简介：近年，代谢综合征（Metabolicsyndrome，MS）及其高发病率严重威胁着人类的健康和生命。代谢综合症病因学的核心是胰岛素抵抗（InsulinResistance，IR），然而，其相关机制并不是十分清楚，研究显示血浆中某些炎性因子（如：C反应蛋白、白细胞介素-6、肿瘤坏死因-α）浓度的升高与胰岛素抵抗和代谢综合症密切相关，表明炎性因子在胰岛素抵抗过程中具有重要作用。本文将就这些炎性因子影响胰岛素敏感性的机制加以介绍。

简介：目的探讨高脂饮食对西藏小型猪胰岛素抵抗（ＩＲ）及肝胰岛素受体底物（ＩＲＳ）１、２表达的影响。方法将１０只西藏小型猪随机分为正常对照组（Ｃｔｒ）５只饲喂普通饲料、ＩＲ模型（ＩＲｍｏｄｅｌ）组５只饲喂高脂饲料，连续造模１２周。造模１２周后，称重并测量体长，计算体质量指数（ＢＭＩ），空腹取前腔静脉血测定总胆固醇（ＴＣ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ-Ｃ）、高密度脂蛋白（ＨＤＬ-Ｃ）、甘油三酯（ＴＧ）、游离脂肪酸（ＦＦＡ）、空腹血糖（ＦＢＧ）和胰岛素（ｉｎｓｕｌｉｎ），计算胰岛素抵抗指数（ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓｍｏｄｅｌａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ-ｅｓｔｉｍａｔｅｄｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＨＯＭＡ-ＩＲ）；同时进行糖耐量试验，并计算糖耐量曲线下面积（ＡＵＣ）；取肝组织检测ＩＲＳ-１和ＩＲＳ-２基因和蛋白表达，并行油红Ｏ、ＰＡＳ和ＨＥ染色，分别观察肝脂质沉积、糖原及组织病理变化。结果与正常对照组比，ＩＲ模型组体重、ＢＭＩ指数、ＴＣ、ＬＤＬ-Ｃ、ＨＤＬ-Ｃ、ＦＦＡ、ＦＢＧ、ｉｎｓｕｌｉｎ和ＨＯＭＡ-ＩＲ指数均显著升高（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１）；糖耐量试验显示血糖和胰岛素水平曲线下降延缓，而ＡＵＣ血糖和ＡＵＣ胰岛素均明显升高（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１）；肝组织中出现脂质沉积、糖原增加和局部肝细胞浊肿、部分胞核消失或被挤向一端，偶见淋巴细胞浸润；同时肝组织中ＩＲＳ-１和ＩＲＳ-２ｍＲＮＡ和蛋白表达均显著降低（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１）。结论高脂饮食可引起西藏小型猪胰岛素抵抗，肝组织ＩＲＳ-１和ＩＲＳ-２表达降低是高脂饮食影响西藏小型猪胰岛素敏感性的分子机制之一。

简介：12月11日，来自上海瑞金医院、深圳华大基因研究院等单位的科研人员，发现位于转录因子YY1上的T372R高频突变与胰岛素瘤发病机理相关。这为功能性胰腺内分泌肿瘤的诊断及治疗提供了潜在靶点，也为与胰岛素分泌相关的糖尿病研究提供了新思路。相关成果在线发表于《自然-通讯》杂志。

简介：在重组人胰岛素的过程中,可以利用蛋白化学物质及相应的纯化工艺对其进行相应的纯化,对重组人胰岛素的原核表达进行有机分析,可以为相应的纯化制备奠定一定的合理基础.在相应的下游纯化工艺中,主要使用的是一种复性溶液,其中含有一定比例的乙醇及谷胱甘肽.

