简介：摘要DNA甲基化是表观遗传学的修饰方式之一，在基因表达调控和细胞分化过程中发挥重要作用。肺是脓毒症时最容易受损害的器官，脓毒症急性肺损伤（acute lung injury, ALI）严重威胁患者生命安全，其机制尚不完全明确。目前已对DNA甲基化在肺损伤发病过程中的作用进行了大量研究，文章在简要介绍DNA甲基化原理和脓毒症ALI机制的基础上，就DNA甲基化与脓毒症ALI时的炎症反应、肺血管屏障破坏、免疫紊乱的关系以及DNA甲基化转移酶抑制剂对脓毒症ALI治疗效果的研究进行综述，以期对脓毒症ALI的发病机制及防治研究起到一定的启示作用。

简介：摘要目的评价DNA甲基转移酶在脓毒症小鼠急性肺损伤中的作用。方法健康雄性C57BL/6小鼠48只，6~8周龄，体重20~25 g，采用随机数字表法分为4组(n＝12)：假手术组(Sham组)、假手术+DNA甲基转移酶抑制剂组(Sham+5-Aza组)、脓毒症组(Sepsis组)和脓毒症+DNA甲基转移酶抑制剂组(Sepsis+5-Aza组)。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症小鼠急性肺损伤模型。于CLP后24 h时处死小鼠取肺组织，提取DNA利用比色法测定全基因组DNA甲基化水平，提取RNA采用实时荧光定量PCR法检测DNA甲基转移酶(DNMTl、DNMT3a、DNMT3b)的mRNA表达，确定肺湿重/干重比值，HE染色观察肺组织病理学结果，采用ELISA法测定IL-6、TNF-α、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、MDA含量、SOD和过氧化氢酶(CAT)活性。结果与Sham组比较，Sepsis组和Sepsis+5-Aza组小鼠CLP后24 h时肺组织全基因组甲基化水平升高，DNMT1和DNMT3a的mRNA表达上调，肺组织病理学损伤评分和肺湿重/干重比值升高，IL-6、TNF-α、HMGB1和MDA含量升高，SOD和CAT活性降低(P<0.05)，Sham+5-Aza组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)；与Sepsis组比较，Sepsis+5-Aza组小鼠肺组织全基因组甲基化水平降低，DNMT1和DNMT3a的mRNA表达下调，肺组织病理学损伤评分、肺湿重/干重比值、IL-6、TNF-α、HMGB1和MDA含量降低，SOD和CAT活性增加(P<0.05)。结论DNMT1和DNMT3a介导的DNA高甲基化参与了脓毒症小鼠急性肺损伤的过程。

简介：

简介：摘要目的评价核因子-E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路在右美托咪定减轻小胶质细胞氧糖剥夺-复氧复糖损伤中的作用。方法BV-2小胶质细胞加入含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基，以1.5×104个/ml的密度接种于96孔培养板(200 μl/孔)或以2×105个/ml密度接种于6孔培养板(每孔2 ml)，置于37 ℃、含5%CO2-21%O2-74 %N2的正常培养箱中培养。采用随机数字表法分为5组(n＝30)：正常对照组(C组)、右美托咪定组(D组)、氧糖剥夺/复氧复糖组(OGD/R组)、氧糖剥夺/复氧复糖+右美托咪定组(OGD/R+D组)和氧糖剥夺/复氧复糖+右美托咪定+ML385组(OGD/R+D+ML组)。C组在正常培养箱中继续培养26 h；D组加入终浓度为10 μmol/L的右美托咪定孵育2 h，随后在正常培养箱中培养26 h；OGD/R组、OGD/R+D组、OGD/R+D+ML组更换为无糖DMEM培养基，置于37 ℃、含5%CO2-1%O2-94 %N2的培养箱中培养2 h，然后换为含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基，在正常培养箱中培养24 h；OGD/R+D组和OGD/R+D+ML组于氧糖剥夺前2 h时加入终浓度为10 μmol/L的右美托咪定，OGD/R+D+ML组于加入右美托咪定前30 min时，加入终浓度为4 μmol/L的Nrf2抑制剂ML385。采用MTT法检测细胞活力，流式细胞仪检测细胞凋亡率，ELISA检测上清液TNF-α、IL-6和IL-10的浓度，Western blot法检测细胞核Nrf-2、细胞Nrf-2和HO-1表达，RT-PCR法检测细胞HO-1 mRNA表达。结果与C组比较，OGD/R组和OGD/R+D组细胞活力降低，细胞凋亡率和上清液TNF-α、IL-6、IL-10浓度升高，细胞核Nrf2、细胞Nrf-2、HO-1及其mRNA表达上调(P<0.05)，D组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)；与OGD/R组比较，OGD/R+D组细胞活力和上清液IL-10浓度升高，细胞凋亡率和上清液TNF-α、IL-6浓度降低，细胞核Nrf2、细胞Nrf2、HO-1及其mRNA表达上调(P<0.05)，OGD/R+D+ML组上述差异无统计学意义(P>0.05)；与OGD/R+D组比较，OGD/R+D+ML组细胞活力和上清液IL-10浓度降低，细胞凋亡率和上清液TNF-α、IL-6浓度升高，细胞核Nrf-2、细胞Nrf2、HO-1及其mRNA表达下调(P<0.05)。结论右美托咪定减轻小胶质细胞氧糖剥夺-复氧复糖损伤的机制与促进Nrf2/HO-1信号通路激活，抑制炎症反应有关。