简介：随着生物技术的发展,DNA疫苗的研究也进展迅速.DNA疫苗就是将重组的带有外源的抗原基因的质粒或病毒DNA直接注射到动物体内,从而使外源基因在活体内表达,产生的相应的抗原激活机体的免疫系统,引起免疫反应.DNA疫苗多价疫苗相对于一二代疫苗具有更加安全、稳定、可同时诱导广泛的体液免疫和细胞免疫应答及不受母源抗体的影响等一系列优点.随着对DNA疫苗研究的不断进步,DNA疫苗在21世纪第三代疫苗免疫预防方面将会发挥越来越重要的作用.本文着重介绍DNA疫苗的进展与动态.

简介：单纯疱疹病毒（HSV）感染是人类一种常见病、多发病。目前主要的治疗方法为全身及局部抗病毒治疗,能使病情得到不同程度的控制,但远没有达到根治及控制传播的目的,因此通过抗HSV疫苗的接种,诱导针对病毒的特异性自动免疫是最有效途径,尤其是DNA疫苗,更是今后重要的研究方向。

简介：自英国乡村医生Jenner用牛痘疫苗预防天花取得成功以来，疫苗作为一种有效的免疫预防剂在临床应用已有200多年历史。20世纪九十年代，Wolff等偶然发现给小鼠肌注编码基因的重组质粒(细菌染色体以外的环状双链DNA)后，可在体内检测到编码蛋白，同时诱导机体产生了特异性免疫

简介：DNA疫苗是一种新型疫苗。文章简要介绍了DNA疫苗的构建、作用机理、接种方法，并对DNA疫苗在水产上的应用做了展望。

简介：摘要DNA疫苗能够诱导机体产生特异性体液和细胞免疫反应，基于白血病抗原而设计的DNA疫苗，有可能促进机体的抗肿瘤免疫应答能力，而消除微

简介：本文介绍了阳离子脂质体、聚合胺、减毒侵袭性细菌、Cochleates等可介导疫苗DNA转染的载体，并对肌肉注射、基因枪导入、皮内皮下注射及粘膜接种等可用以DNA疫苗接种的几种免疫途径作一简述。

简介：

简介：预防与控制乙型肝炎发病的乙型肝炎病毒(HBV)疫苗，是有重大的社会和经济意义。HBV的持续感染可引起慢性肝脏疾患，并逐步发展为肝硬化和肝细胞癌(HCC)。目前的乙肝重组亚单位疫苗可以使90％的接种者产生保护性抗体；但是对慢性HBV携带者，由于其机体对HBsAg蛋白产生耐受，不能产生体液和细胞免疫，因此它只能作为一种预防性的疫苗。DNA疫苗(基因疫苗)是一种新的疫苗技术，通过向体内递送编码抗原的细菌质粒，刺激产生特异的体液和细胞免疫反应。在小鼠和其他的肝炎病毒感染动物模型中，HBVDNA疫苗可以特异性地引起体液和细胞免疫，清除HBV转基因动物血循环中的HBsAg颗粒和HBVDNA。如果加入各种免疫调节细胞因子的基因，可以进一步提高HBVDNA疫苗的免疫效果，因此它不仅可作为预防性疫苗，也可作为治疗型疫苗。

简介：细胞因子是机体细胞（主要指免疫细胞）产生的一类具有广泛生物学活性的异质性肽类调节因子，在体内能激活免疫活性细胞，对免疫应答的产生和调节有重要作用。近年来，大量研究表明细胞因子可作为DNA疫苗佐剂来增强疫苗的免疫效果。简要综述了细胞因子作为DNA疫苗免疫佐剂的研究进展。