简介：目的观察急性高血糖影响小鼠第一时相胰岛素分泌的功能及形态学变化特点。方法给C57/BL6J小鼠完成颈静脉插管后输注20%高糖溶液4h,建立急性糖毒性小鼠模型,行腹腔葡萄糖耐量实验（intraperitonealglucosetolerancetest,IPGTT）及口服葡萄糖耐量实验（oralglucosetolerancetest,OGTT）评价葡萄糖耐量及胰岛素分泌功能。HE染色及电镜观察胰岛形态变化及细胞内胰岛素分泌颗粒亚细胞结构变化。结果IPGTT实验中急性糖毒性组15min血糖值较对照组显著增加[（10.3±0.33）mmol/Lvs（19.3±1.66）mmol/L],上升87%（P〈0.05）,OGTT实验中30min血糖值较对照组显著增加[（9.8±0.31）mmol/Lvs（18.16±1.01）mmol/L],升高85%（P〈0.05）,且早期胰岛素分泌高峰受损且分泌延迟。GSIS实验中急性糖毒性组在基础状态时（葡萄糖浓度2.8mmol/L）和高糖（16.7mmol/L）刺激后,胰岛素分泌较对照组显著降低[（0.481±0.003）ng/mLvs（0.702±0.121）ng/mL,（2.43±0.03）ng/mLvs（4.07±0.34）ng/mL],分别下降46%和67%（P〈0.05）;胰岛素含量测定结果显示,急性糖毒性组比对照组降低[（97.01±2.05）ng/mLvs（65.12±0.42）ng/mL,（121.40±0.58）ng/mLvs（62.7±0.48）ng/mL],下降49%和94%（P〈0.05）。HE染色显示急性糖毒性胰岛边界不规则、内部细胞排列不整;透射电镜可见细胞内胰岛素分泌颗粒空泡,线粒体嵴断裂。结论急性葡萄糖毒性使胰岛β细胞内胰岛素储备减少,导致第一时相分泌胰岛素峰值降低及延迟。

简介：目的获得猪胰岛素启动子调控外源基因的高效表达载体,为制备转基因猪胰岛特异性表达目的基因奠定基础。方法利用猪胰岛素启动子（PIP,包含5＇调控区、第一外显子、第一内含子及第二外显子ATG前的序列共1.5kb）构建表达载体,连接PIP和EGFP的酶切位点HindⅢ设计在起始密码子前,命名为PIP-HindIIIEGFP。鉴于酶切位点的插入位置可能会影响外源基因的表达效率,对载体进行了优化：将HindIII酶切位点删除,实现PIP和EGFP无缝连接,载体命名PIP-EGFP;将第一内含子3＇端的内含子剪接受体位点（splicingacceptorsite,SA）突变为HindIII内切酶识别位点,命名为PIP-SA（M）-EGFP。三种载体分别电转染小鼠胰岛素瘤β细胞株MIN-6细胞、猪耳成纤维细胞以及猪肾细胞,48h后通过荧光强度、流式分析、RT-PCR及Westernblot检测,验证载体的表达效率。结果转染细胞后,三种载体都仅在MIN-6胰岛β细胞表达绿色荧光。RT-PCR及其产物测序结果显示三种载体的胰岛素启动子第一内含子的剪切存在差异：载体PIP-HindIII-EGFP和PIP-EGFP的内含子存在剪切和不剪切两种情况,剪切不稳定;载体PIP-SA（M）-EGFP的SA位点突变后内含子不剪切,流式细胞及Westernblot检测显示,与另外两种载体相比,该载体目的蛋白的表达量最高。结论通过突变胰岛素启动子第一内含子的3＇端的剪接受体位点,成功获得了胰岛β细胞的高效表达载体,可用于制备胰岛特异表达外源基因的转基因猪。

