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均匀设计法在实时定量PCR检测条件优化中的应用研究

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摘要目的探索均匀设计在优化实时定量PCR检测条件中的应用,确立心钠素基因实时定量的最佳条件。方法以乳鼠心肌细胞cDNA为模板,退火温度和引物浓度为影响因素,应用均匀设计法探索影响心钠素基因实时荧光定量PCR的扩增条件;量化不同实验条件下的扩增效果,在最优的扩增条件下建立ANP基因定量扩增的相对标准曲线,并检测扩增效率。结果通过均匀设计法的试验设计,用8个试验点,完成了对温度和引物浓度2因素8水平的实验条件优化,建立了ANP基因实时定量PCR检测的最佳组合,为退火温度59.2℃、引物终浓度200μM。结论均匀设计是一种简便易行、快速经济的实时定量PCR检测条件的优化方法。

DOI pj0e2kly4y/887927

作者宋莉;叶珏;王林;王慧;孟宪敏

机构地区不详

出处《中国分子心脏病学杂志》 2010年3期

关键词均匀设计实时定量 PCR 心钠素条件优化实验因素

分类 [医药卫生][内科学]

出版日期 2010年03月13日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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来源期刊

中国分子心脏病学杂志

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均匀设计实时定量 PCR 心钠素条件优化实验因素

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