简介：摘要目的分析环状RNA（circRNA）在痛风患者PBMCs中的表达谱，探讨circRNA在痛风发生发展中可能的作用机制。方法收集24例急性期痛风患者（AG）、24例间歇期痛风患者（IG）以及24名健康体检者（HC）外周血标本。随机选取3例AG、3例IG、3名HC，采用基因芯片技术筛选其PBMCs中差异表达的circRNA。选择两两对比组间差异倍数较大的6个circRNA，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）在所有72例研究对象PBMCs中验证了它们的相对表达量。对显著差异表达的circRNA（变化倍数>1.5，P<0.05）进行了基因本体（GO）分析、京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析以及预测了其与微RNA（miRNA）的相互作用。采用中位数（四分位数间距）描述数据，组间比较采用Mann-Whitney U检验。结果（1）芯片数据显示，与HC组相比，AG和IG组分别有116个和41个显著差异表达的circRNA；与IG组相比，AG组有105个显著差异表达的circRNA。（2） RT-qPCR验证的6个circRNA中，5个基因表达趋势与芯片结果一致，其中hsa_circRNA_105034在AG组中表达量相对于IG及HC组差异具有统计学意义[AG组5.17（4.60），IG组1.68（2.39），HC组0.90（0.73），AG组与IG组（Z=-4.413，P<0.01）；AG组与HC组（Z=-5.052，P<0.01）]。（3）生物信息学分析：① GO分析发现差异circRNA主要参与DNA的转录调控、细胞的正性调控及蛋白质修饰等；② KEGG通路分析发现它们可能参与了丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路介导的免疫反应；③ circRNA与miRNA的结合位点预测提示痛风中差异表达的circRNA可能通过靶向miRNA-146a、miRNA-302b和miRNA-23a等分子影响其炎症反应。结论痛风患者PBMCs中存在差异表达的circRNA，可能与痛风的发生发展密切相关。

简介：摘要目的检测IL-2/Janus激酶3（JAK3）/信号转导和转录激活因子（STAT）5信号通路在AS患者外周血中的表达并探讨其在AS发生发展中的作用机制。方法收集30例AS活动期患者（ASA）、30例AS稳定期患者（ASS）和50名健康体检者（HC）的临床资料、外周血标本及实验室检查指标。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测JAK3、STAT5a及STAT5b mRNA表达水平；采用蛋白质印迹法检测JAK3、STAT5a和STAT5b蛋白及磷酸化蛋白表达水平；采用ELISA检测血浆中IL-2浓度。计量资料符合正态分布采用两独立样本t检验或单因素方差分析，3组间两两比较采用LSD-t检验，非正态分布用Mann-Whitney U检验或Kruskal-Wallis H检验，分类变量关联性分析采用χ2检验，变量间相关分析采用Spearman相关分析，采用受试者工作特征（ROC）曲线评估JAK3、STAT5a和STAT5b mRNA表达水平监测AS活动性的价值。结果①JAK3、STAT5a和STAT5b的mRNA表达水平在3组间的差异均有统计学意义（F=65.98，P<0.001；F=21.15，P<0.001；F=13.67，P<0.001），ASA组JAK3 mRNA表达水平（2.5±0.9）明显高于ASS组（1.1±0.4）和健康体检者组（1.0±0.5），差异有统计学意义（P均<0.001），ASA组STAT5a mRNA表达水平（1.4±0.3）明显高于ASS组（0.9±0.3）和健康体检者组（1.0±0.3），差异均有统计学意义（P<0.001），ASA组STAT5b mRNA表达水平（1.5±0.6）明显高于ASS组（1.0±0.4）和健康体检者组（1.0±0.4），差异均有统计学意义（P<0.001），AS患者中HLA-B27阳性组JAK3 mRNA表达水平（1.92±1.01）高于HLA-B27阴性组（1.44±0.60），差异有统计学意义（t=-2.22，P=0.032）。JAK3、STAT5a和STAT5b蛋白磷酸化水平在3组间的差异均有统计学意义（F=91.56，P<0.001；F=25.15，P<0.001；F=178.59，P<0.001），ASA组JAK3蛋白磷酸化水平（1.035±0.076）明显高于ASS组（0.568±0.019）和健康体检者组（0.536±0.064），差异均有统计学意义（P<0.001），ASA组STAT5a蛋白磷酸化水平（1.166±0.096）明显高于ASS组（0.923±0.018）和健康体检者组（0.911±0.017），差异均有统计学意义（P<0.001），ASA组STAT5b蛋白磷酸化水平（0.81±0.05）明显高于ASS组（0.21±0.03）和健康体检者组（0.24±0.07），差异均有统计学意义（P<0.001）。血浆中IL-2浓度在3组间的差异有统计学意义（F=3.32，P=0.040），ASA组患者IL-2浓度[（110±40）pg/ml]明显高于ASS组[（89±40）pg/ml]和健康体检者组[（88±39）pg/ml]，差异有统计学意义（P=0.044，P=0.016）。②Spearman相关分析显示：在AS患者中STAT5a mRNA表达水平与血小板呈正相关（r=0.353，P=0.006）；ASA组JAK3 mRNA表达水平与IL-2浓度呈正相关（r=0.766，P<0.001），与肾小球滤过率估计值呈负相关（r=-0.485，P=0.007），STAT5a mRNA表达水平与ESR呈正相关（r=0.680，P<0.001），STAT5b mRNA表达水平与hs-CRP呈正相关（r=0.823，P<0.001）。③ROC曲线显示：JAK3 mRNA表达水平预测ASA的ROC曲线下面积（AUC）95%CI为0.920（0.853，0.987），灵敏度和特异度分别是86.7%和90.0%；STAT5a mRNA表达水平预测ASA的AUC 95%CI为0.874（0.787，0.961），灵敏度和特异度分别是96.7%和66.7%；STAT5b mRNA表达水平预测ASA的AUC 95%CI为0.749（0.617，0.881），灵敏度和特异度分别是73.3%和80.0%。结论IL-2/JAK3/STAT5可能参与了AS的发病，并且JAK3 mRNA可作为监测AS疾病活动性的生物学指标。