简介：目的观察运动干预对高脂饲料诱导胰岛素抵抗（IR）大鼠白细胞介素1β（IL-1β）表达的影响,探讨运动减轻IR的可能机制。方法健康Wistar雄性大鼠分为基础饲料喂养组（normalchowgroup,NC）,高脂膳食喂养组（high-fatdietgroup,HF）。高脂膳食喂养Wistar雄性大鼠10周,构建IR动物模型。10周后,HF组再随机分为高脂喂养运动组和非运动组,游泳运动干预4周。游泳运动干预前后以正常血糖-高血浆胰岛素钳夹实验技术[hyperinsulinemic-euglycemicclamp（HEC）technique]评估IR大鼠胰岛素敏感性,ELISA法测定大鼠血清IL-1β水平,RT-PCR法测定大鼠骨骼肌IL-1βmRNA表达。结果HF组大鼠葡萄糖输注率（glucoseinfusionrate,GIR）显著低于NC组（P〈0.05）,HF组血清IL-1β水平及骨骼肌组织IL-1βmRNA表达明显高于NC组（P〈0.05,P〈0.01）;运动组大鼠血清IL-1β水平及骨骼肌组织IL-1βmRNA表达明显低于非运动组（P〈0.05）,与NC组差异无显著性（P〉0.05）。结论运动改善IR大鼠胰岛素敏感性,可能与降低IR大鼠IL-1β的表达有关。

简介：目的：建立十二指肠-空肠转流手术（duodenal-jejunalbypasssurgery，DJB）动物模型，观察术后GK大鼠胰岛素抵抗情况的变化，研究DJB手术治疗2型糖尿病的机理。方法雄性Wistar大鼠为空白对照组；雄性GK大鼠分为模型对照组和DJB手术组。分别于手术后3、6和9周每组随机抽取6只动物进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验；钳夹实验结束后1周，检测肝脏GcK、G6P以及PEPCKmRNA表达情况以及骨骼肌细胞膜GLUT4含量变化。结果术后3周和6周，DJB手术组动物的葡萄糖输注率（GIR）较模型对照组差异无显著性（P＞0.05），肝脏GcK、G6P以及PEPCKmRNA表达量较模型对照组差异无显著性（P＞0.05）；术后9周，DJB手术组动物的葡萄糖输注率（GIR）显著高于模型对照组（P＜0.05），肝脏GcK表达量DJB手术组显著高于模型对照组（P＜0.05），而G6P以及PEPCKmRNA表达量显著低于模型对照组（P＜0.05）；DJB手术后3、6和9周，DJB手术组骨骼肌细胞膜GLUT4的含量较模型对照组差异无显著性（P＞0.05）。结论DJB手术改善血糖的水平是通过改善体内肝脏组织的胰岛素抵抗，通过调节糖代谢酶的表达，进而提高肝脏葡萄糖摄取并抑制肝脏糖异生作用。在实验周期内，DJB手术对于骨骼肌组织的胰岛素抵抗未发现有明显改善，提示DJB手术治疗2型糖尿病的效果与时间有一定关系。

简介：目的构建人胰岛素基因真核高效表达载体,为胰岛素转基因研究奠定基础.方法用限制性内切酶SpeⅠ和HindⅢ消化pEF1α-GFP,回收1.2kbEF1α启动子,插入到pCMV-mINS的NruⅠ和HindⅢ位点中,获得重组质粒pEF1α-mINS;将pCMV-mINS和pEF1α-mINS分别转染BHK细胞,用G418筛选,阳性克隆传至20代后,分别用放免方法和免疫组化法分析胰岛素和/或胰岛素原在BHK细胞中的表达情况.结果经放免测定,pCMV-mINS和pEF1α-mINS在BHK细胞中胰岛素和/或胰岛素原的表达量分别为4.077μIU/ml和6.897μIU/ml.经免疫组化分析,pCMV-mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为190.0±19.56;pEF1α-mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为181.4±18.45,在BHK细胞核中表达水平的灰度值为155.4±11.66.结论在BHK细胞中启动子EF1α启动胰岛素基因表达的活性比启动子CMV高.