简介：目的：探讨PEI作为免疫佐剂对G250抗原肽基因PVAX1/C-G250肽-C免疫保护效果的增强作用及联合应用CAIX蛋白疫苗进行PRIME—BOOST免疫程序免疫增强效果。方法：用EcoRI、XhoI和EcoRI、SalI分别双酶切PVAX1及既往构建的pET28a（＋）/C-G250肽-C质粒。利用DNA重组技术构建重组质粒PVAX1/C-G250肽-C,酶切分析鉴定。大量提取质粒并分光光度计测质粒含量。将32只雌性昆明小鼠随机分为（A）裸DNA组,（B）DNA-PEI复合物组,（C）DNA-PEI＋蛋白疫苗组,（D）空白对照组。按0,10,20,30天程序经股四头肌注射免疫。C组在第20天及第30天进行蛋白冲击。初次免疫前和第40天鼠尾取血,ELISA法检测抗体滴度。流式细胞术测淋巴细胞亚群CD4＋和CD8＋。结果：酶切及基因测序鉴定证实G250抗原肽cDNA正确插入PVAX1/C-G250肽-C真核表达的重组质粒中。昆明小鼠经4次免疫后,3个实验组都产生了特异性的体液和细胞免疫反应,B组的抗体滴度1：1.28×104及CD4＋、CD8＋达26.12%和12.60%,明显高于A组的1：3.2×103和CD4＋,CD8＋占到19.32%和10.74%。而蛋白冲击组的1：5.12×104和CD4＋,CD8＋占到41.96%和15.14%,明显高于B组（P〉0.05）。结论：成功构建重组质粒PVAX1/C-G250肽-C。该DNA疫苗与PEI和G250蛋白疫苗联合使用后产生极强的免疫原性,诱导产生了高滴度、高特异性抗体及细胞免疫反应。证实G250DNA疫苗联合PEI使用并进行蛋白疫苗冲击的免疫策略可产生强大的免疫保护作用。为恶性肿瘤的术后辅助治疗提供新的思路和方法。

简介：摘要目的比较可表达产生病毒样颗粒（virus-like particle，VLP）的CHIKV DNA疫苗与CHIKV181/clone25减毒活疫苗在小鼠中的免疫应答与保护效果。方法C57BL/6n小鼠分别用CHIKV DNA疫苗20 μg以肌肉注射加电转的形式免疫2次，CHIKV181/clone25减毒活疫苗105 PFU以皮下注射的形式免疫2次，阴性对照以50 μLPBS皮下注射免疫2次，在每次免疫后的第14 d进行体液免疫和细胞免疫检测。在末次免疫后第4周进行CHIKV Ross攻毒实验。结果CHIKV DNA疫苗免疫后诱导的特异性细胞免疫反应和特异性抗体反应均高于CHIKV 181/clone25减毒活疫苗。在CHIKV Ross致死性攻击后，DNA疫苗与CHIKV181/clone25减毒活疫苗均可保护小鼠免于死亡。结论DNA疫苗20 μg与CHIKV181/clone25减毒活疫苗105 PFU均可有效预防小鼠CHIKV感染，但DNA疫苗诱导更高水平的体液免疫反应和细胞免疫反应。

简介：进行了HA基因的DNA重组体pV—HA及融合HA—minigene基因的DNA重组体PHA—minigene的表达研究，测定了其凝血活性，并利用荧光示踪，间接免疫荧光等方法对其进行鉴定，鉴定结果表明：构建DNA重组体成功，且在哺乳动物细胞离体实验中检测到重组体的表达。

简介：目的通过对荷瘤裸小鼠进行异种基质金属蛋白酶-2（c-MMP-2）DNA疫苗联合伽玛刀（γ-刀）治疗胶质瘤，观察二者的协同治疗作用，并对其作用机制进行初步探讨。方法制备纯化c-MMP-2DNA疫苗，裸鼠腋下注入大鼠C6胶质瘤细胞株1×10^6／只，建立裸鼠胶质瘤动物模型，待肿瘤长至约1cm（接种后第16d）开始治疗。γ-刀治疗以50％的等剂量曲线覆盖，边缘剂量13Gy；异种MMP-2DNA疫苗治疗组小鼠自荷瘤后次日开始后肢肌肉注射c-MMP-2DNA疫苗（1mg／ml），100μl／次，每周一次，连续4W。观察瘤体大小、测量肿瘤重量；免疫组化法测肿瘤组织微血管密度；末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口标记法（TUNEL）检测各组肿瘤细胞凋亡指数；HE染色观察重要器官组织坏死情况。结果异种MMP-2DNA疫苗联合γ-刀治疗胶质瘤能明显抑制肿瘤组织的生长，并延长荷瘤小鼠的生存期，与其他3组比较，联合治疗组免疫组化显示小鼠的肿瘤组织中微血管密度明显减少；TUNEL显示凋亡指数明显增多。结论c-MMP-2DNA疫苗联合γ-刀治疗能够抑制肿瘤生长、抑制肿瘤血管生成，二者的联合应用具有协同效应，是一种独特的抗肿瘤治疗途径。

