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  • 简介:摘要目的探讨人细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)外泌体对诱导人尿细胞(urine-derived stem cells,USCs)向细胞分化的作用。方法体外分离培养USCs和NPCs,提取NPCs外泌体,以Western-blot检测外泌体标记蛋白;以GFP慢病毒转染标记USCs细胞质、DAPI染料标记USCs细胞核以及PKH26染料标记NPCs外泌体;将USCs与NPCs外泌体共孵育12 h并观察摄取情况,采用NPCs外泌体和非接触共培养方法诱导USCs分化,检测各组细胞标志基因mRNA的相对表达量和450 nm波长处的吸光度。结果分离的USCs具备向骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞分化的能力,高表达干细胞标志蛋白CD29(99.57%)、CD44(97.46%)、CD73(97.71%),低表达干细胞阴性蛋白CD31(0.59%)、CD45(0.19%)。分离的NPCs高表达细胞标志蛋白COL2A1、ACAN、SOX-9。提取的NPCs外泌体高表达标志蛋白CD63、CD81、Tsg101。共孵育12 h后,NPCs外泌体与USCs细胞膜融合并出现在USCs细胞质中。共培养第3、5、7天时,外泌体组USCs细胞吸光度值(0.44±0.004、0.76±0.004、0.82±0.006)高于共培养组(0.39±0.022、0.63±0.035、0.69±0.012),差异有统计学意义(P<0.05)。第3、7、14、21天外泌体组USCs核标志基因的mRNA相对表达量分别为ACAN(1.80±0.31、3.50±0.21、5.35±0.31、7.46±0.12)、COL2A1(1.43±0.15、4.33±0.23、6.89±0.22、8.11±0.31)、SOX-9(2.21±0.13、3.13±0.11、3.96±0.14、4.52±0.26)、HIF-1α(1.45±0.16、2.14±0.21、4.31±0.41、4.01±0.25)均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);第14、21天外泌体组USCs核标志基因的mRNA相对表达量为ACAN(5.69±0.21、6.69±0.13)、COL2A1(6.33±0.17、7.89±0.15)、SOX-9(4.19±0.29、4.38±0.12)、HIF-1α(4.49±0.32、4.96±0.26)高于非接触共培养组ACAN(3.69±0.35、5.13±0.23)、COL2A1(3.40±0.16、6.79±0.19)、SOX-9(2.26±0.32、3.69±0.26)、HIF-1α(2.39±0.11、3.96±0.13),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论人细胞外泌体在体外可诱导人尿细胞分化为细胞,与非接触共培养相比外泌体法具有更高的诱导效率,并可更好地保持细胞的增殖活性。

  • 标签: 髓核 外泌体 干细胞 细胞分化
  • 简介:摘要目的研究己椒苈黄汤对慢性肺炎性心脏病患者肺动脉高压的影响。方法选取2013年2月至2014年2月于我院就诊的肺性心脏病患者78例,将其分为两组,在常规治疗的基础上,对照组予维拉帕米治疗,实验组予己椒苈黄汤治疗。治疗2周后比较两组患者的平均肺动脉压、左心射血分数及用力呼气肺活量等指标变化。结果两组患者治疗后组间比较在MPAP、LVEF指标变化上具有显著性统计学意义(P<0.01),在FEV指标变化上具有统计学意义(P<0.05)。结论己椒苈黄汤能有效降低患者肺动脉压、提高左心射血分数及用力呼吸肺活量,疗效显著,值得临床进一步推广。

  • 标签: 己椒苈黄汤 慢性肺炎性心脏病 肺动脉高压