简介：摘要间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSCs)是一种来源于中胚层的成体干细胞,具有多向分化能力，如具有向骨、软骨、脂肪、肌肉、肌腱、血管内皮细胞及神经星形胶质细胞分化的潜能。并且MSC体外较易分离培养、扩增，细胞免疫原性低，易于转染并能长期表达外源基因等特点，故已成为组织工程、基因治疗和再生医学中的研究热点。目前，对MSCs的分离、纯化、培养还没有统一的方法。MSCs的分离技术和方法主要有4种贴壁法、流式细胞仪分离法、密度梯度离心法和免疫磁珠法。本研究对传统的分离方法进行一些改进，联合利用密度梯度离心法和差异贴壁法，旨在体外分离培养血管MSCs，并将其经定向分化诱导为成骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞，并与骨髓MSC定向分化为血管内皮细胞进行比较，以观察血管来源MSC在血管内皮细胞分化及血管损伤修复中的优势，为临床血管病变性疾病的干细胞治疗提供更为合适的细胞来源。

简介：摘要目的脐血间充质干细胞（HumanumbilicalcordbloodMarrowMesenchymalStemCells，MSCs）在体外特定环境下诱导为脂肪细胞。方法分离培养MSCs，加入特定诱导液，观察MSCs的形态变化，并在诱导第14d后用油红O染色检测MSCs中含有橙黄色脂滴细胞比例，并与单纯低糖DMEM培养的MSCs为对照组。结果在特定微环境中的MSCs诱导培养72h后出现脂滴，第20d时观察80%脐血MSCs在油红O染色示向脂肪细胞分化。对照组MSCs未见明显变化，油红0染色呈阴性结果。结论在特定环境下MSCs可分化为脂肪细胞，为脐血MSCs在组织工程领域发展奠定了实验基础。

简介：摘要目的探讨和评价流式细胞仪在网织红细胞计数中的应用。方法选取2013年7月在我院住院治疗的29例恶性肿瘤患者，抽取静脉血1ml，选取同期贫血患者32例，健康志愿者30例，抽取静脉血1ml，加入噻唑橙（TO）染色液，采用流式细胞仪计数红细胞，对其中的网织红细胞所占的比重进行分析和研究，比较与手工法的计数效果，观察其稳定性、重复性及相关性。结果计数结果显示，采用流式细胞仪计数网织红细胞数与手工法计数结果之间没有明显的差异，批内CV（变异系数）在3.23%以下，批间CV（变异系数）在4.86%以上。结论采用流式细胞仪进行网织红细胞的计数，具有更准确、更快速、重复性好、更客观的特点，具有较高的临床应用价值，值得在临床网织红细胞常规检测中推广。

简介：摘要艾滋病在我国流行已有二十多年，随着感染者不断增加、感染人群的变化和临床病人的日益增多，艾滋病实验室已遍布全国各级医疗，HIV感染者T淋巴细胞亚群的检测对于判断病情和评价疗效都具有重要的临床价值，全国已经有近百台各型流式细胞仪直接服务于艾滋病感染者和艾滋病患者，BDFACSCount流式细胞仪的使用单位都不少，本文主要分析在使用BDFACSCount流式细胞仪检测CD4T淋巴细胞的使用技巧。

简介：背景：近年来,对传统单味中药或提取物、复方中药及含药血清调控骨髓间充质干细胞定向分化为肌成纤维细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、神经细胞等研究的不断深入,使中药或其提取物对骨髓间充质干细胞增殖、调控定向分化和移植等方面成为组织工程研究领域的一大亮点。目的：综述中药或其提取物诱导骨髓间充质干细胞定向分化的最新研究进展。方法：分别以＂中药,定向分化,骨髓间充质干细胞＂,＂Chineseherb,directionaldifferentiation,mesenchymalstemcells＂为检索词,由第一作者检索2010年1月至2016年1月中国期刊全文数据库、PubMed数据库及万方数据库相关文章。排除缺乏原创性及重复性研究的文献,计算机初检到99篇文献,最终保留43篇进行归纳总结。结果与结论：骨髓间充质干细胞作为骨分化系统中最强的种子细胞,具有广泛的定向分化潜能,与传统中草药结合在临床治疗众多难治性疾病中凸显重要价值,尤其对于治疗骨代谢疾病、骨缺损、骨折不愈合及迟缓愈合等疾病更加充分发挥其临床应用价值,这既有利于进一步深层次,多角度研究中药的作用及发生机制,也使骨髓间充质干细胞向更宽、更广领域参与临床各类难治性疾病的治疗。