简介：

简介：1990年第1次报道了编码外源抗原的裸露质粒DNA（nakedplasmidDNA）注射小鼠后可以在体内表达抗原基因。尔后，一系列动物实验证明DNA疫苗能诱导针对其所编码抗原的体液或细胞免疫。由于DNA疫苗免去了烦琐的蛋白质表达与纯化步骤，更重要的是，基因在体内的表达及诱导免疫的过程，模拟了自然状态下机体感染外源病原生物表达抗原及诱导免疫的过程。因此，DNA疫苗系统一经建立，便很快成了抗感染、抗肿瘤免疫等领域的研究热点。

简介：摘要目的分析广西汉族儿童IFNG基因DNA甲基化与乙型肝炎（乙肝）疫苗（HepB）免疫应答水平的关联性。方法采用非匹配病例对照方法，招募广西3家医院就诊的263名已完成HepB免疫程序的8~9月龄汉族儿童作为研究对象，将乙肝表面抗体浓度（抗-HBs）<100 mIU/ml设为病例组，≥100 mIU/ml设为对照组。采用多重PCR技术、重亚硫酸盐测序、使用Illumina平台对IFNG基因目标区域及其CpG位点进行DNA甲基化高通量测序。采用非条件logistic回归模型分析IFNG基因18个位点胞嘧啶-磷酸-鸟苷酸 DNA甲基化情况与HepB免疫应答水平的关联。结果病例组（104名）和对照组（159名）抗-HBs［M（Q1，Q3）］分别为62.34（30.06，98.88）mIU/ml和1 089.10（710.35，1 233.45）mIU/ml。病例组IFNG_1基因44和93位点甲基化水平差异高于对照组（P<0.05），非条件logistic回归模型显示，IFNG_1基因44位点（OR=1.18，95%CI：1.03~1.35）和93位点（OR=1.21，95%CI：1.07~1.38）DNA甲基化水平与HepB应答水平具有相关性。结论IFNG_1基因44和93位点DNA甲基化水平改变可能是影响广西汉族儿童HepB应答水平的相关因素。

简介：摘要： 为了对猪繁殖及呼吸综合征病毒的冻干疫苗，在具体生产阶段的支原体检验体系进一步完善，本文展开对冻干疫苗的支原体检验工作，通过采用 DNA 荧光染色、 PCR 技术，对疫苗生产不同阶段进行检验，证实这两个技术方法的技术可行和优势。发现两种检测技术均可以获得可靠的疫苗支原体检验结果，提高支原体检出率确保冻干疫苗的生产质量。

简介：摘要目的评价一种新型西尼罗病毒(WNV)DNA疫苗在小鼠模型中免疫效果。方法首先构建了表达WNV新疆分离株(XJ11129-3)前体膜(prM)和包膜蛋白(E)的DNA疫苗VRC-prME，体外验证其表达并能产生病毒样颗粒，经肌肉注射加电转途径免疫C57BL/6小鼠，间隔4周加强免疫。采用酶联免疫法检测免后血清抗体，WNV(NY99株)单轮感染性颗粒检测中和抗体，免疫斑点法与胞内细胞因子染色检测细胞免疫应答。结果VRC-prME加强免疫2周后诱导小鼠产生了较强的Th1型偏向抗体应答，并能交叉中和WNV(NY99株)的单轮感染性颗粒，该疫苗同时诱导了抗原特异性的多功能CD8＋ T(IFN-γ、IL-2、TNF-α)细胞应答。结论本研究制备的表达西尼罗病毒新疆分离株前体膜和包膜蛋白的新型DNA疫苗在小鼠中诱导较强的体液免疫和细胞免疫应答，具有较好的研发与应用前景。

