摘要
摘要目的探讨氧化苦参碱(Oxy)对结肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力的影响及机制。方法对结肠癌HIC/S和人结肠癌细胞(LOVO细胞)系进行复苏，以3×105/孔的密度进行培养，用浓度为0、3.0、6.0、12.0 μmol/L的2 ml Oxy处理，在处理后24、48、72 h，细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞的增殖率，用相位差显微镜观察各组细胞处理后24 h的形态变化；经0、3.0、6.0、12.0 μmol/L的2 ml Oxy处理LOVO细胞系48 h后，Transwell法分析各组细胞系的迁移和侵袭能力，采用原位缺口末端标记法(TUNEL)法和免疫荧光法检测各组细胞中TUNEL阳性细胞数和裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)的表达，采用蛋白质免疫印迹和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞系中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白水平和mRNA水平。结果Oxy处理24、48、72 h以后，结肠癌细胞LOVO和HIC/S的活力随着Oxy浓度的升高而下降(F＝4.983，P<0.01)，各时间点均在Oxy浓度为12.0 μmol/L时活力抑制最显著(F＝4.074，P<0.05)，且经过浓度为6.0 μmol/L的Oxy处理24 h以后，细胞形态开始改变并收缩呈圆形。同时，Oxy在浓度为6.0 μmol/L(t＝1.386，P<0.01；t＝2.984，P<0.01)及12.0 μmol/L(t＝9.852，P<0.001；t＝10.371，P<0.001)干预组的细胞侵袭和迁移能力均显著低于空白对照组，而随着Oxy浓度的增加，显著增加TUNEL阳性细胞的数量(F＝4.376，P<0.05)和cleaved Caspase-3的表达(F＝6.268，P<0.01)；LOVO细胞中VEGF(F＝5.768，P<0.05)，VEGFR2(F＝6.432，P<0.05)，p-PI3K(F＝4.845，P<0.05)，p-Akt(F＝5.436，P<0.05)的mRNA及蛋白表达水平随着Oxy浓度的增加逐渐降低。结论Oxy通过抑制VEGF/PI3K/Akt信号通路活性来抑制结肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力，并诱导其凋亡。
出版日期
2021年10月10日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