简介：摘要目的采用组织块法从小鼠胎鼠的牙胚组织分离培养间充质细胞，鉴定其细胞特性。结论成功培养小鼠胎鼠牙胚间充质干细胞，体外稳定传代6代以上，有成为组织工程种子细胞的应用前景。

简介：间充质干细胞（MSC）是具有多向分化能力的成体干细胞，在体外培养中可以被诱导分化为骨、软骨、脂肪、肌肉细胞；另外，MSC也可跨系分化为神经细胞、心肌细胞、肝脏细胞等多种其他组织细胞。Notch信号通路广泛存在于各种动物细胞中，在调节细胞分化、增殖和凋亡中发挥重要作用，它的配体和受体都是细胞膜表面蛋白，因此是介导细胞间通讯的一种重要方式。现有研究表明：在MSC多条分化途径中都有Notch通路存在。本文针对Notch信号通路在MSC分化中的影响做一综述。

简介：人骨髓组织内存在两种截然不同的系统：造血系统和基质细胞系统。造血系统包括CD34阳性的前体干细胞和能分化为各种成熟血细胞的祖细胞。而基质细胞系统包括血管内皮细胞和骨髓间充质干细胞（MSCs），后者具有多样分化潜能，可分化为骨、韧带、脂肪、软骨和肌肉。将MSCs植入宿主动物体内可形成含有成骨细胞、脂肪和软骨细胞的骨组织。由于MSCs易于分离、体外扩增并具有多向分化潜能，非常适于组织工程学的应用，尤其在骨组织重建的临床研究中很有前途，下面就MSCs在骨组织工程中的应用进展进行综述。

简介：摘要目的对比研究流式细胞仪在前、后段尿沉渣检验中的效果。方法将我院2013年1月～2014年5月门诊就诊的患者200例作为研究对象，留取他们的前、后段尿，皆采用流式细胞仪进行检测，其中阳性标本则进一步采取人工显微镜检进行复核，对比分析检查结果。结果男性患者在前、后段尿沉渣检验结果中各项指标间并无显著性差异(P>0.05)；女性患者前、后段尿沉渣除了管型(CAST)以外，其余指标如尿白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、细菌(BACT)、上皮细胞(EC)间对比皆有显著性差异(P<0.01)。结论流式细胞仪在尿沉渣检验中有很高的价值，其中女性患者前、后段尿沉渣检验结果差异性显著，可能与女性白带等污染有关，故而尿液标本的留取策略也成为重要环节，必须引起高度重视。

简介：背景：脂肪间充质干细胞在跟腱组织工程再生领域越来越受到重视，研究其诱导分化的有利环境（氧体积分数）尤为必要。目的：将脂肪间充质干细胞与跟腱细胞在不同氧体积分数条件下间接共培养，比较氧体积分数对脂肪间充质干细胞向跟腱细胞分化能力的影响。方法：无菌条件下获取SD大鼠跟腱细胞。SD大鼠脂肪间充质干细胞直接购买，经培养传至第1代后，与跟腱细胞一起在常氧（体积分数20%）和低氧（体积分数2%）条件下经Transwel间接共培养体系共培养。在培养7，14和21d，实时荧光定量PCR检测跟腱细胞的特异指标胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ，Tenomodulin，Thrombospondin-4，Scleraxis基因相对表达量，免疫荧光染色法检测胶原蛋白Ⅰ和Thrombospondin-4蛋白表达量。结果与结论：脂肪间充质干细胞与跟腱细胞经间接共培养后，低氧组检测到的跟腱细胞的相关特异指标在基因和蛋白水平上表达水平均高于常氧组。提示氧体积分数可显著影响脂肪间充质干细胞向跟腱细胞分化的潜能，低氧是脂肪间充质干细胞向跟腱细胞分化的有利条件之一。

