：摘要目的探讨全反式维甲酸（ATRA）对骨肉瘤143B细胞增殖和侵袭的影响及其可能的调控机制。方法采用不同浓度ATRA处理人骨肉瘤143B细胞，选取影响细胞增殖的最佳浓度和处理时间。分别采用MTS法、Transwell迁移和侵袭实验检测ATRA处理后143B细胞增殖、迁移和侵袭能力变化。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质印迹法检测ATRA处理后骨肉瘤143B细胞中miRNA-34a（miR-34a）、E2F1和Eag1的表达变化。干扰miR-34a和过表达E2F1，检测143B细胞增殖、侵袭和迁移能力以及miR-34a、E2F1和Eag1表达的变化。结果ATRA浓度为10 μmol/L、处理72 h对143B细胞增殖的抑制作用最明显。10 μmol/L ATRA作用72 h的迁移细胞数、侵袭细胞数均低于阴性对照组[（73±3）个比（182±5）个，t=21.46，P<0.01；（94±3）个比（203±7）个，t=13.70，P<0.01]。10 μmol/L ATRA可促进143B细胞中miR-34a的表达，抑制Eag1和E2F1的表达（均P<0.01）。与ATRA组比较，处理72 h后ATRA+miR-34a干扰组可恢复细胞的增殖能力[细胞存活率（41.0±2.2）%比（25.0±3.6）%，t=108.68，P<0.01]。与ATRA组比较，ATRA+miR-34a干扰组可恢复细胞的迁移和侵袭能力[（122±14）个比（64±10）个，t=21.06，P<0.01；（103±10）个比（59±8）个，t=24.27，P<0.01]，并可促进细胞中Eag1和E2F1的mRNA和蛋白表达（均P<0.01）。与ATRA组相比，ATRA+E2F1过表达组可恢复细胞的增殖能力[细胞存活率（40.0±3.4）%比（24.0±3.1）%，t=108.74，P<0.01]，可恢复细胞迁移和侵袭能力[（78±12）个比（29±8）个，t=13.52，P<0.01；（75±12）个比（49±10）个，t=6.28，P<0.01）]，并促进细胞中Eag1和E2F1的mRNA和蛋白表达（均P<0.01）。结论ATRA通过调控miRNA-34a-E2F1-Eag1信号通路抑制骨肉瘤细胞增殖和侵袭，其可能成为骨肉瘤有效的治疗药物之一。

简介：目的构建含有人E2F2基因和绿色荧光蛋白基因（pEGFP）的腺病毒载体,为聋病的基因治疗奠定实验基础。方法根据已知的E2F2基因序列设计并合成相应的双链DNA,将其与酶切线性化的pDC315-EGFP载体片段连接,构建穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2,并将其与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组产生重组腺病毒。对重组腺病毒进行扩增、纯化及滴度测定,用聚合酶链反应和测序方法验证穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2穿梭质粒的构建;通过荧光显微镜和Westernblot（蛋白质印迹）方法,分别检测质粒pDC315-GFP-E2F2和重组腺病毒表达E2F2蛋白情况。结果经聚合酶链反应鉴定和测序分析,证实穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2与设计一致;经荧光显微镜检测,分别由穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2、重组腺病毒转染的HEK293细胞均可观察到GFP表达;经WesternBlot检测出在72kDa～95kDa处有条特征带,其大小和E2F2-GFP融合蛋白（～76kDa）相吻合;滴度测定为1×1011PFU/ml（PFU,plaqueformingunit,空斑形成单位）。结论成功构建了人E2F2基因重组腺病毒载体,并能在HEK293细胞中表达。

简介：肾癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤，发病率较高，约占全身恶性肿瘤的4．2％。50％以上的肾癌患者早期并无特异性症状，发现时多已进入中晚期，而且约1／3的患者已有转移。转移后肾癌患者预后尤其不佳，5年生存率仅有10％。为了明确肾癌侵袭转移的相关分子机制，我们对转移性。肾透明细胞癌（clearcellrenalcaicinoma,ccRCC）患者样本进行了基因芯片筛选，发现一种在人类很多肿瘤的发生和转移过程中都发挥着重要作用的肿瘤抑制因子——KLF6，其在原发性转移性CCRCC中表达下调。

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