简介：目的：观察美常安对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者临床症状及胰岛素抵抗（IR）的作用。方法：选取2009年4月至2013年3月我院收治的88例NAFLD患者,随机分为治疗组和对照组。对照组给予基础治疗,治疗组在对照组的基础上,加用美常安胶囊进行治疗。比较两组疗效及治疗前后两组血清谷丙转氨酶（ALT）、甘油三酯（TG）及稳态胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）水平,并分析血浆D乳酸、TNF-α、内毒素与HOMA-IR的相关性,观察两组不良反应情况。结果：治疗组治疗有效率为52.3%,明显高于对照组的29.5%（P〈0.05）。治疗后治疗组ALT、TG、HOMA-IR下降幅度,均明显优于对照组（P〈0.05）。治疗后治疗组患者血浆D乳酸、TNF-α、内毒素水平明显低于对照组（P〈0.05）,且治疗组患者HOMA-IR与患者血浆D乳酸、血清TNF-α、内毒素水平呈正相关（r=0.352,0.44,0.48;均P〈0.05）。不良反应发生率低,且两组不良反应发生率无显著差异（P〉0.05）。结论：美常安治疗NAFLD疗效显著,可降低ALT、TG水平,降低肠道通透性,改善肠源性内毒素血症,改善IR,且安全性较高。

简介：目的：研究肌肉肌醇（myo-inositol,MI）对胰岛素抵抗细胞（IR-HepG2）细胞外葡萄糖消耗量的影响。方法：采用CCK-8法观察MI、高糖对HepG2细胞活力的影响,通过高糖持续作用,胰岛素刺激诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗细胞模型,葡萄糖氧化酶法（GOD-POD法）鉴定模型是否成立,并用GOD-POD法检测正常HepG2细胞和MI对HepG2胰岛素抵抗细胞葡萄糖消耗量的变化。结果：在对HepG2细胞活性没有影响的情况下,MI增加了胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量。与模型对照组相比,葡萄糖氧化酶法结果显示,MI可显著增加胰岛素抵抗模型葡糖糖的消耗量（P〈0.01）。结论：MI可明显增加IR-HepG2细胞模型葡萄糖的消耗量,对IR-HepG2细胞模型胰岛素抵抗有显著的改善作用。

简介：目的：探讨二甲双胍对多囊卵巢不孕患者卵巢功能、雌激素水平及胰岛素抵抗的影响。方法：选取我院收治的多囊卵巢不孕症患者72例，根据用药不同分为对照组与实验组，每组36例。对照组患者给予来曲唑促排卵治疗，实验组患者在对照组基础上予以二甲双胍治疗。观察并比较治疗前后两组患者的卵巢功能、雌激素水平、胰岛素抵抗及受孕情况。结果：与治疗前比较，两组患者治疗后卵巢功能、雌激素水平、胰岛素抵抗及受孕情况均得到改善，差异具有统计学意义（（P〈0．05）；与对照组比较，实验组患者治疗后卵巢功能显著改善，雌激素水平显著提高，胰岛素抵抗情况明显好转，受孕情况显著改善，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论：二甲双胍能够调节多囊卵巢不孕症患者的卵巢功能，提高雌激素水平，改善胰岛素抵抗，提高受孕率，值得临床推广应用。

简介：目的：探讨血浆hs-CRP、IL-18及和肽素（copeptin）与冠心病类型的关系及临床意义。方法：36例对照组,41例稳定型心绞痛（SA）组,43例不稳定性心绞痛（UA）组,48例急性心肌梗死（AMI）组,均符合缺血性心肌病的诊断标准。采用免疫比浊法测定hs-CRP水平;采用放射免疫法测定血浆和肽素;采用双抗体夹心ELISA法测定血浆IL-18水平。结果：UA组与AMI组WBC、NEU、hs-CRP、IL-18、和肽素水平显著高于正常对照组（P〈0.05）;与UA组比较,AMI组的hs-CRP、IL-18水平显著升高;IL-18与TG、LDL-c、hs-CRP及和肽素呈正相关（P〈0.05）,与HDL-c呈负相关（P〈0.05）。结论：血浆和肽素与IL-18水平随着冠心病严重程度的增加而升高,其水平变化对冠心病的诊断、病情的严重程度、临床危险分层具有一定的临床意义。

