简介:荧光定量PCR(qRT-PCR)是研究分子生物学中基因表达的一种新型核酸定量技术,具备快速高效、特异性强、重复性好、灵敏度高和自动化程度高等优点,因而根据相应的实验材料选择适宜的内参基因对于提高qRT-PCR分析的准确性显得尤为重要。Actin基因表达范围广且表达稳定,常常作为内参基因应用于qRT-PCR表达分析中。前期利用转录组测序(RNA-seq)技术获得了西葫芦低温弱光转录组数据库,本研究从中筛选到1条长达2543bp的cDNA,并对其进行了序列分析。生物信息学分析结果表明,该序列包含1个开放读码框(ORF),大小为2064bp,预测编码氨基酸数为682个,理论分子大小约为79.67kD,蛋白质等电点为6.28。WolfPsort分析发现,CpActin蛋白亚细胞定位于细胞核中。MotifScan分析显示,CpActin蛋白质的氨基酸序列207~406位和558~682位分别为Actin的中端和C端保守区域。同源性分析表明,基因编码的蛋白质与同为南瓜属的中国南瓜和印度南瓜同源蛋白的相似性达到99%,具有高度的保守性。基于所获得的基因全长cDNA序列,设计了基因ORF全长引物对CpActin-F、CpActin-R,经PCR扩增得到一条特异、明亮的条带,经测序验证,序列与RNAseq数据库的cDNA序列一致,基因命名为CpActin,GenBank登录号为MH211008。在此基础上,设计了一对荧光定量PCR引物CpActin-Fq、CpActin-Rq,分析显示,该引物具有较高的特异性和扩增效率,且在西葫芦不同组织(根、茎、花和果)和不同胁迫处理[正常(25℃,300μmol/m^2·s)、低温处理(4℃,300μmol/m^2·s)、弱光处理(25℃,80μmol/m^2·s)、低温弱光处理(4℃,80μmol/m^2·s)、强光处理(25℃,2000μmol/m^2·s)和高温处理(38℃,300μmol/m^2·s)]叶片中均能稳定表达,适合在西葫芦基因qRT-PCR表达分析的研究中作为候选内参基因。
简介:摘要:“双比”开头法可用在记叙文、说明文、议论文的开头中,虽说是万能开头法,但是,在常见的应用文中很少运用,因为应用文有其固定的格式,这一点必须要补充说明一下。关键词:排比开头对比开头双比开头文章开头的方法很多,有开门见山法、抒情揭示法、描写景物法等,本文简要介绍一种万能开头法——“双比”法。所谓“双比”法,是将排比开头法与对比开头法结合运用而形成的一种综合方法。下面结合实例从三个方面进行阐述。一、排比开头法排比开头,是指在文章的开头,运用排比的手法,先声夺人,增加文章气势,使文章富有节奏感和音韵美。用来状物,能景象纷呈;用来叙事,能酣畅淋漓;用来说理,能气势磅礴;用来抒情,能汪洋恣肆。例如:生活如酒,或芳香,或浓烈,因为诚实,它变得醇厚;生活如歌,或高昂,或低沉,因为守信,它变得悦耳;生活如画,或明丽,或素雅,因为诚信,它变得美丽。(《因诚信酿造生活》)技巧点拨:本例运用比喻、排比手法,将“生活”比作“酒”“歌”“画”,同时阐述了“诚信”在“生活”中的“酿造”作用,语句整齐,音韵和谐,情感强烈……
简介:摘要:新世纪来,我国的煤化工行业发展获得了突飞猛进的发展,为人们的生产生活带来了极大的便利,但是由此带来的环境污染问题也越来越严重。尤其是工厂尾气排放出的酸性气体,其中含有大量的二氧化硫,对生活环境的污染非常严重。随着国家环保标准的提高,我公司对以前的克劳斯硫回收工艺尾气进行了氨法脱硫二次处理,从而让排放量达到国家新的标准。
简介:人参生产由于前几年产大于销,出现了供大于求的局面,使我省东部山区蒙受重大经济损失,至使许多国营参场欠债累累,有的企业甚至破产,人参加工质量严重下降,使我国人参在国际市场信誉大降。从1995年开始,由于人参栽培面积下降,再加上省政府的宏观调控,1995年比高峰期1989年,绿色面积减少一半,1996年又比1995年减少10%左右,人参产量1996年比1995年减少15-20%,比高峰期的1992年减少60%,我省1996年人参产量低于1988年,高于1987年,总产约3000吨左右,又出现求大于供的局面,所以人参价格开始回升到历史上最高水平。由于人参缺口较大,价格的上涨,因此人参假冒商品在市场上大量出现。我省是中国人参的主产地,这样大量的假冒商品在市场上出现有损于我省的人参在国内外的声誉。建议省有关部门应引起重视,组织有关方面人员参加,共同对我省参茸市场进行一次彻底的全面的整顿和清理,狠狠地把制假、卖假产品的企业和个人给予法律制裁。下面就我省参茸市场的情况据我们所知,提出来,供打
简介:摘要随着城市用地紧张,将既有的架空线路改电缆埋入地下,可以腾出很多空间,而电缆隧道极大的改善了城市浅埋杂乱的线路铺设情况,因此,电缆隧道得到了越来越多的应用。本文对常用电缆隧道工法进行了介绍,对比了各种工法的使用条件及优缺点,对实际工程工法选择起到指导作用。