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  • 简介:摘要目的探究动物体内培养软骨微组织-仿生基质复合体的生物学转归。方法采取中华小白猪肋软骨,切割并筛选径长小于200 μm的微组织,复合胶原蛋白/透明质酸/硫酸软骨素仿生基质形成软骨微组织-仿生基质复合体,于实验猪体内分别培养2个月、4个月后取出复合体,测量体积变化及吸收率,两组体积采用配对t检验比较。大体标本观察、苏木精-依红染色切片观察其生物学特性及转归。结果体内培养中复合体内软骨微组织可较好存活,纤维组织包裹形成结构稳定的整体,仿生基质可被吸收,移植2个月后平均体积为(2.100±0.115) ml;吸收率为23.333%~36.667%;移植4个月后平均体积为(1.756±0.083) ml;吸收率为36.667%~46.667%,差异有统计学意义(t=10.193,P<0.05)。体内培养过程中出现两种形式细胞增殖,但增殖范围较小,细胞分泌较少。结论动物体内培养软骨微组织-仿生基质复合体可见其具有良好的生物相容性,培养4个月可见少量细胞增殖,但尚无法满足整形外科要求。

  • 标签: 软骨微组织 软骨移植 仿生基质 增殖
  • 简介:摘要目的研究人增生性瘢痕与正常皮肤组织成纤维细胞中氧化应激程度及相关通路的表达是否存在差异。方法选取并收集2019年6月至2020年7月期间就诊于解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部接受手术切除治疗的8例增生性瘢痕患者的瘢痕组织及供皮区正常全层皮肤组织,其中男5例,女3例,年龄(35.0±11.7)岁。组织块法提取培养原代成纤维细胞,并传代培养,待细胞传代至第3代进行以下实验:(1)CCK-8法检测增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)和正常皮肤成纤维细胞(NSF)的增殖能力;(2)流式细胞术检测HSF和NSF中活性氧含量;(3)比色法检测2种细胞内总超氧化物歧化酶(SOD)相对活力值;(4)RT-PCR检测2种细胞中NQO1基因表达量;(5)RT-PCR检测2种细胞中Nrf2基因表达量;(6)蛋白质印迹法检测2种细胞中Nrf2和Bcl2蛋白含量;(7)细胞免疫组织化学染色检测Nrf2在2种细胞中的表达分布情况。结果采用SPSS 25.0统计软件分析,行独立样本t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。结果(1)与NSF比较,HSF的生长速度更快,2种细胞的细胞数量从第3天起差异有统计学意义(统计结果从3~7 d依次为t=2.631,P=0.039;t=7.025,P<0.001;t=5.031, P<0.001;t=4.241, P=0.002;t=6.525, P=0.003);(2)HSF组中活性氧含量为75.39%±3.06%,明显高于NSF组的45.36%±3.66%,两者比较差异有统计学意义(t=-17.804, P<0.001);(3)HSF组SOD活力值为(50.76±0.52) U/ml,比NSF组的(42.76±1.35) U/ml升高,两者比较差异有统计学意义(t=15.674,P<0.001);(4)HSF组中NQO1 mRNA相对表达量为0.859±0.076,比NSF组的1.595±0.181降低,两者比较差异有统计学意义(t=3.763,P=0.020);(5)HSF组中Nrf2 mRNA相对表达量为0.590±0.055,相较于NSF组的1.595±0.146降低,两者比较差异有统计学意义(t=6.445,P=0.003);(6)HSF组的Nrf2蛋白相对含量为0.314±0.035,相较于NSF组的0.912±0.039明显降低,两者比较差异有统计学意义(t=22.554,P<0.001);HSF组的Bcl2蛋白相对含量为0.466±0.020,相较于NSF组的0.734±0.066明显降低,两者比较差异有统计学意义(t=7.780,P<0.001);(7)NSF和HSF细胞中均发现有Nrf2蛋白表达,且细胞核与细胞质中均有蛋白分布。结论HSF的氧化应激程度较高,可能是某些原因导致Nrf2含量降低,造成各种抗氧化酶表达降低,最终使活性氧蓄积导致。HSF的增殖和凋亡能力均强于NSF,而活性氧可以导致细胞凋亡,说明氧化应激增强可能是增生性瘢痕的发病机制之一。

  • 标签: 增生性瘢痕 氧化应激 成纤维细胞 活性氧 细胞凋亡