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  • 简介:摘要目的针对如何提高流式分选试验分选得率和纯度的问题,建立高效的流式细胞分选条件,为流式分选技术应用提供参考依据。方法2019年10月至2020年6月设计以BD FACS Sorp Aria II为例,首先以微球样品作为研究对象,经检测不同分选速率、不同分选模式及不同喷嘴条件下的分选结果,分析其影响因素,并以优化的条件尝试高效分选naïve T细胞。结果70 μm喷嘴,purity模式下,flow rate 1.0、3.0、5.0、7.0 4种速率的分选纯度均达到98%以上,但flow rate值越高,分选得率越低。不同分选模式分选时,yield模式的分选效率和得率都是最高的,分别为(99.67±0.33)%、(79.78±7.14)%,但其纯度显著低于另2种模式(均P<0.05)。3种喷嘴条件下分选后的纯度均达到98%以上,且得率差异无统计学意义(P>0.05)。结论分选原代naïve T细胞,70 μm喷嘴,flow rate1.0,purity模式条件最合适。

  • 标签: 分选速率 分选模式 喷嘴 分选得率 纯度
  • 简介:目的用流式细胞分选培养人真皮来源淋巴管内皮细胞,研究其生物学特点。方法采用中性蛋白酶及胶原酶消化包皮组织获得真皮细胞悬液.应用流式细胞仪检测和分选Podoplanin+和Podoplanin-/CD34+细胞.所获细胞进行体外培养。传代细胞进行免疫荧光及RT-PCR方法检测LECs特异标志的表达,低密度脂蛋白吞噬、鼠尾胶原三维培养检测功能特点,MTT法及氚标记法测定细胞增殖周期和低氧条件对其增殖的影响。结果人真皮细胞中CD31+,CD34+和Podoplanin+细胞所占比例分别是6.0%,4.4%和1.4%。Podoplanin+CD34+细胞在单层培养时形成内皮细胞典型的铺路石样外观,表达内皮细胞特异性标志CD3l及吞噬DiI-Ac-LDL和三维培养微管形成功能。Podoplanin+细胞表达淋巴管内皮细胞特异性标志Prox-1,Ang2和VEGFIR-3.和CD34+细胞间具有显著性差异。两组细胞生长曲线相似均于接种至培养板后的3~5d逐渐进入对数生长期,接种后的6—8d均进入停滞期。在缺氧环境下,氯化钴浓度为50μM和100μM时刺激细胞增殖,当浓度大于200μM细胞增殖明显受到抑制。结论应用流式细胞仪可以富集人真皮来源淋巴管内皮细胞和血管内皮细胞.尽管两者表达特异性分子标志不同,其在三维培养和缺氧条件下生长特点相似.

  • 标签: 流式细胞仪 淋巴管内皮细胞 细胞分选 细胞培养
  • 简介:摘要原发和多种转移肿瘤浸润中枢神经系统(CNS),因CNS的特殊结构,脑脊液(CSF)的实验室检测在CNS相关疾病的诊断中发挥重要作用,利用流式细胞术(FCM)检测CSF中的肿瘤细胞是评价CNS肿瘤累及的重要技术,为了规范操作,加强质量控制,中国中西医结合学会检验医学专业委员会制定此专家共识。

  • 标签: 脑脊液 肿瘤 流式细胞术 质量控制 共识
  • 简介:流式细胞术是对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行高参数的定量分析和分选技术。在基础医学研究领域,流式细胞术测定凋亡过程中细胞所发生的变化,已广泛用于细胞凋亡的定性与定量分析。本文介绍了流式细胞分析检测细胞凋亡的基本原理及最新进展。

  • 标签: 流式细胞仪 细胞凋亡 病理学 生理学
  • 简介:摘要目的探讨和评价流式细胞仪在网织红细胞计数中的应用。方法选取2013年7月在我院住院治疗的29例恶性肿瘤患者,抽取静脉血1ml,选取同期贫血患者32例,健康志愿者30例,抽取静脉血1ml,加入噻唑橙(TO)染色液,采用流式细胞仪计数红细胞,对其中的网织红细胞所占的比重进行分析和研究,比较与手工法的计数效果,观察其稳定性、重复性及相关性。结果计数结果显示,采用流式细胞仪计数网织红细胞数与手工法计数结果之间没有明显的差异,批内CV(变异系数)在3.23%以下,批间CV(变异系数)在4.86%以上。结论采用流式细胞仪进行网织红细胞的计数,具有更准确、更快速、重复性好、更客观的特点,具有较高的临床应用价值,值得在临床网织红细胞常规检测中推广。

  • 标签: 流式细胞仪 网织红细胞 计数方法评价
  • 简介:摘要随着基础研究及医疗诊断技术的发展,流式细胞术已广泛应用于科研和临床研究。在免疫学等基础学科的实验应用、疾病的诊治及监测中更是起到越来越重要的作用。本文就流式细胞术在医学免疫学实验及教学中,有关样本制备和上机操作等环节中如何做好质量控制谈一些作者的体会。