简介：在维持机体内环境稳态中，循环血液起着关键作用。血液成份的变化在疾病诊断与疗效判断中十分重要。因此，采用血清、血浆或全血，是一个涉及临床医疗与科研质量的重要问题。WHO于2002年邀请41位专家进行专题研讨，并发表了一个报告，比较详尽地评述了血清、不同抗凝剂制备的血浆和全血在常用临床检验中的应用，并介绍了各种血标本相关指标的稳定条件。近20年来，许多学者在这一领域已进行了大量工作。虽然我国也有人开始注意这一问题，但还不够重视。例如，血糖测定，WHO推荐使用EDTA抗凝全血，肝素抗凝全血需谨慎应用；但明确指出不宜使用血清，否则测定值偏低。北美与欧洲很少采用血清测定血糖。但我国不少检验医学书籍仍然推荐使用血清，甚至在高等医学院校教材中推荐使用血清（浆）标本，将两者视同相等。产生这些不妥的原因，主要与生理学和生物化学教学中长期强调血清是缺乏纤维蛋白原的血浆所致。因此，明确血清与血浆的重要差别是非常必要的。

简介：目的：研究血浆脑钠肽在阵发性房颤和持续性房颤患者中的变化及临床意义。方法：用酶联免疫法检测23例阵发性房颤和19例持续性房颤患者血浆BNP水平，并与健康对照组BNP进行比较。结果：转复为窦性心律前，两房颤组BNP水平无显著差别，且均高于对照组，转复为窦性心律后，两房颤组BNP水平明显下降（P〈0．05）。结论：心房颤动影响血浆BNP水平的分泌，在转复为窦性心律后血浆BNP水平下降。提示血浆BNP水平可作为预测心房颤动发生的生化指标。

简介：目的:探究肺癌患者与肺部良性结节病人血浆外泌体中蛋白质组的差异。方法:收集肺癌与肺部良性结节病人的术前血浆,随机选取肺腺癌病人血浆15例、肺鳞癌病人血浆10例作为实验组,肺部良性结节病人血浆5例作为对照组,采用超速离心法分离得到外泌体,定量质谱鉴定分析肺癌病人与肺部良性结节病人血浆外泌体蛋白质表达的差异性,SDS-PAGE和蛋白质免疫印迹法检验提取到的蛋白质。结果:共检测到血浆外泌体蛋白质253个,并初步确定其中18个在肺癌病人血浆外泌体中表达上调,8个在肺癌病人血浆外泌体中表达下调,免疫印迹法验证了上调蛋白质中的补体蛋白C4a。结论:鉴定出26个外泌体差异表达蛋白质,为肺癌早期诊断提供了新的候选分子。