简介：目的分析鼠伤寒沙门菌(St)细菌影负载防龋DNA疫苗对黏膜免疫效能的影响。方法收集St减毒株J357,同时转入噬菌体PhiX基因E表达质粒与pREP4质粒,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导,收集负载防龋DNA疫苗。按照随机原则,将20只SPF级BALB/c雌性小鼠分为A组(布比卡因包裹pVXA15μg)、B组(布比卡因包裹pGJGLU/VAX5μg)、C组(细菌影负载空载体pVXA15μg)、D组(细菌影负载防龋DNA疫苗pGJGLU/VAX5μg)共4组经鼻免疫小鼠,每组均为5只。采用酶联免疫吸附试验对各组小鼠唾液抗体的产生情况进行检测。结果经IPTG诱导后,对照组细菌生长速度较快;而表达基因E经IPTG诱导后,大量细菌出现死亡,随着诱导时间的延长,细菌的死亡数量明显进一步增多。经IPTG诱导前,取携带基因E的St中J357活菌数为2×1012个/L;而经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,其活菌数仅为5×108个/L,表明大量细菌被杀死。经酶联免疫吸附试验检测结果发现,唾液总IgA抗体水平在各组小鼠免疫前的比较,并无显著差异(P>0.05);相比A组,C、D组小鼠免疫后唾液总IgA抗体水平均明显升高(P<0.05);而C、D组唾液总IgA抗体水平与B组比较,均无显著差异(P>0.05)。经酶联免疫吸附试验检测结果发现,各组小鼠免疫前均未检出唾液特异性抗葡聚糖结合区IgA抗体;免疫后8周,D组唾液特异性抗葡聚糖结合区IgA抗体水平较A、B、C组均明显升高(P<0.05),而B组抗体水平与A、C组比较,均无显著差异(P>0.05)。结论经鼻黏膜途径免疫小鼠经St细菌影负载防龋DNA疫苗后可明显改善其免疫效能。

简介：摘要目的探讨自噬介导的乙型脑炎重组DNA疫苗对BALB/c小鼠体内树突状细胞(dendritic cells，DCs)免疫相关功能的影响。方法取健康BALB/c雌性小鼠，随机分配成5组，分别用pcDNA3.1(＋)空载体、pJME质粒、pJME-LC3重组质粒肌注免疫小鼠，并使用无菌PBS肌注作为空白对照组，乙型脑炎减毒活疫苗腹腔注射作为阳性对照组，免疫注射共3次，每次间隔2周，末次免疫2周后无菌取小鼠脾脏，研磨后从单细胞悬液中分离DCs，使用免疫荧光技术观察重组质粒在DCs中的表达水平；利用流式细胞术检测DCs表面主要组织相容性复合体Ⅱ(major histocompatibility complex Ⅱ，MHCⅡ)的表达水平以及小鼠脾脏DCs摄取FITC-Dextran后的平均荧光强度；CCK8法检测分析不同免疫组DCs对同种异体小鼠脾脏淋巴细胞的刺激增殖效果。结果相对于其他免疫组，pJME-LC3实验组大量DCs胞质中可见质粒编码蛋白表达；pJME-LC3实验组免疫鼠脾脏DCs摄取FITC-Dextran的能力明显强于其他免疫组(P<0.05)；pJME-LC3组小鼠成熟DCs表面MHCⅡ分子的表达水平明显升高(P<0.05)；进一步研究发现pJME-LC3组小鼠脾脏DCs对同种异体小鼠脾脏淋巴细胞刺激增殖能力高于其他免疫组(P<0.05)。结论pJME-LC3重组质粒可以促进免疫鼠脾脏DCs抗原提呈以及刺激淋巴细胞增殖的能力，提示自噬介导的乙型脑炎重组DNA疫苗可能通过影响BALB/c小鼠DCs功能促进免疫效应。