  • 标签: 流式细胞术 样本制备 结果分析
  • 简介:摘要:本文从专利统计角度分析了该项技术所处的生命周期,并介绍了从库尔特计数器的诞生到各时期重点技术,包括脉冲分析判据、液力聚焦、细胞电泳技术、微流控技术、激光检测技术融入等,这些技术使流式细胞计数检测实现了轻小化,自动化,智能化,目前多面技术融合高精度流式细胞计数器及搭载自动识别分析系统的流式细胞计数器已成为新的研究热点方向。

  • 标签: 库尔特,细胞计数,流式细胞,微流控,专利分析
  • 简介:摘要目的利用流式细胞技术建立一种检测胰岛β细胞去分化状态的方法。方法实验研究。常规培养胰岛Min6(小鼠β细胞系)、αTC1-6(小鼠α细胞系)、HepG2(人肝癌细胞)和F9细胞(小鼠畸胎瘤细胞)。白细胞介素1β(IL-1β)合并肿瘤坏死因子α(TNFα)或棕榈酸(PA)过夜处理Min6细胞制备β细胞去分化模型。细胞染色采用抗-嗜铬粒蛋白A(ChgA)、抗-胰岛素(Ins)、抗-胰高血糖素(Gcg)、抗-SRY盒转录因子9(Sox9)和抗-八聚体结合转录因子4(Oct4)抗体进行,流式细胞技术鉴定细胞蛋白表达情况。统计学方法采用独立样本t检验。结果流式细胞实验结果显示Min6细胞高度表达Ins和ChgA,αTC1-6细胞高度表达Gcg,HepG2细胞高度表达Sox9,F9细胞高度表达Oct4,阳性率在90%左右。炎性因子(IL-1β+TNFα)处理Min6细胞导致Ins染色阳性细胞数量明显降低(92.775%±1.702%比97.125%±0.246%,P=0.045),Sox9染色阳性细胞增加(41.675%±0.390%比25.875%±3.348%,P=0.003),但ChgA和Oct4染色无明显变化(P值均>0.05)。PA处理Min6细胞后,Gcg染色阳性细胞数量上升(54.500%±3.597%比41.160%±3.007%,P=0.022)。实时荧光定量PCR检测mRNA结果与流式细胞仪检测结果的趋势一致。结论利用流式细胞技术可检测各去分化模型中不同标志蛋白的表达情况,为判断胰岛β细胞的去分化状态提供了新的手段。

  • 标签: 胰岛素分泌细胞 细胞去分化 流式细胞术 胰岛β细胞
  • 简介:摘要艾滋病在我国流行已有二十多年,随着感染者不断增加、感染人群的变化和临床病人的日益增多,艾滋病实验室已遍布全国各级医疗,HIV感染者T淋巴细胞亚群的检测对于判断病情和评价疗效都具有重要的临床价值,全国已经有近百台各型流式细胞仪直接服务于艾滋病感染者和艾滋病患者,BDFACSCount流式细胞仪的使用单位都不少,本文主要分析在使用BDFACSCount流式细胞仪检测CD4T淋巴细胞的使用技巧。

  • 标签: CD4T淋巴细胞 FACSCount 流式细胞仪 HIV
  • 简介:目的尝试建立用流式细胞术检测药物抗真菌效应的新方法。方法以碘化丙锭为荧光染料,用流式细胞术检测标准菌株近平滑念珠菌ATCC22019在不同浓度氟康唑(FCZ)作用下各管平均荧光强度,探讨最佳实验条件。结果真菌MFI值随着FCZ浓度的增加而增强,其变化具有浓度依赖性,较好地反映了药物的抗真菌效应。结论成功建立用流式细胞术检测药物抗真菌效应的新方法,流式细胞术在该领域的应用值得进一步研究。

  • 标签: 流式细胞术 近平滑念珠菌 氟康唑 抗真菌效应
  • 简介:【摘要】:细胞因子具有调节细胞生长、分化成熟、功能维持、调节免疫应答、参与炎症反应、创伤愈合和肿瘤消长等多种生物学功能。因此,细胞因子的研究成果为临床上预防、诊断、治疗疾病提供了科学基础,特别是利用细胞因子治疗肿瘤、感染、造血功能障碍、自身免疫性疾病等,具有非常广阔的应用前景[1]。随着细胞表面标记及胞内细胞因子标记流式细胞技术的出现,使对胞内细胞因子的研究推向了一个新的阶段。流式细胞术也成为了检测单细胞水平细胞因子表达能力的重要检测方法。本文针对流式细胞术在胞内细胞因子检测中的研究进展作一综述。

  • 标签: 流式细胞术 细胞内 细胞因子 检测技术
  • 简介:目的探讨流式细胞术(FCM)绝对计数法在成分血残留白细胞检测中的应用价值.方法采用FCM绝对计数法检测不同稀释度的浓缩血小板样本中白细胞残留量,并与Nageotte血细胞计数板法比较.结果两种方法计数微量白细胞具有高度相关性(r=0.9964,P<0.001).低浓度白细胞计数时,FCM法变异系数小于Nageotte计数板法.两种方法检测结果相比,Nageotte计数板法计数值偏低.结论流式细胞术绝对计数法具有快速、客观、精确和重复性好等优点,是一种稳定的检测成分血中微量残存白细胞数的方法.

