简介:目的:比较不同蛋白质提取方法在牙胚蛋白提取中的效果,寻找适合牙齿发育高通量蛋白质组学分析的蛋白质提取方法。方法:取猪胚胎第40、50、60天第三乳磨牙牙胚,利用碱性碳酸盐溶液提取牙胚初步钙化部分的蛋白,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳比较液氮研磨法和电动研磨器研磨法提取牙胚总蛋白效果,BCA(bicinchoninicacid)蛋白浓度测定法比较RIPA裂解液与尿素溶液提取牙胚总蛋白含量。结果:与液氮研磨法相比,电动研磨法提取蛋白后的聚丙烯酰胺电泳图谱蛋白条带明显更深,蛋白含量高。尿素溶液对牙胚总蛋白的提取量高于RIPA裂解液组,蛋白电泳分离效果均可。结论:采用电动研磨器研磨牙胚,组织损失量小,提取蛋白效果好于液氮研磨;采用尿素溶液提取牙胚总蛋白效果优于RIPA裂解液。初步找到适合下游高通量蛋白质组学分析的牙胚蛋白提取方法。
简介:目的:目的:研究与牙齿发育相关的骨形态发生蛋白7(bonemorphogeneticproteins7,BMP7)信号分子在小型猪乳磨牙胚中的特异性时空表达情况。方法:采用小型猪第三乳磨牙胚作为研究对象,获取不同孕期的小型猪胎猪胚胎的下颌骨,分别进行HE染色、免疫组织化学染色、放射性核素标记探针的原位杂交及实时定量RT-PCR检测BMP7分子在小型猪乳磨牙不同发育时期的表达情况。结果:HE染色显示小型猪第三乳磨牙在胚胎E40、E50、E60分别处于帽状期、钟状期以及钟状晚期(分泌期)。免疫组织化学染色从蛋白水平显示,BMP7在E40时在成釉器和间充质均有表达,成釉器表达相对强于间充质;在E50时,BMP7仍然表达在牙胚成釉器和间充质,与E40表达情况类似;在E60时则主要集中表达在间充质特别是前成牙本质细胞和前成釉细胞。原位杂交与实时定量RT-PCR从mRNA水平也验证了其表达趋势与免疫组织化学基本一致。结论:BMP7信号分子在小型猪乳磨牙发育过程中呈特异性的时空表达,提示其与牙齿形态发生和细胞分化相关。
简介:从前有个孩子叫则安,则安的老师教他写日记,还告诉他,日记不是给别人看的东西,只有不作假才能正视自己。则安乘乖地把好事、坏事都写下来,却发现日记被妈妈偷看了,这可真叫人生气。他开始在日记里编一些根本没可能发生的事情,比如厕所里出现了蛇、晴朗的天空下起小猪来……没想到,日记里写的故事变成了真的,天哪,该怎么办呢?我叫则安。三年级三班。我最自豪的一件事,就是每天记日记。我是从二年级开始记日记的。暑假,班主任和子老师开始教我记日记。我一天也不落,还配上了插图。可我有时一边记日记、一边会脸发红,
简介:猪喘气病是一种由猪肺炎支原体引发的慢性呼吸道疾病,属慢性接触性传染病,病猪发病时有体温升高、食欲减退、喘气、咳嗽及侧卧腹式呼吸等表现,其病变特征为融合性支气管肺炎。该病的发病率较高,死亡率较低,多见于潮湿、寒冷的季节,近年来常与圆环病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征(porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)、猪伪狂犬病、猪肺疫等混合感染,导致其死亡率随之升高,给猪养殖业造成严重的经济损失,本文介绍了猪喘气病与猪肺疫混合感染的病因、临床症状、病理变化、诊断及综合防治措施,以供参考。