简介：目的观察BMSCs对胚胎腹侧中脑前体细胞（VMP）体外扩增和定向分化的影响,并分析其可能的营养机制.方法分别取胎龄11d大鼠胚胎VMP、成年大鼠BMSCs进行体外培养,并建立二者的共培养体系.体外扩增7d的VMP分为对照组、BMSCs分化液组、BMSCs＋VMP共培养分化液组,分别加入普通分化液、BMSCs分化液、BMSCs＋VMP共培养分化液进行诱导分化.观察细胞生长情况.分化期末行免疫荧光染色,分析比较3组细胞中酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞占总细胞数的比例.结果诱导分化7d后,对照组、BMSCs分化液组和BMSCs＋VMP共培养分化液组中细胞数分别较培养前扩增（44.13±4.75）倍、（60.63±5.25）倍、（64.00±7.63）倍,TH阳性细胞比例分别为（18.76±5.20）%、（23.49±4.10）%、（28.08±5.42）%,比较差异有统计学意义（P〈0.05）.结论BMSCs能够通过分泌营养因子有效促进VMP增殖并定向分化为多巴胺能神经元.

简介：摘要目的将病毒滴度不同的狂犬病毒PV-2061株接种Vero细胞，收获连续传代培养的病毒液后脑内注射小鼠，通过小鼠的死亡情况确定细胞传代培养法对于该病毒的检测限度。方法先采用小鼠脑内接种法测定狂犬病毒的病毒滴度，然后将10倍系列稀释的狂犬病毒接种Vero细胞，在细胞上连续传代3次后收获细胞培养物并脑内注射小鼠，观察小鼠的死亡情况。结果小鼠脑内接种法检测狂犬病毒的病毒滴度为7.0lgLD50/ml，且不高于1LD50/ml的病毒无法致小鼠死亡。细胞传代培养法检测狂犬病毒的结果为0.1LD50/ml的狂犬病毒检出率为5%～10%，0.01LD50/ml的狂犬病毒无法检出。结论细胞传代培养法检测狂犬病毒PV-2061株的检测限度约为0.1LD50/ml，且灵敏度远高于小鼠脑内接种法。

简介：摘要间充质干细胞是一种非造血干细胞，但拥有向间充质和非间充质组织细胞分化的能力，而且这些细胞通过多种途径，如分泌细胞因子、向其他细胞系分化及细胞与细胞的接触机制等改变临床疾病的病理过程，目前间充质干细胞作为细胞工程种子细胞被越来越多的体内外实验证实其临床使用价值，并进一步推广应用于临床治疗各种免疫系统疾病和其他退行性疾病。因此，对于其本身细胞向各种成熟细胞分化的内在机制的充分了解是非常重要的，借此希望通过对目前的间充质细胞在体内外和临床试验的诱导分化方向的实验做一概述，可以为间充质细胞作为治疗方式提供临床支持依据。

