简介:摘要目的建立检测聚乙二醇化胰高血糖素样肽1类似物(polyethylene glycolylated glucagon-like peptide-1 analogue,PEG-GLP-1a)生物活性的报告基因法,并对该方法进行验证。方法将人胰高血糖素样肽1受体表达载体和分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase, SEAP)报告基因载体瞬时共转染HEK293T细胞,培养后加入PEG-GLP-1a刺激细胞分泌SEAP,使用SEAP报告基因检测试剂盒进行测定,并验证其专属性、准确性、精密度、稳定性等指标。结果人胰高血糖素样肽1受体和SEAP双载体瞬时共转染的HEK293T细胞对PEG-GLP-1a具有强反应性。使用该方法测定PEG-GLP-1a具有良好的专属性。加标回收率为97.6%~102.2%,准确性较好。不同测定日期的日内半数效应浓度的变异系数均不超过10.22%,不同测定日期的日间半数效应浓度的变异系数均不超过13.02%。结论报告基因法可以用于PEG-GLP-1a的生物活性检测。
简介:摘要目的用响应面法对马来酰亚胺活化相对分子质量40 000的聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)(MAL-PEG40K)修饰胰高血糖素样肽1类似物(glucagon-like peptide 1 analog,GLP-1a)的反应条件进行优化。方法对GLP-1a浓度、GLP-1a/MAL-PEG40K摩尔比、反应液pH值、反应温度、反应时长进行单因素试验。以前3个条件为自变量,PEG修饰率为响应值,根据中心组合试验设计原理,研究各自变量及其交互作用对PEG修饰率的影响。通过高效液相色谱法分析PEG修饰率,依据回归分析确定各反应条件的最优值。结果GLP-1a与MAL-PEG40K的最佳反应条件为:GLP-1a浓度2.5 mg/ml,GLP-1a/MAL-PEG40K摩尔比1∶1.25,反应液pH8,反应温度4 ℃,反应时长60 min。该优化条件下,GLP-1a的PEG修饰率可达91.0%。结论响应面法获得了GLP-1a与MAL-PEG40K的最佳反应条件。
简介:【摘要】目的:探讨分析机械通气治疗新生儿肺炎患儿的责任制护理研究。方法:选取 2018年 7月 -2019年 7月我院收治的 94例行机械通气治疗新生儿肺炎患儿为对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组 47例,对照组给予常规护理,观察组在对照组的基础上给予责任制护理。比较各项临床指标、比较不良事件发生情况及临床疗效。结果:观察组体温恢复正常时间、机械通气时间和住院时间低于对照组( P<0.05),观察组复发率 4.25%低于对照组 17.02%( P<0.05),观察组不良事件发生率 4.25%低于对照组 23.40%( P<0.05),治疗有效率 95.74%高于对照组 89.36%( P<0.05)。结论:责任制护理有助于改善机械通气治疗新生儿肺炎患儿的临床症状,降低不良事件发生,提高治疗有效率,具有推广应用价值。