简介：目的通过对吸烟大鼠血浆尼古丁、可替宁含量的测定，探讨香烟在体内的内暴露水平。方法清洁级ＳＤ雄性大鼠１６０只，随机分为２、４、６、８、１２周的低、中、高染毒剂量组及对照组，每组１０只。采用呼吸道静式染毒，每日染毒一次，染毒周期为２、４、６、８、１２周。观察大鼠的一般毒性效应，运用气相色谱-质谱联用法检测吸烟大鼠血浆中尼古丁、可替宁的含量。结果香烟烟雾暴露组大鼠在第３周后逐渐开始出现间歇咳嗽，腹式呼吸加剧，鼻噪音等症状，暴露时间越长，症状越明显；染毒剂量越高，染毒周期越长，大鼠体重减少越明显，与空白对照组相比，差异有显著性（Ｐ＜０.０１）；大鼠血浆尼古丁的保留时间为７.５～８.５ｍｉｎ，随暴露时间的延长，暴露剂量的增加，大鼠血浆中尼古丁含量较空白对照组（１５５±５６.６５）ｎｇ／ｍＬ有所增加；大鼠血浆可替宁的保留时间为１１.５～１２.５ｍｉｎ；随暴露时间的延长，暴露剂量的增加，大鼠血浆中可替宁含量较空白对照组（３４０±４１.９７）ｎｇ／ｍＬ有所增加，且呈现剂量?反应关系，不同暴露周期间可替宁含量的差异有显著性（Ｐ＜０.０５），且暴露时间与暴露剂量存在交互效应（Ｐ＜０.０５）。结论香烟烟雾暴露可造成大鼠机体不同程度的损伤，大鼠血浆可替宁浓度能够有效反映香烟烟雾内暴露情况，且呈现较好的剂量-反应关系。

简介：防御素是广泛分布于自然界中的广谱性抗菌多肽,在生物体内由特殊的细胞合成,经过一系列的加工后分泌表达出功能分子,由于其抗菌活性高,且作用范围广,引起了人们极大的兴趣,目前通过对其天然表达细胞的培养、合成肽和基因表达等手段制备,并进一步对其作用机理进行了探讨,但临床应用仍未见报道。

简介：目的探讨血浆（1—3）-β-D-葡聚糖对早期诊断深部真菌感染的临床价值。方法收集2009年3月-11月间在北京友谊医院感染科住院患者174例，根据侵袭性真菌感染诊断标准，将患者分为排除深部真菌组、确诊组、临床诊断组、拟诊组。应用MB-80微生物动态快速检测系统，检测各组患者血浆（1—3）-β—D-葡聚糖水平，分析比较深部真菌感染组和非深部真菌感染组血浆（1-3）-β-D-葡聚糖的水平。结果深部真菌感染组血清（1-3）-β-D-葡聚糖含量为（153．4±37．0）pg／mL，排除深部真菌感染组血清（1-3）-β—D-葡聚糖含量为（54．6±8．6）pg／mL，两组间有统计学差异（t=3．4，P〈0．01）；分析血浆（1-3）-β-D-葡聚糖诊断深部真菌感染，以20pg／mL为诊断阈值，其准确率、敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为70．1％、87．5％、61．9％、52．1％、91．2％。确诊病例、临床诊断病例、拟诊病例，3组间血清（1—3）-β-D-葡聚糖含量无统计学差异（P〉0．05）。结论深部真菌感染组的葡聚糖水平明显高于排除深部真菌感染组的葡聚糖水平，具有统计学意义。以20pg／mL为诊断阈值，其准确率、敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为70．1％、87．5％、61．9％、52．1％、91．2％，可作为深部真菌感染的最佳诊断阈值。

简介：目的：分析老年人群空腹血浆游离脂肪酸水平及构成特点。方法：采用高效液相色谱（highperformanceliquidchromatog．raphy，HPLC），检测149名60—104岁的健康老年人空腹血浆游离脂肪酸（FreeFattyacids，FFAs）的水平，包括月桂酸（C12：0）、二十碳五烯酸（C20：5）、豆蔻酸（C14：0）、软油酸（C16：1）、花生四烯酸（C20：4）、亚油酸（c18：2）、软脂酸（C16：0）、油酸（C18：1）和硬脂酸（C18：0）。结果：血浆FFA水平呈偏态分布；含量占血浆总FFA10％以上的单个FFA有3种，分别为：C16：0，C18：1和C18：2，共占总FFA的80％。结论：C16：0，C18：1和C18：2为血浆总FFA的主要组分，可体现血浆总FFA水平，并给出了健康老年人群的血浆总FFA及9种亚组分的均值、四分位数及中位数水平。