简介：摘要目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)/内皮祖细胞(EPC)作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨(ECM-TEB)修复大鼠股骨缺损的效果。方法分离培养骨髓来源的MSC和EPC并进行功能鉴定，种植上架于纳米晶胶原基人工骨颗粒，培养14 d后冻干，获得MSC/EPC ECM-TEB和MSC ECM-TEB。扫描电镜观察MSC和EPC在支架表面的生长形态。分别提取MSC ECM-TEB蛋白浸提液(对照组)和MSC/EPC ECM-TEB蛋白浸提液(实验组)，加入EPC培养系统中进行迁移、划痕修复、管腔形成检测；另加入MSC培养系统中进行茜素红染色和碱性磷酸酶(ALP)染色检测，观察两组细胞募集、血管生成和成骨分化情况。选取12只SD大鼠，建立股骨缺损模型，按照随机数字表法分为：(1)假手术组：仅在缺损处进行清创处理；(2)MSC ECM-TEB组：在缺损处植入MSC ECM-TEB；(3)MSC/EPC ECM-TEB组：在缺损处植入MSC/EPC ECM-TEB，每组4只大鼠。2个月后行Micro-CT检查和缺损区Masson三色染色观察骨缺损修复情况。冻干后低温保存3个月，采取同位素相对标记与绝对定量技术(iTRAQ)标记蛋白质谱检测MSC ECM-TEB和MSC/EPC ECM-TEB在成血管方面的差异，并采用基因本体论/京都基因与基因组百科全书技术(GO/KEGG)功能富集方法分析其原因。结果MSC和EPC在支架表面生长、增殖良好，形成光滑的细胞层状结构。实验组在细胞迁移数、划痕修复比例和管腔形成长度分别为(121.6±8.3)个、(61.5±5.9)%、(11.3±0.6)mm，较对照组显著增多[(85.0±6.7)个、(39.3±3.6)%、(5.9±0.4)mm](P均<0.01)。茜素红染色和ALP染色结果显示，实验组钙结节矿化面积比例显著增加[(38.8±3.3)%∶(49.9±3.0)%、(38.8±2.4)%∶(45.3±3.3)%] (P均<0.05)。Micro-CT和Masson染色结果表明，MSC/EPC ECM-TEB组骨缺损修复良好，MSC ECM-TEB组仅形成少量新骨，假手术组几乎没有新骨形成；骨体积分数、骨小梁数量和骨小梁厚度差异均有统计学意义(P<0.05)。蛋白质谱分析结果表明，与MSC ECM-TEB组相比，MSC/EPC ECM-TEB组中有83个血管生成相关的因子显著上调(差异倍数>2，P<0.05)；GO/KEGG功能富集分析显示，与MSC ECM-TEB相比，MSC/EPC ECM-TEB在"血管发育"等生物过程存在明显差异(P<0.01)，"血管平滑肌收缩通路"等显著增强(P<0.01)。结论与MSC ECM-TEB相比，MSC/EPC ECM-TEB在细胞募集、血管生成和新骨生成方面显著增强，是一种更佳的可用于创伤性骨缺损修复的组织工程骨构建策略。

简介：本研究观察无血清培养液培养的人脐带间充质干细胞（UC-MSC）,并比较与含10％胎牛血清培养液培养的人脐带间充质干细胞的异同.采集正常足月剖宫产胎儿脐带,用MesenCult-XF无血清培养液或含10％胎牛血清培养液培养.观察不同培养液培养的间充质干细胞细胞的形态、免疫表型、细胞周期、增殖分化潜能及对混合淋巴细胞反应的抑制作用.结果表明,采用无血清MesenCult（R）-XF培养液培养的MSC平均传代倍增6.57±0.7倍,含血清培养液培养的MSC平均传代倍增4,59±0.45倍（P＜0.05）；两种培养液培养的MSC均表达CD44、CD90、CD73、CD105抗原,不表达CD31、CD45、HLA-DR及CD34等抗原,表达程度无明显统计学差异；无血清培养液培养的MSC（65±5.2）％均为G0/G1期细胞,含血清培养液培养的MSC（62±3.1）％为G0/G1期细胞（P＞0.05）；两种培养液培养的人脐带MSC均可向成脂细胞、成骨细胞分化；无血清培养液培养的脐带MSC按1000、5000、10000、20000个细胞/孔接种密度与反应细胞和刺激细胞共培养的每分钟闪烁值（CPM）分别为（6.43±0.47）×104、（4.30±0.38）×104、（1.97±0.13）×104和（0.24±0.03）×104,含血清培养液培养的MSC与不同密度的混合淋巴细胞共培养的CPM值分别为（7.85±0.07）×104、（5.64±0.12）×104、（3.09±0.18）×104和（1.73±0.05）×104.结论：无血清培养液培养的细胞均为MSC,有传代增殖潜能,传代可达临床治疗MSC细胞量,并可避免异种蛋白致敏.

