简介:摘要目的建立狂犬病毒PV-2061株病毒滴度的快速、准确的检测方法。方法取12批狂犬病毒PV-2061株的病毒样品,分别采用蚀斑法、免疫荧光法检测病毒滴度,与小鼠脑内注射法进行比较,验证其检测结果的相关性。另取一批狂犬病毒PV-2061株的病毒样品,用蚀斑法和免疫荧光法重复检测6次,比较两种实验方法的精密性。结果蚀斑法和免疫荧光法测得的结果与小鼠脑内注射法之间呈正相关性;重复测定同一病毒样品,免疫荧光法的变异系数更低,表明免疫荧光的重复性更好。结论以细胞法替代小鼠法检测狂犬病毒的毒力是可行的。免疫荧光法检测病毒滴度,快速、准确、精密度好,为狂犬病毒PV-2061株的疫苗的研究奠定了基础。
简介:摘要目的了解狂犬疫苗免疫效果与在实际工作中检测报告的误差(误判率)。方法收集采用ELISA法检测的不同批次245例狂犬病毒IgG抗体的OD值,计算出每次阳性对照样本的OD值(以下称为临界值)正负10%的人数。结果245例狂犬检测人员中有50人次结果判阴性,其余195人次为阳性。其中阴性结果中在临界值下限10%的人数有15人次,此种结果占总检测人数的6.1%为负误差;阳性结果中OD值在临界值10%上限的人数有13人次,此为阳性结果中正误差人数占总检测人数的5.3%。结论报告结果中有5.3%的阳性结果有机率小于或等于临界值(0.5IU/ml中和抗体),此部分人员应当补接种狂犬疫苗,当引起重视。
简介:目的:以角鲨烯、山梨醇、吐温为组分,在琥珀酸缓冲液中混和甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白制备复合佐剂Nano-fla,评价该佐剂对人二倍体狂犬疫苗的免疫效果和安全性。方法:以人二倍体细胞制备的狂犬灭活疫苗为抗原,BALB/c小鼠设置PBS对照组、全剂量疫苗组、半剂量疫苗组、低剂量佐剂组(含半剂量抗原+5μg鞭毛蛋白)、中等剂量佐剂组(含半剂量抗原+10μg鞭毛蛋白),免疫程序为在0、3、7d肌肉注射,并在首针免疫后的第7、14d尾静脉采血分离血清,通过快速免疫荧光灶抑制实验检测中和抗体,通过酶联免疫斑点实验检测细胞因子水平。结果:首针免疫后第7d,中等剂量佐剂组的中和抗体达保护效力水平,显著高于全剂量疫苗组和低剂量佐剂组;第14d时中等剂量佐剂组的IgG抗体浓度显著高于全剂量疫苗对照组;第14d中等剂量佐剂组与全剂量疫苗组相比,分泌IFN-γ和IL-4的淋巴细胞数量显著增加。结论:复合佐剂Nano-fla应用到狂犬疫苗中,能有效刺激小鼠体液免疫和细胞免疫应答,更早地产生中和抗体,且能有效降低抗原用量,具有潜在应用价值。
简介:摘要目的探讨人感染伪狂犬病毒(PRV)的流行病学、临床特征及预后。方法总结2020年5月就诊于郑州大学第一附属医院的1例人感染PRV脑炎合并急性视网膜坏死(ARN)患者的临床资料,并回顾国内外发表的人感染PRV病例,分析其流行病学、临床表现、影像学、脑脊液、二代测序、治疗、预后等。结果本例患者为38岁男性,屠宰生猪后出现高热、头痛、意识障碍、癫痫等症状。磁共振成像示岛叶、颞叶、扣带回、额叶、基底节区、海马异常信号,左侧著。后并发ARN,双目失明。通过眼房水二代测序发现PRV序列。回顾文献,最终本研究纳入20例(含本例)人PRV感染患者。95%(19/20)病前有流行病学接触史,中位潜伏期7 d,脑炎伴(或不伴)眼内炎是该病的特征。脑炎患者19例,以岛叶(17/19)、颞叶(17/19)等边缘系统受累为主,也常累及基底节区(9/19)。脑脊液或眼内液二代测序可检出PRV序列。抗病毒药物,联合激素或免疫球蛋白对部分患者有效。90%(18/20)患者遗留严重的日常生活功能障碍(改良Rankin量表评分≥3分)。结论人PRV感染的主要临床特征为重症全脑炎及眼内炎,预后较差。病猪接触史与神经影像学对诊断具有提示意义,脑脊液及眼内液二代测序检测到PRV是确诊的主要依据。
简介:摘要目的将病毒滴度不同的狂犬病毒PV-2061株接种Vero细胞,收获连续传代培养的病毒液后脑内注射小鼠,通过小鼠的死亡情况确定细胞传代培养法对于该病毒的检测限度。方法先采用小鼠脑内接种法测定狂犬病毒的病毒滴度,然后将10倍系列稀释的狂犬病毒接种Vero细胞,在细胞上连续传代3次后收获细胞培养物并脑内注射小鼠,观察小鼠的死亡情况。结果小鼠脑内接种法检测狂犬病毒的病毒滴度为7.0lgLD50/ml,且不高于1LD50/ml的病毒无法致小鼠死亡。细胞传代培养法检测狂犬病毒的结果为0.1LD50/ml的狂犬病毒检出率为5%~10%,0.01LD50/ml的狂犬病毒无法检出。结论细胞传代培养法检测狂犬病毒PV-2061株的检测限度约为0.1LD50/ml,且灵敏度远高于小鼠脑内接种法。
简介:摘要:为了解决图像分析能力不足导致准确率低的问题,设计了一种基于数据分析的狂犬病毒抗体检测方法。增强所收集的狂犬病毒抗体图像以减少干扰的影响或补偿降低图像质量的因素。相同组织块匹配提取,特征信息提取,数据分类合成,特征向量生成融合,基于数据分析标记图像特征点区域。识别抗体的特征区域,利用卷积神经网络算法建立狂犬病毒抗体检测模型。通过反向求导修改参数,使模型达到训练精度。测试结果表明,该设计方法能够准确识别抗体边界和位置,具有良好的图像分析能力,提高了检测精度。关键词:数据分析;狂犬病病毒;抗体检测;图像增强;抗体特性;检测模型;
简介:摘要狂犬病(Rabies)又名恐水症(hydrophobia),是由狂犬病毒引起的以侵犯中枢神经系统为主的自然疫源性人畜共患急性传染病。流行性广,病死率极高,几乎为100%,对人民生命健康造成严重威胁。人狂犬病通常由病兽以咬伤的方式传给人人体而受到感染。临床表现为特有的恐水、恐声、怕风、恐惧不安、咽肌痉挛、进行性瘫痪等而危及生命。狂犬病发病率每年呈上升趋势,狂犬病的控制关键在预防而不是治疗。