简介：TILLING（TargetingInducedLocalLesionsInGenomes）即定向诱导基因组局部突变技术，是近年发展起来的一种高通量检测点突变的反向遗传学方法。本研究从PCR模板量及酶切体系中CELI的酶量两个方面对家蚕TILLING技术的检测体系进行了优化。结果表明：本实验在应用TILLING技术筛选家蚕突变体过程中，用于PCR扩增的家蚕基因组DNA模板最佳用量为20ng；CELI酶切的20μL反应体系中，加入的最适酶量为0．5μL（本实验室从芹菜中自提的CELI酶10倍稀释液）。本研究初步对TILLING技术应用于家蚕化学诱导突变检测体系进行了优化，为TILLING技术在家蚕功能基因组研究中的应用奠定了基础。

简介：以浓度0.4%～0.1%的秋水仙碱溶液,处理十个无性系二倍体桑品种嫁接苗的萌发芽,或当年嫁接成活苗的顶芽;第二年春季将畸叶枝段的桑芽,应用芽接方法分离嫁接;对经过处理而未形成四倍体的植株,施行连年齐拳剪伐.四倍体的诱导率,平均达到35.42%.

简介：一般多倍体植物,具有许多有经济价值的特征特性,已广泛引起育种工作者的重视与生产上应用。桑树栽培品种以二倍体为主,间有少数三倍体桑,国内外生产实践已证明,三倍体桑具有高产、优质、适应性广的性能。目前栽培品种尚末发现有自然形成四倍体桑的报导,为了选育适应生产上所需的三倍体桑树品种(或组合),只得从人工诱导四倍体桑上下功夫。日本、苏联方面利用秋水仙素处理桑种子、种苗、顶芽、插条等诱导四倍体

简介：使用含桑蚕血球细胞（主要是颗粒细胞和浆细胞）的离体培养系,经各种刺激物诱导后,对蛋白激酶C（下称PKC）和蛋白激酶A（PKA,需cAMP型）的活性进行了试验。血球细胞经大肠杆菌中的类脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）、离子霉素、霍乱弧菌产生的霍乱毒素或笨基乙酸汞（杀菌剂）（4β—phorbor12—myristate13acetate）（PMA）处理后便可清楚地检测到PKC的活性,而没有上述刺激物诱导时,其活性情况没试验过。结果表明,不仅LPS而且Ca2+和一种G蛋白均可能参与了PKC活性诱导的信号转导。同样用LPS、dcAMP、离子霉素或霍乱毒素处理血球细胞,对PKA的活性进行了类似的检测,而不经处理的对照细胞没有PKA活性,而且LPS、cAMP、Ca2+和G蛋白很可能也参与了PKA活性诱导过程中的信号转导。用抗兔脑PKC—α的单克隆抗体进行蛋白质印迹分析,结果以LPS处理的血球细胞样品中有一种与单抗有交叉反应的90KDa蛋白质,而未经LPS处理的对照样品不存在这种蛋白。桑蚕血球细胞内的PKC和PKA被细菌感染后的LPS激活后,可以诱导自身防御反应,例如抗菌蛋白基因的表达。