简介：背景：人脐带间充质干细胞较骨髓、脂肪等来源的间充质干细胞易取材、更为原始，并不受伦理、法律的限制，是中枢神经系统损伤修复最具治疗潜力的细胞来源之一。目的：探讨重组人碱性成纤维生长因子、重组人表皮生长因子定向诱导人脐带间充质干细胞分化为神经干细胞的潜能。方法：采用碱性成纤维生长因子、表皮生长因子作为诱导剂，体外诱导人脐带间充质干细胞；在倒置显微镜下动态观察细胞形态学变化，并用免疫荧光法检测人脐带间充质干细胞向神经干细胞分化的情况，实时荧光定量PCR技术检测诱导前后神经干细胞标记蛋白巢蛋白在mRNA水平的相对表达量。结果与结论：形态学观察经诱导后的人脐带间充质干细胞呈神经干细胞球改变；免疫荧光法及实时荧光定量PCR技术均可检测到神经干细胞标记物巢蛋白，并可进一步分化表达神经元标志蛋白神经元特异性烯醇化酶、微管相关蛋白2以及神经胶质细胞蛋白、神经胶质原纤维酸性蛋白。碱性成纤维生长因子、表皮生长因子可定向诱导人脐带间充质干细胞向神经干细胞及神经元、神经胶质细胞分化。

简介：关节软骨受损或缺失,是导致关节炎等渐进性疾病的主要原因,严重影响患者生活质量.成熟的透明软骨由于缺乏神经支配和血管供应,且软骨细胞增殖能力差,所以很难自我修复.自体软骨细胞移植尚存在局限性,且操作复杂,阻碍了临床应用.间充质干细胞增殖能力较强,并保留有分化潜力,但向成软骨分化需要一定的条件,如细胞因子、支架材料、培养基等.寻找促进诱导间充质干细胞成软骨分化的活性因子,是目前关节软骨再生的重要研究方向.本文就诱导间充质干细胞向软骨分化的相关活性因子的研究进展进行综述.

简介：摘要在医学实验中，流式细胞仪起着非常重要的作用，它的操作过程简单快捷、分析准确快速、结果清晰明确，在医学实验中得到广泛的应用，本文结合医学实验的实际情况，对流式细胞仪在医学实验中的应用进行分析与研究。

简介：摘要目的对流式细胞仪在医学检验中的应用效果进行讨论分析。方法选取2016年4月至2017年4月在我院进行尿检的100例患者作为此次研究对象，分为男性组和女性组，对前段尿及后段尿进行采集，利用流式细胞仪对采集到的标本进行尿沉渣的检验，对其检验的结果进行分析。结果①男性患者在前段尿及后段尿在红细胞、白细胞、上皮细胞、真菌及管型沉渣检查的结果没有差异，无统计学意义（P＞0.05）。②女性患者在前段尿及后段尿在红细胞、白细胞、上皮细胞、真菌及管型沉渣检查的结果数据差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论流式细胞仪的尿沉渣检验结果受到患者性别的影响，医务人员应根据患者的性别采集不同的尿段进行检测，以此保证诊断的准确性，避免出现误诊及漏诊的现象。

简介：摘要目的探析对比流式细胞仪在尿沉渣的检验结果。方法选取100例尿检患者为研究对象，均是我院2011年1月至2014年12月收治，依据患者性别进行分组，收集患者前、后段尿通过流式细胞仪开展尿沉渣检验，阳性患者需再利用人工显微镜复查，对比与分析检验结果。结果女性组患者的前段尿沉渣检验中RBC、WBC、BACT、EC、CAST分别是（30.63±7.65）个/uL、（145.74±18.14）个/uL、（8194.42±63.55）个/uL、（2119.44±11.42）个/uL、（1.37±0.32）个/uL，后段尿分别是（8.44±3.23）个/uL、（29.57±4.92）个/uL、（4327.42±44.88）个/uL、（11.07±3.42）个/uL、（1.20±0.32）个/uL，差异性显著（P＜0.05）。男性组患者的前、后段尿沉渣检验结果差异性不显著（P＞0.05）。结论患者性别影响流式细胞仪在尿沉渣的检验准确率，因此医务人员需依据患者的性别使用不同尿段进行检验，以降低误差，提高检验准确率。