  • 标签: 残留白细胞 流式细胞术 Nageotte血细胞计数板法
  • 简介:目的探讨肿瘤患者T淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法采用流式细胞术检测27例肿瘤患者和25例正常对照组的T淋巴细胞亚群。结果肿瘤患者CD3^+T细胞、CD4^+T细胞和CD4^+/CD8^+比值明显低于对照组并有统计学意义,而CD8^+T细胞显著高于对照组(P〈0.01)。结论肿瘤患者的免疫功能下降。流式细胞术对肿瘤患者的免疫功能的检测具有快速、敏感、准确的特点,对于评价疗效、判断预后具有重要价值。

  • 标签: 流式细胞术 肿瘤 T淋巴细胞亚群
  • 简介:摘要目的探讨流式细胞术在临床检验中的应用价值。方法进行多次临床试验,并对最终的实验结果进行精准分析。结果流式细胞术能够有效的进行HLA-B27抗原检测、白血病免疫检测、淋巴细胞亚群检测与肿瘤标志物检测。结论在临床检验中应用流式细胞术能够有效的提升检验结果的准确性,具有较高的临床推广价之。

  • 标签: 流式细胞术 临床检验 应用价值
  • 简介:

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  • 简介:摘要目的对比研究流式细胞仪在前、后段尿沉渣检验中的效果。方法将我院2013年1月~2014年5月门诊就诊的患者200例作为研究对象,留取他们的前、后段尿,皆采用流式细胞仪进行检测,其中阳性标本则进一步采取人工显微镜检进行复核,对比分析检查结果。结果男性患者在前、后段尿沉渣检验结果中各项指标间并无显著性差异(P>0.05);女性患者前、后段尿沉渣除了管型(CAST)以外,其余指标如尿白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、细菌(BACT)、上皮细胞(EC)间对比皆有显著性差异(P<0.01)。结论流式细胞仪在尿沉渣检验中有很高的价值,其中女性患者前、后段尿沉渣检验结果差异性显著,可能与女性白带等污染有关,故而尿液标本的留取策略也成为重要环节,必须引起高度重视。

  • 标签: 前段尿 后段尿 尿沉渣检验 流式细胞仪
  • 简介:提取EJ/mdr-1细胞DNA行PCR检测,EJ/mdr-1细胞对阿霉素、秋水仙素的耐药倍数分别是其亲代EJ细胞的7.2倍和9.5倍,提取已转导mdr-1基因的EJ细胞RNA

  • 标签: 术分析 流式细胞术 耐药流式细胞
  • 简介:【摘 要】流式细胞术(flow cytometry,FCM)为临床上较为常见的检测手段,该手段在医学检验与分析中可实现对生物粒子与单细胞进行定量分析和分选的目的,加之该方法在检测速度、精度与准确度上效果较为优异,现已广泛应用在多个领域与专业范围(免疫、细胞生物、生物化学、肿瘤与血液等)。为有效掌握并明确FCM在医学检验中的发展情况与现状,以期为相关人员提供有效参考与依据,本文现开展如下研究。

  • 标签: 流式细胞术 医学检验 研究进展
  • 简介:摘要:目的:分析流式细胞术在临床检验中的应用价值。方法:通过实验形式了解流式细胞术在临床检验中的应用情况,并对其实施有效分析。结果:通过流式细胞术检测到被感染细胞数量,同时可以掌握人体白细胞抗原以及淋巴细胞亚群情况。结论:流式细胞术在临床检验的应用,对多疾病病毒检验有极大价值,且可以通过其了解卵巢恶性肿瘤患者的外周血免

  • 标签: 流式细胞术 临床检验 应用
  • 简介:目的:通过对脑胶质瘤细胞核DNA含量及细胞周期的分析,探讨DNA含量及细胞增殖特性与脑胶质瘤临床病理特征及预后等方面的关系。方法:将手术切除的新鲜脑胶质瘤组织制备成单细胞悬液并进行短期体外培养,然后采用流式细胞术测定瘤细胞的DNA指数(DNAindex,DI)、细胞周期分布及细胞分裂增殖指数(proliferationindex,PI)等指标。结果:①脑胶质瘤Ⅲ、Ⅳ级之间的DNA异倍体率无显著差异,但与其它各组之间有显著差异;②对照组的DI值与脑胶质瘤Ⅰ级之间无显著差异(P>0.05),但与其它各组之间有显著差异(P<0.01);③对照组的S期与胶质瘤Ⅰ、Ⅱ期之间无显著差异(P>0.05),但与Ⅲ、Ⅳ级之间有显著差异(P<0.01);④对照组的PI值与肿瘤各组之间均有显著差异(P<0.01)。结论:脑胶质瘤细胞核DNA的流式细胞术分析能较准确地判定肿瘤的恶性程度,对脑胶质瘤病人的诊断、术后辅助治疗及预后判断均有重要意义。

  • 标签: 脑胶质瘤 细胞核 DNA 含量 流式细胞术